1

Изучение биохимических показателей состава синовиальной жидкости коленного сустава людей разного пола и возраста в норме не выявило статистически значимых различий в показателях белкового спектра и углеводсодержащих соединений синовиальной жидкости коленных суставов здорового человека по признаку пола и возраста. В данном исследовании наиболее тесными корреляционными связями с возрастом человека являются показатели γ-глобулинов и сиаловых кислот.

синовиальная жидкость

гиалуроновая кислота

общий белок

сиаловые кислоты

1. Базарный В.В. Синовиальная жидкость (клинико-диагностическое значение лабораторного анализа) / В.В. Базарный. – Екатеринбург: Изд-во УГМА, 1999. – 62 с.

2. Биохимические исследования синовиальной жидкости у больных при заболеваниях и повреждениях крупных суставов: пособие для врачей / сост.: В.В. Троценко, Л.Н. Фурцева, С.В. Каграманов, И.А. Богданова, Р.И. Алексеева. – М.: ЦНИИТО, 1999. – 24 с.

3. Герасимов А.М. Биохимическая диагностика в травматологии и ортопедии / А.М. Герасимов Л.Н. Фурцева. – М.: Медицина, 1986. – 326 с.

4. Диагностическое значение определения активности гексокиназы в синовиальной жидкости коленных суставов / Ю.Б. Логвиненко [и др.] // Лаб. дело. – 1982. – № 4. – C. 212–214.

5. Лекомцева О.И. К вопросу о клиническом значении исследования гликопротеинов при рецидивирующих стенозирующих ларинготрахеитах у детей / О.И. Лекомцева // Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии. – Ижевск, 2001. – С. 63–64.

6. Менщиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике / под ред. В.В. Меньщикова. – М., Медицина, 1987. – 361 с.

7. Павлова В.Н. Синовиальная среда суставов / В.Н. Павлова. – М.: Медицина, 1980. – С. 11.

8. Семенова Л.К. Исследования по возрастной морфологии за последние пять лет и перспективы их развития / Л.К. Семенова // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. – 1986. – № 11. – С. 80–85.

9. Bitter T. A modified uronic acid carbazole reaction / T. Bitter, H.M. Muir // Anal. Biochem. – 1962. – № 4. – P. 330–334.

В литературных источниках показатели синовиальной жидкости (СЖ) представлены либо устаревшими данными, либо данными без указания использованного метода. В табл. 1 мы приводим ряд референтных значений и результаты собственных исследований СЖ людей, не имевших зарегистрированной суставной патологии.

Мы не оценивали достоверность различий в представленных группах сравнения математическими методами вследствие применения разной методической базы в литературных данных.

Следует заметить, что наши данные не противоречат представленным литературным. Однако ряд показателей, безусловно, нуждается в методическом уточнении.

Материалы и методы исследования

Материал исследования составил от 31 трупа внезапно погибших людей обоего пола (23 мужчины и 8 женщин) в возрасте от 22 до 78 лет, не имевших зарегистрированной экспертом суставной патологии.

Статистическая обработка полученных результатов проводилась методом вариационной статистики, применяемым для малых выборок, с принятием вероятности р, равной 0,05. Для каждой группы наблюдений рассчитывали среднюю арифметическую, среднее квадратическое отношение, ошибку средней. Для исследования корреляции и построения корреляционной матрицы разнородных признаков программное обеспечение выбирает следующие правила вычисления коэффициентов корреляции: при вычислении корреляции двух количественных параметров - коэффициент Пирсона; при вычислении корреляции порядковых/количественных и порядковых параметров - коэффициент ранговой корреляции Кендалла; при вычислении корреляции двух дихотомических признаков - коэффициент сопряженности Бравайса; при вычислении корреляции количественных/порядковых и дихотомических признаков - точечно-бисериальная корреляция. Для идентификации программой шкалы измерения признаков на этапе выбора исходных данных был введен интервал признаков.

Результаты исследования и их обсуждение

Значительно ниже, чем в литературе, мы оцениваем концентрацию общего белка (ОБ) в синовии. Чаще всего используемые для определения концентрации ОБ методы - биуретовый и Лоури - отличаются разной степенью чувствительности и специфичности. Определение белка по Лоури отличается большей чувствительностью, но меньшей специфичностью, чем биуретовый метод . В ряде источников , так же как и в нашей работе, был использован биуретовый метод.

Особый интерес представляет количественное определение основного специфического компонента СЖ - несульфатированного гликозаминогликана - гиалуроновой кислоты (ГК) (полимер дисахаридных последовательностей ацетилированного аминосахара и уроновой кислоты). Известно, что в состав синовии он входит в виде комплекса гиалуронат-протеин СЖ и встроен в поверхность суставного хряща. В приводимых источниках определение ГК начинали с осаждения специфическими осадителями, давая количественную оценку ее содержания по определению уроновых кислот . В наших данных мы приводим количество уроновых кислот после определения в нативной синовии, принимая во внимание то, что осадители гликозаминогликанов не специфичны для их сульфатированных и несульфатированных форм. О количестве сульфатированных гликозаминогликан мы судили по отношению сульфатов к уроновым кислотам. Определение сиаловых кислот в нативной синовии характеризует их общее содержание, т.е. суммированную концентрацию свободных и белковосвязанных сиаловых кислот в составе гликопротеидов. Поскольку гликопротеидные белки плазмы запускают цитокиновый каскад воспалительной реакции после десиалирования, c их определением в синовии закономерно ожидать связи с клиническими характеристиками заболеваний суставов. Мы не смогли сопоставить полученные нами данные по активности протеолитических ферментов, так как в референтных источниках показатели протеолитической активности приводятся со ссылкой на субстрат протаминсульфат (а в наших исследованиях субстратом служил гемоглобин) либо без ссылки на субстрат.

