Kliinilise mikrobioloogia seadmed

Kaasaegsed seadmed mikrobioloogilise protsessi kõigi etappide automatiseerimiseks mikrobioloogia laboris võimaldavad teil kiiresti tuvastada mikroorganisme ja määrata nende tundlikkus antimikroobsete ainete suhtes, et määrata piisav varane ravi.

Mikrobioloogialabori automatiseerimine pakub:

• Tulemuse saavutamiseks kuluva aja lühendamine 24-72 tunnini
• Vigade arvu vähendamine
• Tööjõukulude tõhus vähendamine
• Tootlikkuse tõus
• Patsiendi ravi efektiivsuse parandamine
• Voodipäeva keskmise pikkuse vähendamine
• Võimalus olukorda reaalajas analüüsida
• Lugemistulemuse standardimine atov
• Andmebaasi loomine

Täisautomaatne bakterioloogiline laborBioMerieux

Mikrobioloogilised seadmed Biovitrum

Biovitrum on üks juhtivaid mikrobioloogiliste seadmete tootmise ja tarnimise alal Venemaal. Valmistame ja müüme innovaatilisemate tehnoloogiatega välja töötatud mikrobioloogiliste uuringute seadmeid.

Mikrobioloogilise labori sisseseade peaks täielikult vastama kaasaegsetele kvaliteedi-, valmistatavuse- ja ohutusstandarditele ning aitama teadlasel ülesandeid võimalikult tõhusalt lahendada. Mikrobioloogialaboris peaks koos spetsiaalsete instrumentide ja seadmetega olema ka üldine laborivarustus parandada laborandi kvaliteeti ja tootlikkust.

Mikrobioloogialabori tööks vajalik kaasaegne üldlabori varustus

Mikrobioloogi töö toimub range steriilsuse tingimustes, mis võimaldab vältida mikroobset saastumist ja diagnostilisi vigu. Säilitada steriilsed tingimused ning kaitsta laboritöötajaid ja uuritavas kultuuris olevaid esemeid mikroobse saastumise eest Seda sorti on mikrobioloogiliste laboriseadmete lahutamatu osa, mis tagab ülipuhtad töötingimused. Mikrobioloogilise labori üks olulisi instrumente on , kasutatakse lahuste ja vedelate segude eraldamiseks erineva tihedusega fraktsioonideks. Üldotstarbelised laboriseadmed hõlmavad ka reaktiivide hoidmist ja töötemperatuuride hoidmist. Kasutamine madala temperatuuriga külmikud võimaldab külmutada ja ohutult säilitada bioloogilisi proove temperatuuril kuni -150°C.

Analüütilised ja abistavad üldlaboriseadmed

Mikrobioloogilise labori funktsionaalsuse laiendamine võimaldab kasutada analüütilist üldine laborivarustus . Uuritavate proovide koostist on võimalik kvalitatiivselt ja kvantitatiivselt iseloomustada abil, mis tõstavad rutiinsetes uuringutes töö tootlikkust ja mugavust.

TUNNI TEEMA: Bakterioloogiline labor ja tööreeglid selles. Mikroorganismide klassifikatsioon. Bakterite morfoloogia. Mikroobide tüübi määramise meetodid. bakterioskoopiline meetod. Sukeldussüsteemiga mikroskoopiatehnika.

ÕPI-EESMÄRK: Tutvuge bakterioloogialabori seadme ja tööreeglitega selles. Tutvuge mikroorganismide klassifitseerimise põhimõtetega. Uurida bakterite morfoloogilisi tunnuseid ja mikroobide tüübi määramise meetodeid. Omandada bakterioskoopilist uurimismeetodit ja sukeldumissüsteemiga mikroskoopia tehnikat.

TUNNI EESMÄRGID:

1. Tutvuge bakterioloogilise labori ülesehitusega ja tööreeglitega selles.

2. Tutvuda mikroorganismide klassifitseerimise põhimõtetega.

3. Uurida bakterite morfoloogilisi tunnuseid ja mikroobide tüübi määramise meetodeid.

4. Omandage sukeldumissüsteemiga mikroskoopia tehnikat.

Bakterioloogiline laboriseade

Bakterioloogialabor on mõeldud bakteriaalsete infektsioonide patogeene sisaldavate materjalide uurimiseks, sanitaar- ja mikrobioloogiliste näitajate määramiseks, spetsiifilise immuunsuse seisundi ja intensiivsuse kontrollimiseks ning muudeks mikrobioloogilisteks uuringuteks. Bakterioloogiline labor peaks asuma teistest laboritest eraldatud ruumides, kus on vajalik varustus ja mööbel. Laboris peaks olema eraldi sissepääs, garderoob ja duširuum. Bakterioloogiline labor peaks sisaldama järgmisi ruume:

Ruum materjalide vastuvõtmiseks ja registreerimiseks;

Kastruumid mikrobioloogilisteks uuringuteks;

autoklaav;

pesemine;

Vivarium.