Вследствие того, что возрастные нарушения метаболизма суставных тканей в значительной степени определяют развитие дегенеративно-дистрофических процессов в суставах, а женщины страдают остеоартрозом почти в 2 раза чаще мужчин и в соответствии с поставленными в нашей работе задачами, мы оценили возрастные и половые особенности биохимического состава СЖ коленного сустава человека в норме.

Мы не обнаружили достоверных отличий в биохимическом составе СЖ и женщин по определенным нами показателям, что иллюстрируем данными, приведенными в табл. 2.

Таблица 1

Основные химические компоненты синовиальной жидкости здоровых людей (в сопоставлении данных разных авторов и результатов собственных исследований)

Показатели
Вязкость, мм, 2/с
Белок общий, г/л (ОБ)
Белок, фракции, %, Альбумины
α1-глобулины
α2-глобулины
β-глобулины
γ-глобулины
Гиалуроновая кислота, г/л				1,70-2,20
Сульфаты,ммоль/л,					1,08 ± 0,04
Сульфаты/ УК
Сиаловая кислота, ммоль/				0,16-0,42	0,36 ± 0,01

Примечания. * - жирным шрифтом приведены цифры, полученные из авторских, после пересчета размерности,

** состав белковых фракций в источниках 2 и 4 приведен по данным K. Kleesiek (1978).

1 - В.Н. Павлова, 1980

2 - Герасимов, Фурцева, 1986

3 - В.В. Базарнов, 1999

4 - ЦИТО, 1999

5 - собственные данные

Таблица 2

Биохимические показатели синовиальной жидкости коленных суставов мужчин и женщин

Показатель	Мужчины (n = 23)	Женщины (n = 8)
Общий белок г/л (ОБ)
Белок, фракции, % Альбумины
α1-глобулины
α2-глобулины
β-глобулины
γ-глобулины
Сульфаты, мМ/л
Сульфаты/УК

Таблица 3

Значения корреляционной связи между биохимическими показателями синовиальной жидкости коленных суставов человека с показателем возраста

Примечание. Жирным шрифтом выделены значения коэффициента корреляции, значимо отличающиеся от нуля при уровне значимости p < 0,05.

Таблица 4

Концентрации γ-глобулинов и сиаловых кислот в синовиальной жидкости коленного сустава людей разных возрастных групп

Определяя корреляционную связь возраста и биохимического состава синовии, мы рассчитывали коэффициент и значимость корреляции для отдельных биохимических показателей, а также отношений уроновых кислот к общему белку и сульфатов к уроновым кислотам. Первое отношение мы принимали как показатель накопления продуктов метаболизма протеогликанов, а второе - как степень сульфатирования гликозаминогликанов синовии. Результаты расчета показателей корреляции представлены в табл. 3. Наиболее изменяющимися с возрастом показателями являются γ-глобулиновая фракция белка и сиаловые кислоты. Для отношения сульфатов к уроновым кислотам высок коэффициент корреляции при недостоверном уровне значимости. По остальным показателям не обнаружено значимой корреляционной связи с возрастом. Полученные данные позволяют оценивать корреляционную связь выделенных показателей с возрастом как значимую. Можно предположить, что с возрастом в СЖ происходит некоторое накопление сиалосодержащих соединений и γ-глобулинов. Очевидно, это является следствием возрастания количества гликопротеинов, возможно, являющихся иммуноглобулинами. Одной из их биологических функций является утилизация продуктов распада белковой природы, которые могут поступать из поврежденных тканей в ходе инволюционного процесса при старении . Подчеркиваем, однако, что достоверных различий в уровне указанных соединений в СЖ людей разного возраста мы не обнаружили.

Для выяснения нормативных значений показателей, которые являются наиболее связанными с возрастом, мы оценили достоверность различий концентраций СК и γ-глобулинов в разных возрастных группах. Распределение материала по группам было произведено по схеме, рекомендованной симпозиумом по возрастной периодизации в институте возрастной физиологии АМН СССР . При возрастании этих показателей, достоверных различий в группах мы не обнаружили (табл. 4).

Таким образом, проведенные исследования не выявили достоверных различий показателей белкового спектра и углеводсодержащих соединений СЖ коленных суставов здорового человека по признаку пола и возраста, а наиболее тесные корреляционные связи с возрастом человека выявлены для показателей γ-глобулинов и сиаловых кислот.

Исходя из представленных литературных данных, нетрудно заметить, что при большом разнообразии используемых методов и методик биохимических исследований, информативность и диагностическая значимость данных исследований для практической деятельности не определена.

Библиографическая ссылка

Матвеева Е.Л., Спиркина Е.С., Гасанова А.Г. БИОХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ СИНОВИАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ КОЛЕННОГО СУСТАВА ЛЮДЕЙ В НОРМЕ // Успехи современного естествознания. – 2015. – № 9-1. – С. 122-125;
URL: http://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=35542 (дата обращения: 01.02.2020). Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»

Анализ синовиальной жидкости — лабораторное исследование скопившегося в полости сустава выпота. Процедура взятия суставной жидкости для анализа называется .

Сустав построен из двух (и более) костей покрытых в месте соприкосновения хрящом. Снаружи окутан прочной и герметичной синовиальной сумкой, усиленной связками и сухожилиями. Изнутри синовиальную сумку выстилают клетки, вырабатывающие синовиальную жидкость. Синовиальная жидкость заполняет все полости и щели в суставе.

Благодаря суставам тело может двигаться как единое целое, а суставная жидкость придает движениям плавность.

Анализ суставной/синовиальной жидкости т ак же важен в диагностике заболеваний суставов, как и общий анализ мочи для выявления почечной патологии или общий анализ крови в диагностике малокровия.