Mikrobioloogiliste uuringute ruumid on varustatud termostaatide, külmikute, tsentrifuugide, kaalude, veevannide ja elektromagnetsegistitega. Vajalik varustus asetatakse laudadele. Tööd nakatunud materjaliga tehakse aastal poks koos eelpoksija. Kasti sissepääsu juures peaks olema desinfektsioonivahendiga immutatud matt. Kastis võetakse saadud proovid lahti, valmistatakse ja fikseeritakse määrded-jäljed, viiakse läbi mikroorganismide inokulatsioonid toitekeskkonnale. Seetõttu asetatakse kasti lauad, millele tööks vajalikud tööriistad: anumad desinfitseerimisvahenditega kasutatud nõude jaoks, riiulid katseklaasidele, katseklaasid ja Petri tassid toitainekeskkonnaga, steriilsed pipetid, uhmrid jne, korgid, maskid ja ka riietusruumis peaksid olema vahetatavad jalanõud. Eesruumi mahuvad termostaadid, külmikud, tsentrifuugid ja muud seadmed. Kastides ja eelkastides tehakse iga päev 30-40 minutit enne ja pärast tööd märgpuhastus, desinfitseerimine ja kiiritamine bakteritsiidsete lampidega.

AT autoklaavitud vaja on kahte autoklaavi: üks autoklaav puhaste materjalide jaoks (klaasnõude, toitekeskkonna, instrumentide steriliseerimiseks); teine ​​autoklaav nakatunud materjalide jaoks (nakatunud instrumentide ja materjalide kõrvaldamiseks).

pesemine mõeldud nõude pesemiseks. Nakatunud materjaliga saastunud nõusid, pipette ja instrumente tuleb pesta alles pärast steriliseerimist. Sellel on kuivatuskapid.

vivaarium viitab ruumidele, mida kasutatakse laboriloomade pidamiseks. Vivaariumis on vajalik karantiiniosakond, ruumid katse- ja tervetele loomadele, ruumid puuride pesemiseks ja desinfitseerimiseks, inventar ja kombinesoonid, köök toidu valmistamiseks, sahver, sööt, põletusahi. Kõik vivaariumi ruumid peaksid olema üksteisest isoleeritud.

Kõik mikroorganismide mikrobioloogilised, biokeemilised ja molekulaarbioloogilised uuringud viiakse läbi spetsiaalsetes laborites, mille struktuur ja varustus sõltuvad uurimisobjektidest (bakterid, viirused, seened, algloomad), samuti nende sihtsuunast (teaduslikud uuringud, haiguste diagnoosimine). Inimeste ja loomade haiguste immuunvastuse ja serodiagnostika uuring viiakse läbi immunoloogilistes ja seroloogilistes (seerum - vereseerum) laborites.

Bakterioloogilised, viroloogilised, mükoloogilised ja seroloogilised (immunoloogilised) laborid on osa sanitaar- ja epidemioloogiajaamadest (SES), diagnostikakeskustest ja suurtest haiglatest. SES laborites tehakse patsientidelt ja nendega kokkupuutuvatelt isikutelt saadud materjalide bakterioloogilisi, viroloogilisi ja seroloogilisi analüüse, uuritakse bakterikandjaid ning tehakse vee, õhu, pinnase, toidu jms sanitaar- ja mikrobioloogilisi uuringuid.

Haiglate ja diagnostikakeskuste bakterioloogilistes ja seroloogilistes laborites tehakse uuringuid soole-, mäda-, hingamisteede ja muude nakkushaiguste diagnoosimiseks, tehakse steriliseerimise ja desinfitseerimise mikrobioloogilist kontrolli.

Eriti ohtlike infektsioonide (katk, tulareemia, siberi katk jne) diagnoosimine toimub erirežiimiga laborites, mille korraldus ja toimimine on rangelt reguleeritud.

Viroloogilised laborid diagnoosivad viiruste põhjustatud haigusi (gripp, hepatiit, poliomüeliit jne), mõned bakterid - klamüüdia(ornitoos jne) ja riketsiae(tüüfus, Q-palavik jne). Viroloogiliste laborite korraldamisel ja varustamisel arvestavad nad viiruste, rakukultuuride ja kanaembrüotega töötamise spetsiifikat, mis nõuavad kõige rangemat aseptikat.

Mükoloogilised laborid teostavad patogeensete seente, mükooside tekitajate põhjustatud haiguste diagnostikat.

Laborid asuvad tavaliselt mitmes ruumis, mille pindala määratakse töö mahu ja eesmärgi järgi.

Igas laboris on:

a) kastid üksikute patogeenirühmadega töötamiseks;

b) seroloogiliste uuringute ruumid;

c) ruumid nõude pesemiseks ja steriliseerimiseks, toiduvalmistamiseks
leniya toitainekeskkond;

d) vivaarium koos kastidega tervetele ja katseloomadele
nyh;

e) testide vastuvõtmise ja väljastamise register.

Koos nende ruumidega on viroloogilistes laborites karbid uuritava materjali spetsiaalseks töötlemiseks ja tööks rakukultuuridega.

Mikrobioloogiliste laborite seadmed

Laborid on varustatud mitmete kohustuslike instrumentide ja aparaatidega.

1. Mikroskoopia instrumendid: bioloogiline immersioonmikroskoop koos lisaseadmetega (illuminaator, faasikontrastseade, tumevälja kondensaator jne), luminestsentsmikroskoop.

2. Termostaadid ja külmikud.

3. Toitekeskkonna, lahuste jms valmistamise seadmed: aparatuur destilleeritud vee saamiseks (destilleerija), tehnilised ja analüütilised kaalud, pH-meetrid, filtreerimisseadmed, veevannid, tsentrifuugid.

4. Tööriistade komplekt mikroobidega manipuleerimiseks: bakterioloogilised aasad, spaatlid, nõelad, pintsetid jne.

5. Laboratoorsed klaasnõud: katseklaasid, kolvid, Petri tassid, madratsid, viaalid, ampullid, Pasteuri ja gradueeritud pipetid jne, seadmed puuvillase marli torude valmistamiseks.

Suurtes diagnostikakompleksides on automaatsed analüsaatorid ja arvutipõhine süsteem saadud teabe hindamiseks.

Laboris on mikroskoopiliste preparaatide peitsimise koht, kus on spetsiaalsete värvainete lahused, alkohol, happed, filterpaber jm Iga töökoht on varustatud gaasipõleti või piirituslambiga ja anumaga desinfitseeriva lahusega. Igapäevaseks tööks peavad laboris olema vajalikud toitekeskkonnad, keemilised reaktiivid, diagnostilised preparaadid ja muud materjalid.

Suured laborid on termostaatilised ruumid mikroorganismide massiliseks kasvatamiseks, seroloogiliste reaktsioonide seadistamiseks. Kasvatamiseks, kultuuride säilitamiseks, laboratoorsete klaasnõude steriliseerimiseks ja muudel eesmärkidel kasutatakse järgmisi seadmeid.

1. Termostaat. Seade, milles hoitakse ühtlast temperatuuri. Enamiku patogeensete mikroorganismide paljunemiseks on optimaalne temperatuur 37 "C. Termostaadid on õhk ja vesi.

2. Mikroanaerostaat. Seade mikroorganismide kasvatamiseks anaeroobsetes tingimustes.

3. C0 2 - inkubaator. Seade kindla gaasi koostisega püsiva temperatuuri ja atmosfääri loomiseks. Mõeldud atmosfääri gaasilisele koostisele nõudlike mikroorganismide kasvatamiseks.

4. Külmikud. Kasutatakse mikrobioloogilistes laborites mikroorganismide kultuuride, toitekeskkonna, vere, vaktsiinide, seerumite ja muude bioloogiliselt aktiivsete preparaatide säilitamiseks temperatuuril umbes 4 °C. Ravimite hoidmiseks temperatuuril alla 0 ° C kasutatakse madala temperatuuriga külmikuid, milles temperatuur hoitakse -20 ° C või -75 ° C.

5. Tsentrifuugid. Seda kasutatakse mikroorganismide, erütrotsüütide ja teiste rakkude settimiseks, mittehomogeensete vedelike (emulsioonid, suspensioonid) eraldamiseks. Laborites kasutatakse erinevate töörežiimidega tsentrifuuge.