Синовиальная жидкость — это

Синовиальная или суставная жидкость или синовий — это вязкая неньютоновская жидкость, находится в полости всех суставов. По консистенции похожа на яичный белок (откуда и получила свое латинское название), а по химическому составу аналогична плазме .

Суставная жидкость в 20 раз гуще крови!

Состав

• фибробласты в синовиальной оболочке вырабатывают гиалуроновую кислоту , (общее количество 3-4 мг/л)
• любрицин (протеогликан 4) — смазывает и облегчает скольжение суставных поверхностей
• интерстициальная жидкость — профильтрованная плазма крови
• ферменты — протеиназы и коллагеназы
• белки — часть поступает из крови, часть синтезируется непосредственно синовиальной оболочкой
• , и прочие компоненты
• клетки — минимальное количество и , единичные для удаления микробов и стареющих клеток синовиальной оболочки в процессе износа сустава

Функции

Суставная жидкость — это плавающая смазка между хрящами в суставе. Становится плотнее при активном движении и жиже в состоянии покоя. Амортизирует и снижает силу удара при беге и прыжках. Поставляет питательные вещества хрящу и удаляет продукты обмена.

Быстро реагирует на все изменения в суставе, выполняя роль индикатора патологического процесса.

Показания

Лабораторное исследование суставной жидкости необходимо для диагностики заболеваний суставов неясного происхождения, особенно для дифференциальной диагностики септического и подагрического артритов, острого моноартрита.

Симптомы-показания к пункции сустава и анализу синовиальной жидкости:

• выпот в суставе
• острая или хроническая хромота
• рука или нога не выполняют функцию опоры из-за боли в суставе
• сочетание с повышением температуры тела, деформацией сустава, его покраснением и отеком
• значительная

Артроцентез

Артроцентез или пункция сустава — это процедура удаления жидкости из полости сустава для последующего лабораторного анализа или же с целью лечения — уменьшения напряжения и боли, введения лекарственных препаратов.

Артроцентез при артрографии — в сустав вводят контрастное вещество и делают серию рентген-снимков. Один из вариантов диагностического применения артроцентеза. Вытеснена более информативными КТ и МРТ.

Артроцентез практически не имеет противопоказаний. Относительное препятствие к пункции — инфекция кожных покровов в месте будущей пункции, продолжающеея кровотечение в сустав, общее тяжелое состояние. Н аиболее часто пунктируют коленный сустав, затем по мере снижения — плечевой, локтевой, лучезапястный, голеностопный, височно-нижнечелюстной.

Специальная подготовка не нужна. Желательно воздержаться от приема пищи за 8-10 часов до процедуры.

Перед пункцией сустава необходимо сообщить врачу о наличии аллергии на любые лекарственные препараты, особенно местные анестетики и йод. При приеме лекарств разжижающих кровь (аспирин, клопидогрель, варфарин) может потребоваться их отмена на несколько дней перед манипуляцией. При необходимости предварительно делают , анализ и .

Выполнение

Кожу в месте будущего прокола дезинфицируют и обезболивают. Врач вводит большую пункционную иглу через кожу и синовиальную оболочку в полость сустава.В стерильный шприц аспирирует суставную жидкость.

Процедура длится несколько минут, после чего на место пункции накладывают давящую повязку.

Шприц с синовиальной жидкостью немедленно отправляют для исследования в лабораторию. Реже — переливают в пробирку с антиагрегантом (гепарином).

Если планируется исследование глюкозы в синовиальной жидкости, то перед артроцентезом берут образец крови, чтоб установить уровень гликемии.

Осложнения

• инфицирование сустава — крайне редко, риск выше при повторных пункциях
• кровотечение в полость сустава
• боль, повреждение хряща или нерва, разрыв связки

Синовиальная жидкость в норме

Синовиальной жидкости в норме очень мало. В коленном суставе от 0,5 до 4 мл, а в плечевом — до 3 мл. Она светло-желтая, прозрачная, вязкая, без примесей.

Что исследуют?

• физические свойства — количество, цвет, прозрачность, вязкость, рН (кислотность)
• химические параметры — глюкоза, мочевая кислота,
• микроскопия окрашенного мазка — общее количество , синовиальной жидкости, атипичные клетки
• микроскопия в поляризационном микроскопе — для выявления кристаллов
• микроскопия мазка по Грамму и бакпосев на питательные среды — для идентификации возбудителя и определения его чувствительности к антибиотикам

Образование муцинового сгустка в уксусной кислоте не проверяют. Тест малоинформативен.

Дополнительно в суставной жидкости исследуют , комплемент, ферменты, иммуноглобулины, гормоны.

Факторы комплемента повышены при ревматоидном артрите и системной красной волчанке.

Физические свойства

В норме синовиальная жидкость прозрачна , светло-соломенного цвета. При воспалении приобретает различные оттенки мутно-желтого и зеленого. Грязно-белый цвет характерен для кристалл-индуцированной артропатии. Красный, коричневый и оранжевый указывают на кровотечение в сустав различного срока давности, что бывает при нарушении свертываемости крови, травме, новообразованиях, туберкулезном артрите, лечении антикоагулянтами.

Чем активнее воспаление в суставе, тем меньше прозрачность.

Для определения вязкости в каплю синовиальной жидкости погружают и вынимают иглу. В норме длинна образовавшегося усика-ниточки больше 5 см. При воспалении — меньше 5 см.

Вязкость остается в пределах нормы при травматическом артрите, системной красной волчанке, остеоартрозе и пигментном виллонодулярном синовиите. Снижается при острой ревматической лихорадке, ревматоидном артрите, подагре, пиогенном и туберкулезном артритах.

Рисовые тельца — это разрушенная суставная оболочка, покрытая сгустками фибрина, бывает при ревматоидном артрите.