6. Kuivatus- ja steriliseerimiskapp(Pasterahi). Mõeldud klaasist laboriklaaside ja muude kuumakindlate materjalide kuiva õhuga steriliseerimiseks.

7. Auru sterilisaator (autoklaav). Mõeldud steriliseerimiseks ülekuumendatud auruga (rõhu all). Mikrobioloogilistes laborites kasutatakse erineva mudeliga autoklaave (vertikaalsed, horisontaalsed, statsionaarsed, teisaldatavad).

BAKTERIOLOOGILISED, VIROLOOGILISED, MÜKOLOOGILISED, IMMUNOLOOGILISED LABORID JA NENDE SEADMED. KAASAEGSTE MIKROKOOPIDE SEADME. MIKROSKOPIA MEETODID. MIKROORGANISMIDE MORFOLOOGIA UURIMISE MEETODID

Programm

1. Mikrobioloogiliste (bakterioloogiliste, viroloogiliste, mükoloogiliste) laborite töö- ja töökorraldus.

2. Mikrobioloogialabori põhiinstrumendid ja seadmed.

3. Mikroskoobid ja mikroskoopilised seadmed. Sukelmikroskoobiga töötamise reeglid (eesmärgid).

Demonstratsioon

1. Mikrobioloogialaborites kasutatavate peamiste instrumentide ja seadmete paigutus ja kasutusala: termostaat, tsentrifuugid, autoklaav, kuivatuskapp, tööriistad ja riistad.

2. Bioloogilise mikroskoobi seade. Erinevad mikroskoopia meetodid: tumeväli, faasikontrast, luminestsents, elektron.

3. Mikroobide (pärm ja bakterid) preparaadid erinevate mikroskoopia meetoditega.

Ülesanne õpilastele

1. Perekonna pärmitaoliste seente mikroskoopilised ja eskiispreparaadid Candida kasutades erinevat tüüpi mikroskoopiaid.

Juhised

Mikrobioloogialaborites töötamise reeglid.

Tööd meditsiiniasutuse mikrobioloogilises laboris tehakse nakkushaiguste patogeenidega - patogeensete mikroorganismidega.

Seetõttu peavad töötajad nakkuse eest kaitsmiseks rangelt järgima sisemisi eeskirju:

1. Kõik töötajad peavad töötama meditsiiniliste hommikumantlite, mütside ja eemaldatavate jalanõudega. Laborisse sissepääs ilma hommikumantlita on rangelt keelatud. Vajalikel juhtudel panevad töötajad näole marli maski. Töö eriti ohtlike mikroobidega on reguleeritud erijuhistega ja toimub turvalistes laborites.

2. Laboris on keelatud suitsetada ja süüa toitu.

3. Töökoht tuleb hoida eeskujulikult korras. Töötajate isiklikke asju tuleks hoida selleks ettenähtud kohas.

4. Juhuslikul kokkupuutel laual, põrandal ja muudel pindadel oleva nakatunud materjaliga tuleb seda kohta hoolikalt desinfitseeriva lahusega töödelda.

5. Mikroobikultuuride säilitamine, jälgimine ja hävitamine peab toimuma vastavalt erijuhendile. Patogeensete mikroobide kultuurid registreeritakse spetsiaalses ajakirjas.

6. Töö lõppedes tuleb käed põhjalikult pesta ja vajadusel desinfitseeriva lahusega töödelda.

Mikroskoobid ja mikroskoopia meetodid

Riis. 1.1. Mikroskoobid.

a — Biolami mikroskoobi üldvaade; b — MBR-1 mikroskoop: 1 — mikroskoobi alus; 2 - ainetabel; 3 - kruvid objektilaua liigutamiseks; 4 - ravimit vajutavad klemmid; 5 - kondensaator; 6 - kondensaatori kronstein; 7 - kruvi, mis tugevdab hülsi kondensaatorit; 8 - käepide kondensaatori liigutamiseks; 9 - kondensaatori iirise diafragma käepide; 10 - peegel; 11 - toruhoidja; 12 - makromeetriline kruvikäepide; 13 - mikromeetrilise kruvi käepide; 14 - objektiivide revolver; 15 - läätsed; 16 - kaldtoru; 17 - kruvi toru kinnitamiseks; 18 - okulaar.

Mikrobioloogilisteks uuringuteks kasutatakse mitut tüüpi mikroskoope (bioloogiline, luminestsents-, elektrooniline) ja spetsiaalseid mikroskoopiameetodeid (faasikontrast, tumeväli).

Mikrobioloogilises praktikas kasutatakse kodumaiste kaubamärkide mikroskoope: MBR-1, MBI-2, MBI-3, MBI-6, "Bio-lam" R-1 jne (joonis 1.1). Need on mõeldud erinevate mikroobide kuju, struktuuri, suuruse ja muude omaduste uurimiseks, mille suurus ei ole väiksem kui 0,2-0,3 mikronit.

Sukeldusmikroskoopia

Kasutatakse meetodi eraldusvõime suurendamiseks valgusmikroskoopia. Valgusoptilise mikroskoopia süsteemi lahutusvõime määrab nähtava valguse lainepikkus ja süsteemi numbriline ava. Numbriline ava näitab objektiivi siseneva valguse maksimaalse koonuse nurga suurust ja sõltub objekti ja objektiivi läätse vahelise keskkonna optilistest omadustest (murdumisvõimest). Objektiivi kastmine keskkonda (mineraalõli, vesi), mille murdumisnäitaja on klaasile lähedane, hoiab ära valguse hajumise objektilt.

Riis. 1.2. Kiirte kulg keelekümblussüsteemis, n on murdumisnäitaja.

Riis. 1.3. Kiirte teekond tumevälja kondensaatorites, a on paraboloidkondensaator; b — kardioidkondensaator; 1 - objektiiv; 2 - keelekümblusõli; 3 - ettevalmistus; 4 - peegelpind; 5 - diafragma.

Seega saavutatakse numbrilise ava ja vastavalt ka eraldusvõime suurenemine. Sukeldusmikroskoopia jaoks kasutatakse spetsiaalseid immersioonläätsi, mis on varustatud märgistusega (MI - õliimmersioon, VI - veekümblus). Sukelmikroskoobi piireraldusvõime ei ületa 0,2 µm. Kiirte kulg keelekümblussüsteemis on näidatud joonisel fig. 1.2.

Mikroskoobi kogusuurendus määratakse objektiivi suurenduse ja okulaari suurenduse korrutisega. Näiteks 90-kordse sukeldusobjektiiviga ja 10-kordse okulaariga mikroskoobi suurendus on: 90 x 10 = 900.

Mikroskoopia läbiva valgusega (erevälja mikroskoopia) kasutatakse määrdunud objektide uurimiseks fikseeritud preparaatides.

Tumevälja mikroskoopia. Seda kasutatakse mikroobide intravitaalseks uurimiseks looduslikes värvimata preparaatides. Tumevälja mikroskoopia põhineb valguse difraktsiooni nähtusel vedelikus hõljuvate osakeste külgvalgustuse korral ( Tyndalli efekt). Efekt saavutatakse paraboloid- või kardioidkondensaatori abil, mis asendab bioloogilises mikroskoobis tavakondensaatorit (joonis 1.3). Selle valgustusmeetodiga satuvad objektiivi ainult objekti pinnalt peegelduvad kiired. Selle tulemusena on tumedal taustal (valgustamata vaateväli) nähtavad eredalt helendavad osakesed. Sellisel juhul on preparaat joonisel fig. 1.4, b (vahetükil).

Faaskontrastmikroskoopia. Mõeldud kohalike ravimite uurimiseks. Faasikontrastseade võimaldab näha mikroskoobis läbipaistvaid objekte. Valgus läbib erinevaid bioloogilisi struktuure erineva kiirusega, mis sõltuvad objekti optilisest tihedusest. Selle tulemusena toimub valguslaine faasi muutus, mida silm ei taju. Faasiseade, mis sisaldab spetsiaalset kondensaatorit ja läätse, muudab valguslaine faasi muutused nähtavateks amplituudimuutusteks. Seega saavutatakse objektide optilise tiheduse erinevuse suurenemine. Nad omandavad suure kontrasti, mis võib olla positiivne või negatiivne. Positiivseks faasikontrastiks nimetatakse objekti tumedat kujutist eredas vaateväljas, negatiivseks - objekti heledat kujutist tumedal taustal (vt. joon. 1.4; lisal).

Faaskontrastmikroskoopia jaoks kasutatakse tavalist mikroskoopi ja täiendavat faasikontrastseadet KF-1 või KF-4 (joonis 1.5), samuti spetsiaalseid valgustajaid.