Синовиальная жидкость сворачивается при наличии в ней , попавшего при пункции или предыдущей травме. Сгустки мешают подсчету клеток, поэтому суставную жидкость переливают в пробирку с гепарином.

рН (кислотность) снижается при воспалении.

Химический анализ

В здоровой синовиальной жидкости нет белков с высокой молекулярной массой (фибриноген, альфа- и бета-2-макроглобулины), а общее количество белка равно 10-30 г/л (или треть от уровня в крови).

Причины повышения белка: болезнь Бехтерева, артриты, артропатия при болезни Крона и язвенном колите, подагра, псориатический артрит, синдром Рейтера.

Оценить уровень глюкозы в синовии можно только при наличии данных о ее концентрации в крови. По этой причине артроцентез проводят натще, предварительно взяв образец крови.

В норме синовиальная жидкость содержит на 0,5 ммоль/л меньше глюкозы, чем в крови. Инфекционные заболевания суставов снижают глюкозу на 1,1-5,5 ммоль/л по сравнению с кровью.

Уровень мочевой кислоты в синовиальной жидкости 356-475 мкмоль/л, повышается при подагре.

Молочную кислоту (лактат) исследуют редко, в норме до 2,7 ммоль/л, а при септическом артрите — повышается до 55,5 ммоль/л.

Лактатдегидрогераза (ЛДГ ) повышена при ревматоидном артрите, инфекционном артрите, подагре.

Микроскопия

При просмотре мазкапод микроскопом считают количество и вид клеток и кристаллов в суставной жидкости.

Наличие кристаллов в суставной жидкости проверяют в поляризационном микроскопе. В норме их нет.

Виды кристаллов в синовиальной жидкости при заболеваниях

• урат натрия — подагра
• пирофосфат кальция — псевдоподагра
• кортикостероиды — после инъекций стероидов в полость сустава
• холестерол — остеоартроз и ревматоидный артрит
• гидроксиапатит — кальцифицирующий периартрит, остеоартроз, воспалительный артрит

Микробиологическое исследование

Бакпосев синовиальной жидкости проводят непосредственно после взятия материала.

Расшифровка результата

Результаты исследования синовиальной жидкости сгруппированы следующим образом:

• нормальная — все показатели соответствуют норме
• воспалительная
• не воспалительная
• септическая
• геморрагическая

Невоспалительная синовиальная жидкость

• остеоартроз и дегенеративные заболевания суставов
• травматический артрит
• хроническая подагра или псевдоподагра
• склеродермия
• полимиозит
• системная красная волчанка
• узловая эритема
• нейропатическая артропатия (сустав Шарко), например, при сахарном диабете
• серповидно-клеточная анемия
• гемохроматоз
• акромегалия
• амилоидоз

Воспалительная суставная жидкость

• ревматоидный артрит
• реактивный артрит
• псориатический артрит
• острая ревматическая лихорадка
• острая подагра или псевдоподагра
• склеродермия
• полимиозит
• системная красная волчанки
• болезнь Бехтерева
• воспалительные заболевания кишечника
• вирусная, грибковая, бактериальная инфекция в суставе, болезнь Лайма
• острый приступ подагры

Септические изменения

• гнойная бактериальная инфекция
• септический артрит

Геморрагическая суставная жидкость

• травма
• опухоли
• гемофилия и другие коагулопатии — повышенная кровоточивость при дефиците одного из факторов свертывания
• тяжелый дефицит витамина С (цинга)
• синдром Элерса-Данлоса
• нейропатическая артропатия

Пункция сустава и анализ синовиальной жидкости was last modified: Декабрь 1st, 2017 by Мария Бодян

Синовиальная жидкость - один из основных органоспецифических компонентов каждого сустава, в значительной степени определяющий его морфофункциональное состояние. Синовиальная жидкость выполняет метаболическую, локомоторную, трофическую и барьерную функции, играющие важную роль в обеспечении нормальной физиологии сустава и его связи с другими тканями.

Синовиальня жидкость отражает процессы, происходящие в хряще и синовиальной оболочке, и тонко реагирует на нарушения в суставе изменением физико-химических характеристик и клеточного состава. Именно поэтому лабораторное исследование синовиальной жидкости имеет принципиальное значение в диагностике заболеваний суставов. В ряде случаев исследование синовиальной жидкости - первый, а иногда и единственный необходимый диагностический тест. 

Преаналитические предосторожности
В норме количество синовиальной жидкости в суставе невелико, однако при заболеваниях суставов ее объем увеличивается - образуется суставной выпот.

Его получают для анализа пункцией сустава (артроцентеза). Во время процедуры применяют местные анестетики, однако использование прокаина нежелательно, так как он вызывает разрушение клеток. Поскольку синовиальная жидкость нередко образует сгусток, для цитологического исследования ее рекомендуют получать с антикоагулянтом, лучшим из которых признается натриевая соль ЭДТА.

Синовиальная жидкость распределяют в 3 пробирки:
в пробирку с антикоагулянтом для цитологического исследования;
в сухую пробирку для химико-микроскопического исследования и приготовления нативного препарата для микроскопии в поляризованном свете;
в стерильную пробирку для бактериологического исследования.

На бланке направления на исследование синовиальной жидкости в лабораторию врач должен указать ФИО больного, а также клинический диагноз. Это может помочь при идентификации необычных частиц в синовиальной жидкости.

Анализ синовиальной жидкости следует проводить в кратчайшие сроки с момента ее получения.

Ложные результаты могут быть получены при задержке исследования более чем на 6 ч в результате следующих изменений:
снижения количества лейкоцитов;
уменьшения количества кристаллов (пирофосфатадигидрата кальция);
наличия артефактов в виде новообразований кристаллов.

При необходимости допустимо хранение синовиальной жидкости в шприце с минимальным количеством воздуха в холодильнике в течение 1 сут без существенного изменения ее параметров. Более длительное хранение возможно в морозильной камере при температуре -70 °С.