Luminestsentsmikroskoopia (või fluorestsentsmikroskoopia). Põhineb fotoluminestsentsi fenomenil.

Luminestsents- ainete kuma, mis tekib väliskiirguse mõjul: valgus, ultraviolett, ioniseeriv jne. Fotoluminestsents - objekti luminestsents valguse mõjul. Kui valgustate luminestsentsobjekti sinise valgusega, kiirgab see punaseid, oranže, kollaseid või rohelisi kiiri. Tulemuseks on objekti värviline pilt.

Riis. 1.5. Faasi-kontrastseade, a - faasieesmärgid; b - abimikroskoop; c - faasikondensaator.

Kiirgava valguse lainepikkus (luminestsentsi värvus) sõltub luminestsentsaine füüsikalis-keemilisest struktuurist.

Esmane bioloogiliste objektide luminestsents (oma, või bioluminestsents) on täheldatud ilma eelneva värvimiseta, mis on tingitud tema enda luminestsentsainete olemasolust, sekundaarne (indutseeritud) - tekib spetsiaalsete luminestsentsvärvidega preparaatide värvimise tulemusena - fluorokroomid(akridiinoranž, auromiin, korifosfiin jne). Luminestsentsmikroskoopial on tavameetodite ees mitmeid eeliseid: tänu suurele kontrastsusele on võimalik uurida elusaid mikroobe ja tuvastada neid uuritavas materjalis väikestes kontsentratsioonides.

Laboratoorses praktikas kasutatakse fluorestsentsmikroskoopiat laialdaselt paljude mikroobide tuvastamiseks ja uurimiseks.

Elektronmikroskoopia. Võimaldab jälgida objekte, mille mõõtmed ületavad valgusmikroskoobi eraldusvõimet (0,2 mikronit). Elektronmikroskoopi kasutatakse viiruste, erinevate mikroorganismide peenstruktuuri, makromolekulaarsete struktuuride ja muude submikroskoopiliste objektide uurimiseks. Valguskiired asenduvad sellistes mikroskoopides elektronide vooluga, mille lainepikkus on teatud kiirendustel umbes 0,005 nm, s.o. peaaegu 100 000 korda väiksem kui nähtava valguse lainepikkus. Elektronmikroskoobi kõrge eraldusvõime, ulatudes 0,1-0,2 nm-ni, võimaldab teil saada kasulikku kogukasvu kuni 1 000 000.

Nad kasutavad koos "läbipaistva" tüüpi seadmetega skaneerivad elektronmikroskoobid, objekti pinnast reljeefse kujutise pakkumine. Nende seadmete lahutusvõime on palju väiksem kui "edastus" tüüpi elektronmikroskoobidel.

Mikroskoobiga töötamise reeglid

Mis tahes valgusmikroskoobiga töötamine hõlmab vaatevälja õige valgustuse seadistamist ning preparaadi ja selle mikroskoopiat erinevate eesmärkidega. Valgustus võib olla loomulik (päevavalgus) või kunstlik, mille jaoks kasutatakse spetsiaalseid valgusallikaid - erinevat marki valgusteid.

Sukelläätsega preparaatide mikroskoopial tuleb rangelt järgida teatud järjekorda:

1) asetage slaidil ettevalmistatud ja peitsitud määrdile tilk immersiooniõli ja asetage see liuguste lauale, kinnitades selle klambritega;

2) keerata revolver sukelobjektiivi märgini 90x või 100x;

3) langetage mikroskoobi toru ettevaatlikult, kuni lääts on sukeldatud õlitilga sisse;

4) määrake makromeetrilise kruvi abil ligikaudne fookus;

5) teostada preparaadi lõplik teravustamine mikromeetri kruviga, keerates seda sees ainult üks pööre.Ärge laske objektiivil kokku puutuda
paratoomia, kuna see võib põhjustada katteklaasi või objektiivi esiläätse purunemist (immersioonobjektiivi vaba kaugus on 0,1–1 mm).

Mikroskoobi lõpus eemaldage sukelläätselt õli ja liigutage revolver väikesele 8x objektiivile.

Tumevälja ja faasikontrastmikroskoopia jaoks kasutatakse natiivseid preparaate ("purustatud" tilk vms, vt teema 2.1); mikroskoobiga 40x objektiiviga või spetsiaalse immersioonobjektiiviga, millel on iirisdiafragma, mis võimaldab reguleerida numbrilist ava vahemikus 1,25 kuni 0,85. Slaidide paksus ei tohi ületada 1-1,5 mm, katteklaasid - 0,15-0,2 mm.