Лабораторная практика
Стандартное лабораторное исследование синовиальной жидкости включает следующие этапы:
оценку физических свойств (объем, цвет, характер, вязкость, мутность, pH, муциновый сгусток);
цитологическое исследование (подсчет количества клеток, микроскопию нативного и окрашенного препарата);
поляризационную микроскопию нативного препарата;
химический анализ;
дополнительные исследования (по показаниям).

ФИЗИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
Объем синовиальной жидкости оценивают с помощью градуированной пробирки, цвет и характер - визуально в проходящем свете по сравнению с дистиллированной водой.

Вязкость определяют гемовискозиметром или по длине нити, тянущейся за стеклянной палочкой, после ее погружения в пробирку и выражают в условных единицах:
1 - высокая вязкость;
2 - умеренная вязкость;
3 - крайне низкая вязкость (приближающаяся к воде).

Для оценки мутности используют балльную оценку:
1 балл - полная прозрачность;
2 балла - легкая мутность;
3 балла - мутность.

Муциновый сгусток образуется при смешивании синовиальной жидкости с уксусной кислотой. В зависимости от состава синовиальной жидкости сгусток может быть плотным или рыхлым. Для определения pH используют диагностические полоски, обычно применяемые для исследования мочи. Этот показатель необходимо определять немедленно после получения синовиальной жидкости (при хранении pH изменяется).

ЦИТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
Существенное диагностическое значение имеет подсчет клеток в синовиальной жидкости, который проводят по общепринятым правилам (ручным или автоматическим способом). В норме цитоз составляет не более 100 клеток в 1 мкл. Хранение синовиальной жидкости в течение нескольких часов при комнатной температуре ведет к разрушению лейкоцитов.

Микроскопическому исследованию подвергают как нативный, так и окрашенный препарат. Техника его приготовления стандартная, рекомендуют использование цитоцентрифуги. Исследование нативного препарата позволяет ориентировочно оценить содержание клеточных элементов, выявить рагоциты и неклеточные частицы. В окрашенном препарате подсчитывают цитограмму (синовиоцитограмму) на 100-200 клеток, предпочтительнее в 2-3 препаратах. Вопреки известному мнению, что клетки тканевого происхождения в синовиальной жидкости преобладают над форменными элементами крови, часто клеточный состав выпота представлен преимущественно нейтрофилами и лимфоцитами.

При артритах в синовиальной жидкости могут встречаться особые формы нейтрофилов - рагоциты. В их цитоплазме содержатся включения иммунных комплексов, что придает клетке «ячеистый» вид (вакуолизация в виде грозди винограда).

ПОЛЯРИЗАЦИОННАЯ МИКРОСКОПИЯ
Для выявления кристаллов используют поляризационную микроскопию.

Для успешной идентификации кристаллов необходимо соблюдать ряд условий:
исключение контаминации образца синовиальной жидкости;
исключение применения ЭДТА, растворяющего кристаллы;
использование абсолютно чистых пипеток, пробирок и предметных стекол.

Работу следует проводить в незапыленной рабочей зоне. Основное условие - наличие поляризационного микроскопа с хорошей оптикой. Для приготовления препарата на стекло наносят небольшую каплю хорошо перемешанной синовиальной жидкости, которую накрывают покровным стеклом (следят, чтобы не образовались пузырьки воздуха). Оптимально исследование двух препаратов. Проводят микроскопию при малом увеличении, затем при увеличении в 1000 раз. Ураты натрия (MSUM) имеют вид длинных игл или пучков размером 1-20 мкм, они хорошо видны на черном фоне как белые «искры» вследствие двулучепреломления. Часто выявляются в нейтрофилах, где их количество значительно увеличивается при острых приступах подагры. Кристаллы дегидропирофосфата кальция (CPPD) имеют разную форму (как правило, прямоугольников или ромбов с тупыми концами) и очень мелкие размеры (менее 2 мкм в диаметре). Они видны несколько хуже из-за слабого свечения. Поскольку основная цель исследования синовиальной жидкости - исключение инфекционного процесса, необходимо выполнять окраску мазков по Граму (что не исключает необхо-димости бактериологического исследования).

ХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ
Белок и глюкозу определяют методами, которые используются в клинической практике для определения белка и глюкозы в моче. Для полуколичественной оценки могут быть использованы диагностические полоски. При тяжелых гнойных артритах рекомендуют определение лактата.

ОБЕСПЕЧЕНИЕ И КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Существует высокая вариабельность результатов анализа синовиальной жидкости в различных лабораториях. Специфических подходов к организации контроля качества при исследовании синовиальной жидкости не существует. Важное условие - стандартизация технологии лабораторного анализа синовиальной жидкости.

При диагностике подагры в синовиальной жидкости определяют концентрацию мочевой кислоты (так же как и в плазме крови). Определение аутоантител (прежде всего, ревматоидного фактора и аутоантител к ДНК) удобно выполнять методом латексагглютинации.

Клинико-диагностическое значение
При патологии цвет синовиальной жидкости изменяется в зависимости от характера суставного выпота (серозный, геморрагический, фибринозный, смешанный). При вторичных синовитах синовиальной жидкости приобретает янтарный цвет, а при ревматоидном и псориатическом артрите цвет варьирует от желтого до зеленого. Желто-зеленый цвет синовиальной жидкости может быть при инфекционных и подагрических поражениях суставов. При септическом или травматическом повреждении сустава синовиальной жидкости приобретает кровянистый цвет различной степени выраженности. При пигментированном ворсинчато-узловом синовите суставной выпот имеет коричнево-красный цвет. Сливкообразный характер синовиальной жидкости могут придавать жиры при внутрисуставных переломах. Золотистый оттенок синовиальной жидкости обусловлен присутствием холестерина.

Мутность характерна для ревматоидного, псориатического или септического артрита. Вязкость синовиальной жидкости снижается при ревматизме, ревматоидном, подагрическом и псориатическом артрите, болезни Рейтера, артрозах, анкилозирующем спондилоартрите, в меньшей степени - при посттравматических артритах. Рыхлый муциновый сгусток всегда указывает на наличие воспалительного процесса в суставе (ревматоидный артрит и другие заболевания), однако существуют более совершенные его индикаторы.

Изменение pH синовиальной жидкости не имеет принципиального диагностического значения, его значение снижается при воспалении. При микроскопии нативного препарата могут быть обнаружены неклеточные частицы - экзогенные (шипы растений, фрагменты искусственных кристаллов, компоненты эндопротезов, суспензии лекарственных препаратов) и эндогенные (фрагменты хряща, менисков, связок, кристаллы) компоненты. Появление компонентов эндопротезов в синовиальной жидкости - прогностический признак развития его нестабильности. Среди эндогенных компонентов синовиальной жидкости важнейший элемент, имеющий принципиальное клинико-диагностическое значение, - кристаллы урата натрия и пирофосфата кальция. В синовиальной жидкости могут выявляться амилоидные тельца, капли нейтрального жира, кристаллы холестерина, кальция, гематоидина. 

Цитоз - один из наиболее чувствительных диагностических критериев, позволяющий дифференцировать воспалительные и невоспалительные заболевания и оценивать динамику патологического процесса. Повышение количества лейкоцитов в синовиальной жидкости характерно для острого периода любого воспалительного артрита (например, при приступе подагры количество лейкоцитов достигает 60х106 клеток в 1 мкл). Умеренный цитоз отмечен при псевдоподагре, синдроме Рейтера, псориатическом артрите. При инфекционном (бактериальном) артрите цитоз обычно выше (50х103 клеток в 1 мкл), в таких образцах выявляется рост микрофлоры. Малый цитоз (менее 1-2х103 клеток в 1 мкл, преимущественно нейтрофилы) характерен для «механического» поражения сустава, в том числе для микрокристаллических артритов.

При ревматоидном артрите содержание гранулоцитов достигает 90%, а количество лимфоцитов снижается менее 10%. Эти изменения более выражены при серопозитивном варианте ревматоидного артрита. При токсико-аллергических синовитах, синовиальной форме туберкулеза или артритах паранеопластической природы в синовиальной жидкости преобладают мононуклеары.

Наличие рагоцитов в значительном количестве характерно для ревматоидного артрита. Единичные рагоциты могут встречаться и при других поражениях сустава (септическом артрите и воспалительных артропатиях). LE-клетки встречаются в синовиальной жидкости при системной красной волчанке примерно у 50% больных. Атипичные клетки в синовиальной жидкости регистрируют сравнительно редко.

Бактериоскопия имеет только вспомогательное и часто очень ограниченное значение, так как при подозрении на микробный характер воспаления необходимо стандартное бактериологическое исследование. Однако при микроскопии мазка синовиальной жидкости могут быть обнаружены гонококки при гонококковом артрите. Наличие в мазках грамположительных кокков, объединенных в гроздья, позволяет предположить стафилококковую этиологию инфекции. Другими возбудителями инфекционных артритов могут быть стрептококки, грамотрицательные палочки. При грибковых артритах (кандидамикозе, аспергиллезе) в синовиальной жидкости выявляется мицелий грибка. Уровень белка в синовиальной жидкости несколько повышается при дегенеративных заболеваниях и посттравматических артритах. Более выраженное увеличение содержания общего белка наблюдается при воспалительных заболеваниях (например, при ревматоидном артрите - до 70 г/л), часто при этом изменяется и его качественный состав.

Другой важный параметр, характеризующий состояние синовиальной жидкости, - уровень глюкозы. Это более специфичный, но менее чувствительный индикатор воспалительных изменений в суставе, так как уровень глюкозы в синовиальной жидкости заметно снижается при воспалительных артропатиях. Именно поэтому в последние годы для экспресс-диагностики гнойных (септических) артритов определяют уровень лактата в синовиальной жидкости. Изменения состава синовиальной жидкости позволяют установить воспалительную природу заболевания, приведшего к образованию суставного выпота. Нейтрофильный лейкоцитоз, увеличение концентрации белка и лактата, а также снижение уровня глюкозы - важные признаки воспалительного процесса в суставе. Иммунологические методы также позволяют дифференцировать воспалительные и невоспалительные заболевания суставов. Аутоантитела появляются в синовиальной жидкости раньше, чем в плазме крови.

Процедура, которая носит название «исследование синовиальной жидкости», необходима для диагностики разнообразных дистрофических и воспалительных заболеваний суставов.

Синовиальная жидкость – это экссудат, который вырабатывает суставная оболочка, состоящая из соединительной ткани и выстилающая костные и хрящевые поверхности. Она выполняет в суставе следующие функции:

• локомоторную;
• метаболическую;
• барьерную;
• трофическую.

Суставная жидкость быстро реагирует на все воспалительные процессы, возникающие в сочленении, синовиальной оболочке и хрящевой ткани. Это вещество – один из важнейших суставных компонентов, который определяет морфофункциональное состояние сочленения.

В нормальном, здоровом суставе объем жидкости умеренный. Но при развитии некоторых суставных недугов образуется так называемый суставной выпот, который подлежит исследованию. Чаще других делают анализ образца синовиальной жидкости крупных сочленений (локтевых, коленных).

Получить синовиальную жидкость можно при помощи пункции. Важнейшим условием при взятии пункции является стерильность сустава.