Nakkushaiguste patogeenidega töötingimuste reguleerimine toimub vastavalt mikroorganismide ohtlikkuse astmele inimesele. Selle põhjal on kindlaks tehtud neli patogeensete bioloogiliste mõjurite (PBA) rühma:

I rühm: eriti ohtlike infektsioonide (katk, rõuged jne) patogeenid

II rühm: väga nakkavate bakteriaalsete, seen- ja viirusnakkuste (siberi katk, koolera, marutaudi jne) patogeenid

III rühm: iseseisvate nosoloogiliste vormidena tuvastatud bakteriaalsete, seen-, viirus- ja algloomsete infektsioonide (läkaköha, teetanus, tuberkuloos jne) tekitajad

IV rühm: bakteriaalse, seenhaiguse, viirusliku septitseemia, meningiidi, kopsupõletiku, enteriidi, toksiliste infektsioonide, ägeda mürgistuse (pseudomonaalne infektsioon jne) tekitajad.

Enamik mikrobioloogilisi laboreid töötab PBA III ja IV rühmaga ning eriti ohtlike infektsioonide (I ja II rühm) patogeenide uurimisega tegelevad ainult spetsialiseeritud laborid.

PPA III ja IV rühmaga töötavad baaslaborid peavad vastama mitmetele nõuetele (eraldi hoone või eraldi sissepääs, vee- ja elektrivarustussüsteemide olemasolu, küte, ventilatsioon jne) ning omama tootmisvõimsusele vastavat vajalikku ruumikomplekti. ja läbiviidud uuringute hulk. Igas laboris peaks olema "puhas" ja "määrdunud" ala.

"Määrdunud" tsooni kuuluvad ruumid materjali vastuvõtmiseks ja registreerimiseks, kastid ja ruumid mikrobioloogilisteks uuringuteks, termostaat, autoklaav materjali desinfitseerimiseks. Kõigi ruumide aknad ja uksed peavad olema hermeetiliselt suletud. Elusate mikroorganismidega töötamiseks mõeldud ruumid peaksid olema varustatud bakteritsiidsete lampidega või bioloogilise turvakapiga. "Musta" tsooni sissepuhke- ja väljatõmbeventilatsioon peab olema varustatud väljatõmbeõhu peenfiltritega. Laudade, autoklaavide, desinfitseerimislahustega konteinerite, puhta ja nakatunud materjali riiulite kohustuslik märgistamine. Laboratoorium peaks olema varustatud spetsiaalse mööbliga, siledate põranda- ja seinapindadega, mis on vastupidavad pesu- ja desinfektsioonivahenditele.

"Puhas" tsoonis on ruumid eeltööde tegemiseks (pesuruum, ettevalmistusruum, ruum toitekeskkonna ettevalmistamiseks ja täitmiseks jne), ruum dokumentatsiooniga töötamiseks, ruumid külmikutega toitainete ja diagnostiliste preparaatide hoidmiseks, garderoob üleriiete jaoks puhkeruum . "Puhtas" tsoonis on võimalik töötada elutu PBA-ga (seroloogilised, molekulaargeneetilised, biokeemilised uuringud).

Patogeensete mikroorganismidega töötamise ohutuse tagamine hõlmab kahte peamist tegurit: tehnilist ja inimlikku. Tehniliseks teguriks on tööks vajalike "puhaste" ja "määrdunud" tsoonide, seadmete, kaitsesüsteemide jms olemasolu. Inimfaktor on inimtegevuse õigsus ohutuse tagamiseks, professionaalsete seadmete oskuse tase, teadmised võimalikest nakkusallikatest ja -mehhanismidest, asjakohane väljaõpe ja väljaõpe.