В стандартный анализ образца синовиальной жидкости входит:

1. Макроскопический анализ пунктированной жидкости (цвет, объем, мутность, вязкость, муциновый сгусток).
2. Подсчет количества клеток.
3. Микроскопия нативного препарата.
4. Цитологический анализ окрашенного препарата.

У здорового человека синовиальная жидкость отличается светло-желтым (соломенным) цветом. Однако и при артрите, и при анкилозирующем спондилоартрите () окраска исследуемой жидкости остается желтой. При воспалительных процессах цвет суставной жидкости может становиться другим, в зависимости от характерных изменений синовиальной оболочки.

При наличии псориатического или ревматоидного артрита окраска исследуемого экссудата может варьироваться от желтого до зеленого цвета. При травматических или бактериальных заболеваниях цвет синовиальной жидкости колеблется от бордового до коричневого.

Синовиальная жидкость здорового сустава прозрачная, но при наличии псориатического, ревматоидного или септического артрита наблюдается ее помутнение.

Характер вязкости зависит от:

1. уровня рН;
2. солевой концентрации;
3. присутствия вводимых ранее препаратов;
4. степени полимеризации гиалуроновой кислоты.

Повышенный уровень вязкости отмечается при:

• системной красной волчанке;
• различных травматических изменениях.

Снижение показателей вязкости наблюдается при:

1. ревматизме;
2. артрозах;
3. анкилозирующем спондилоартрите;
4. разнообразных артритах (псориатическом, подагрическом, ревматоидном).

Одной из важнейших особенностей синовиальной жидкости является способность к продуцированию муцинового сгустка в результате смешивания с уксусной кислотой.

При этом наличие рыхлого сгустка свидетельствует о происходящих в суставах воспалительных процессах.

Главный анализ, определяющий патологию сочленения

Главным исследованием, диагностирующим ту или иную патологию, является микроскопический анализ образца синовиальной жидкости.

В первую очередь врачи уделяют внимание подсчету числа клеток в препарате. Нормой является до 200 клеток/мкл. Значительное увеличение числа клеток называется цитозом. Цитоз позволяет диагностировать дистрофические и воспалительные заболевания, четко оценивать развитие воспалительных процессов.

В период обостренной стадии течения любого вида артрита у пациента наблюдается ярко выраженный цитоз (число клеток колеблется от 30 000 до 50 000).

1. При микрокристаллических артритах у больного проявляется незначительный цитоз.
2. При синдроме Рейтера, псевдоподагре или псориатическом артрите цитоз носит умеренный характер (от 20 000 до 30 000 клеток).
3. Если содержание клеток превышает 50 000, у пациента диагностируют бактериальный артрит.

Тщательный анализ может выявить у больного наличие большого количества разнообразных кристаллов, но для диагностики важными являются только два их типа. При псевдоподагре у пациента присутствуют кристаллы дигидропирофосфата кальция, а наличие кристаллов урата натрия свидетельствует о подагре. Обнаружить эти отложения можно при помощи поляризационной микроскопии.

В здоровой синовиальной жидкостной присутствуют элементы крови (лимфоциты, моноциты, нейтрофилы) и разнообразные клетки ткани (гистиоциты, синовиоциты).

При воспалительных процессах в суставном экссудате можно обнаружить особую форму нейтрофилов – рагоциты. Такие клетки имеют ячеистую структуру, образованную за счет включения в цитоплазму иммунных комплексов. Наличие рагоцитов в основном свидетельствует о ревматоидном артрите.

Обнаружение в синовиальной жидкости мононуклеаров характерно для туберкулезных процессов, аллергических синовитов и артритов, развившихся на фоне новообразований.

Стоит отметить, что для воспалительных суставных заболеваний характерно повышение острофазовых показателей и уровня лактатдегидрогиназы.

Микроскопическое исследование мазка позволяет обнаружить грамположительные кокки, хламидии или гонококки. Нередко у пациентов выявляются грибковые бактерии. Чтобы точно определить характер инфекционного процесса и установить чувствительность к антибиотикам, медики делают посев синовиальной жидкости на патогенную микрофлору.

Проводить пункцию суставного экссудата можно только по предписанию врача-ревматолога. В заключении, видео в этой статье поднимет очень интересный вопрос протезирования синовиальной жидкости.

[02-049 ] Микроскопическое исследование синовиальной жидкости

635 руб.

Заказать

Исследование синовиальной жидкости с описанием ее физико-химических свойств и характеристикой клеточных элементов, котороепроводится для диагностики различных воспалительных заболеваний суставов и дистрофических процессов.

Синонимы русские

• Пункция сустава
• Диагностика артритов

Синонимы английские

• Microscopic examination of synovial fluid
• Synovial fluid examination - Pathology Test

Метод исследования

Микроскопия.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Синовиальную жидкость.

Общая информация об исследовании

Анализ показан больным с поражением одного или нескольких суставов неясного генеза, проявляющихся болезненностью суставов и их отечностью, в случае когда исследование синовиальной жидкости (СЖ) поможет в постановке диагноза. Анализ включает в себя определение физико-химических свойств жидкости и микроскопическое исследование клеточных элементов. Наиболее серьезным основанием для его назначения является необходимость исключить инфекционный процесс в суставе. В случае воспаления синовиальная жидкость часто собирается в верхнем суставном этаже, образуется "суставной выпот". Синовиальная жидкость берется путем пункции сустава. Инфекционные осложнения при этом бывают крайне редко.

Синовиальная жидкость служит "смазкой" для хрящей и связок. По изменению ее клеточного состава и физико-химических свойств можно судить о патологических процессах в суставе. Например, известно, что синовиальная жидкость в суставах, пораженных остеоартрозом, имеет более низкую вязкость и эластичность, чем синовиальная жидкость в здоровых суставах.