Töö haridusliku bakterioloogia laboris on seotud ka kahe ohtliku teguriga - nakkushaigusi põhjustavad mikroorganismid ja lahtine tulekahju, mis nõuab epideemiavastaste ja tuleohutusmeetmete järgimist. Õpilased on kohustatud tutvuma ohutusreeglitega ja neid rangelt järgima:

Vajalik:

Töö pikkade varrukatega meditsiinilistes hommikumantlites, meditsiinilistes mütsides ja kingakatetes;

Isiklikke asju hoia selleks selleks ettenähtud kohas, üleriided jäta garderoobi;

Igat tüüpi tegevusi viiakse läbi teatud piirkonnas: töö mikroorganismidega - spetsiaalselt varustatud laborilaual, protokollide täitmine - töölaual;

Nakatunud materjaliga kokkupuutel laual, põrandal ja muudel esemetel teavitada koheselt õpetajat ja desinfitseerida;

· Nakatunud materjalid tuleb asetada tugevatesse veekindlatesse või desinfitseerimislahusega anumatesse, mis suletakse enne laborist väljaviimist.

Töö ajal tuleb laboriuksed suletuna hoida.

Töö lõppedes peske käed põhjalikult, vajadusel töödelge desinfitseeriva lahusega.

laboris söömine

tõmmake vedelik suu kaudu pipetti

süüta üks piirituslamp teisest

kanda põlevat alkoholilampi

Pärast ettenähtud kasutuse lõppu jätke piirituslamp põlema

Jätke töökohale fikseerimata preparaadid, kultuuridega Petri tassid ja muud nakatava materjaliga riistad

puudutage seemnetega Petri tassides testitavat materjali kätega

Bakterioloogilises laboris määratakse infektsiooni tüüp, mis põhjustas teatud kehahaiguse. Selleks kasvatatakse verd, uriini, tserebrospinaalvedelikku ja muid kehavedelikke erinevatel toitainetel. Mõnikord tehakse põllukultuure nahast, nina limaskestast ja neelust. Silmaarstid, olles diagnoosinud "konjunktiviidi", suunavad patsiendi sageli ka bakterioloogilisele uuringule.

Kui kahtlustate ägedat või kroonilist konjunktiviiti, aitab uuring selgitada diagnoosi ja määrata konjunktiviidi põhjustanud bakteri tüüpi. Uuring algab sellest, et spetsiaalse aparaadi abil võetakse konjunktiivikoti sisu ja külvatakse see spetsiaalsele puljongile ja seejärel toitainekeskkonnale. 24–48 tunni pärast kasvavad toitainekeskkonnas bakterikolooniad. Pärast spetsiaalset värvimist uuritakse neid mikroskoobi all ja määratakse konjunktiivil elavate mikroorganismide tüüp. Enamasti on need bakterid, harvemini - muud mikroorganismid (seened, amööb).

Kõige tõhusama antibiootikumi kasutamise küsimuse lahendamiseks määratakse patogeensete bakterite tundlikkus raviainete suhtes.

Kokkuvõtteks anname mõned numbrid ja tuletame veel kord meelde, kuidas saate end nakkuse eest kaitsta.

Pidage meeles, et maa, vesi ja õhk on asustatud mikroorganismidega. Iga liigutuse, pilgutuse, hingetõmbega oleme nendega kontaktis. Meie limaskestad ei lase neil elutähtsatesse organitesse siseneda. Pöörake tähelepanu huvitavatele faktidele, mille on kogunud üks mikrobioloogia armastajatest.

1 g tänavatolmu sisaldab umbes 2 miljonit mikroorganismi, need satuvad maapinnast õhku. Kõige rohkem mikroobe leidub mulla ülemisel 50 cm kõrgusel.

Veebasseinid sisaldavad 5 kuni 10 000 bakterit 1 ruutmeetri kohta. cm ja linna jões - 23000 1 ruutmeetril. cm.

Kuid andmed mikroorganismide arvu kohta 1 ruudus. m meid ümbritsev õhk: õhus metsas või pargis - 100 kuni 1000 mikroobi 1 ruutmeetri kohta. m, mereõhus 100 km rannikust - ainult 0,6, 2000 m kõrgusel - 3.

Keskmise linna kesktänaval on täiesti erinev pilt - 3500 mikroobi 1 ruutmeetri kohta. m, uues majas - 4500, vanas - 36000, haiglas - 79000, hostelis - 40000.

Need numbrid räägivad enda eest. Mikroorganismide hulka kuuluvad viirused, bakterid, seente eosed ja hallitusseened. Lisaks sisaldab tolm ise keemilise koostise poolest, eriti linnatänavatel, korterites, erinevates tööstusharudes, organismile kahjulikke keemilisi ja füüsikalisi lisandeid. Meie limaskestad ja nahk ei suuda alati ilma meie abita sellise koormusega toime tulla. Selleks, et mitte haigestuda, peate meeles pidama ennetusreegleid.