В частности, одним из критериев такого воспалительного заболевания суставов, как подагра, является обнаружение кристаллов мочевой кислоты в синовиальной жидкости. Причем определение мочевой кислоты в синовиальной жидкости имеет большее прогностическое значение, чем анализ сыворотки крови, так как концентрация мочевой кислоты в сыворотке в период острого приступа может быть в пределах нормы, а кристаллы мочевой кислоты в синовиальной жидкости обнаруживаются даже в межприступном периоде.

У больных с ревматоидным артритом исследование синовиальной жидкости имеет большое значение для подтверждения диагноза и определения местной активности воспалительного процесса. При ревматоидном артрите количество лейкоцитов в синовиальной жидкости повышается до 25 000 в 1 мкл за счет нейтрофилов (25-90 %), содержание белка достигает 40-60 г/л. В цитоплазме лейкоцитов обнаруживают включения, вакуоли, похожие на кисть винограда (рагоциты). Эти клетки содержат фагоцитированный материал – липидные или белковые вещества, ревматоидный фактор, иммунные комплексы, комплемент. Рагоциты обнаруживают и при других заболеваниях – ревматическом, псориатическом артритах, системной красной волчанке, бактериальных артритах, подагре, – но не в таком количестве, как при ревматоидном артрите.

Наиболее выраженные изменения в синовиальной жидкости обнаруживают при бактериальных артритах. Внешне синовиальная жидкость может иметь вид гноя; содержание клеток достигает 50 000-100 000 в 1 мкл, из них нейтрофилы составляют более 80 %. Иногда в первые 24-48 ч. острого артрита количество клеточных элементов может быть меньше 25 000 в 1 мкл.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики (в том числе дифференциальной) заболеваний суставов,
• для оценки эффективности вне- и внутрисуставной терапии,
• для того чтобы установить степень местной воспалительной активности и характер воспалительного процесса,
• для наблюдения за динамикой патологического процесса в суставах.

Когда назначается исследование?

• При распознавании суставных заболеваний и особенностей их течения, когда синовиальная жидкость есть в избыточных количествах: при выраженной боли в суставах и затрудненности движения, видимом поражении сустава (опухании).

Что означают результаты?

В здоровом суставе синовиальная жидкость является прозрачной. При ревматоидном, псориатическом или септическом артрите происходит ее помутнение.

Цвет жидкости в норме светло-желтый. При воспалении он меняется в зависимости от характера изменений в синовиальной оболочке, например, при ревматоидном и псориатическом артрите окраска колеблется от желтого до зеленого цветов.

Число клеток в препарате в норме – до 200 клеток/мкл. Увеличение количества клеток (цитоз) позволяет дифференцировать воспалительные и дистрофические заболевания и оценивать динамику воспалительного процесса. Выраженный цитоз (30 000 – 50 000) характерен для острого периода воспаления при любых артритах, умеренный цитоз (до 20 000 – 30 000) отмечен при псевдоподагре, синдроме Рейтера, псориатическом артрите. Незначительный цитоз характерен преимущественно для микрокристаллических артритов. Цитоз более 50 000 в большинстве случаев указывает на наличие бактериального артрита.

В синовиальной жидкости может быть идентифицировано большое количество разнообразных кристаллов. Однако диагностическую ценность представляют только два типа из них. Кристаллы урата натрия являются признаком подагры, а кристаллы дигидропирофосфата кальция обнаруживаются при псевдоподагре. Эти кристаллы могут быть выявлены при поляризационной микроскопии.

В норме в синовиальной жидкости обнаруживаются и клетки тканевого происхождения (синовиоциты, гистиоциты), а также элементы крови. Это преимущественно лимфоциты, реже – нейтрофилы и моноциты. При воспалении в синовиальной жидкости могут встречаться особые формы нейтрофилов – рагоциты. Их клетки имеют "ячеистый" вид за счет включения иммунных комплексов в цитоплазму. Это наиболее характерные признаки при ревматоидном артрите. При некоторых состояниях (аллергические синовиты, туберкулезный процесс, артриты на фоне новообразований) в синовиальной жидкости преобладают мононуклеары.

Изменения синовиальной жидкости при различных патологических процессах

Признак	Тип изменений
	Невоспалительный	Воспалительный	Септический
	Соломенно-желтый		Варьируется
Прозрачность	Прозрачная	Полупрозрачная
Лейкоциты, в 1 мкл		2 000 – 75 000
Нейтрофилы, %
Кристаллы
Бактериологическое исследование	Отрицательное	Отрицательное	Иногда положительное
Заболевания	Остеоартроз, травматический артроз, асептический некроз, системная красная волчанка	Ревматоидный артрит, подагра, псевдоподагра, системная красная волчанка, серонегативные спондилоартропатии	Гонококковый артрит, туберкулезный артрит, инфекционный артрит (стафилококковый и стрептококковый)

Изменения синовиальной жидкости при артрите и артрозе



Важные замечания

• Окончательные выводы для постановки диагноза необходимо делать, исходя из комплексного учета все данных, включающего сопоставление результатов лабораторных анализов и клинической картины в целом.

• Выявление гена гистосовместимости HLA-B27. Определение предрасположенности к развитию спондилоартропатий (в т.ч. анкилозирующего спондилита - болезнь Бехтерева)

Кто назначает исследование?

Ортопед, хирург, ревматолог, артролог.

Литература

• Tercic D & Bozic B: The basis of the synovial fluid analysis. Clin Chem Lab Med 2001; 39(12):1221-1226.
• Garcia-De La Torre I: Advances in the management of septic arthritis. Rheum Dis Clin North Am 2003; 29:61-73.
• Захарова М.М. Исследования синовиальной жидкости. В кн.: Ревматология. Национальное руководств. Под ред. академика РАМН Е.Л. Насонова и академика РАМН В.А. Насоновой. М., "ГЭОТАР-Медиа", 2008, с. 62-66.