Реакция Вассермана является основой для диагностики такого заболевания как сифилис. Классический вариант этого исследования не применяется в РФ с 1980-х годов, однако заложенная основа используется в аналогах.

Сифилис – это заболевание инфекционной этиологии, которое вызывает Treponema pallidum (бледная трепонема). Инфицирование сифилисом происходит преимущественно половым путем, также возможна вертикальная передача инфекции (при родах от зараженной матери ребенку).

Течение заболевания характеризуется постоянным прогрессированием, наличием рецидивов, периодичностью клинической симптоматики и способностью поражать все органы и системы организма.

Для диагностики сифилиса используют специальные тесты:

• нетрепонемные (микрореакцию преципитации (RPR – антикардиолипиновый тест), реакцию Вассермана, микроскопический тест VDRL, сифилис АгКЛ и другие),
• трепонемные (ИФА, РИФ, РПГА, реакцию иммобилизации трепонем, иммуноблотинг и т.д).

Наиболее «классическим» тестом считается реакция Вассермана.

Справочно. Реакция Вассермана – это иммунологический метод диагностики сифилиса, основанный на реакции связывания комплемента.

Суть RW заключается в том, что кровь больного сифилисом, при добавлении в нее специального белка-агрессора, способна образовывать с ним комплексы, абсорбирующие комплемент, которые будут выпадать в осадок.

Как проводится исследование крови по Вассерману

То есть, к сыворотке крови пациента присоединяют искусственный аналог трепонемы (кардиолипиновый антиген) и специальный связывающий белок (комплимент). Если в крови присутствуют антитела (специфические белки защитники) к бледной трепонеме, то происходит связывание кардиолипинового антигена и этих антител при участии комплемента. Полученное соединение выпадает в осадок, оцениваемый как ++++.

В норме, в сыворотке здоровых людей происходит гемолиз эритроцитов. То есть, в крови нет антител, с которыми могут реагировать кардиолипиновый антиген, а, следовательно, в сыворотке не происходит реакции адсорбирования и связывания комплемента. Свободный комплемент участвует в гемолизе, появление которого оценивается как отрицательная реакция Вассермана, то есть “-“.

Анализ крови на реакцию Вассермана имеет пять вариантов ответа:

• – (свидетельствует о том, что в сыворотке произошел полный гемолиз эритроцитов, а значит, анализ на сифилис отрицателен);
• + (такой ответ трактуется как сомнительный, одним + оценивают слабовыраженную задержку гемолиза);
• ++ (наблюдается при частичной задержке гемолиза и расценивается как слабоположительная реакция Вассермана);
• +++ (такой результат расценивается как положительная RW, свидетельствующая о значительной задержке гемолиза);
• ++++ (резко положительная RW, полное отсутствие гемолиза и выпадение осадка говорит о наличии у пациента сифилиса или других заболеваний, ставших причиной получения ложноположительной RW).

Первый ответ свидетельствует об отрицательной RW и не требует дальнейших исследований. При получении других результатов, следует учитывать, что реакция Вассермана не является высокоточной и специфичной.

Внимание. При проведении анализа крови на реакцию Вассермана достаточно часто наблюдаются ложноположительные результаты.

В связи с этим, при получении сомнительных, слабоположительных и резко положительных реакций Вассермана, для уточнения диагноза проводят трепонемные тесты.

Ложноположительные результаты могут быть связаны с употреблением жирной пищи, спиртных напитков, беременностью, менструацией, малярией, системной красной волчанкой и т.д.

Современное понимание реакции Вассермана

В современных лабораториях «классическая» реакция Вассермана считается устаревшей и не используется. Однако в листе ответов и бланке назначений все равно часто пишут RW.

В настоящее время под этим термином подразумевают модифицированные современные RW.

Наиболее распространенный аналог реакции Вассермана – это RРR (неспецифический антифосфолипидный тест). Он также относится к нетрепонемным тестам (то есть не обладает высокой специфичностью), однако более чувствителен и имеет меньший риск ложноположительных результатов, чем классическая реакция Вассермана.

Тест RРR является скрининговым исследованием, позволяющим обнаружить антитела (IgG и IgM) к кардиолипину.

Для проведения анализа, также, как и для классической реакции Вассермана, применяется венозная кровь.

Анализ желательно сдавать натощак. За час до взятия крови исключается курение. Несмотря на то, что риск ложноположительных результатов при RРR ниже, чем при RW, в идеале, предпочтительно не употреблять накануне анализа спиртные напитки и жирную пищу.

Где сдавать кровь и сколько стоит обследование

Справочно. Ориентировочная стоимость RРR составляет от 330 до 400 рублей и зависит от лаборатории, в которой сдаются анализы.

Также, может использоваться специфический трепонемный тест (РПГА или ИФА IgG/IgМ на сифилис). Этот тест обнаруживает в крови специфические антитела исключительно к бледной трепонеме, поэтому может применяться для уточнения результатов после проведения нетрепонемных тестов. Его стоимость составляет от 320 до 380 рублей.

Показания к исследованию

Положительная RPR может выявляться уже через семь – десять суток после появления у пациента первичного сифилитического шанкра или через три-пять недель после заражения.

Реакция Вассермана обладает чувствительностью от 70 до 80% при диагностике первичного сифилиса и практически стопроцентной чувствительностью при раннем латентном и вторичном сифилисе.

После наступления вторичной стадии, титры начинаю снижаться. Следует учитывать, что около тридцати процентов позднего сифилиса может быть ложноотрицательным по RPR.

Поэтому проведение трепонемных тестов, с целью уточнения диагноза, является обязательным.

Однако, реакция Вассермана (RPR) может эффективно применяться для контроля проводимого лечения сифилиса.

Основными показаниями к проведению анализа служат:

• случайные половые связи;
• употребление наркотиков;
• контакт с больным сифилисом;
• подозрение на сифилис (наиболее специфично появление твердого шанкра);
• контроль лечения сифилиса;
• беременность, донорство, работа в медицинских учреждениях (входит в список стандартных обследований);
• расстройства психики и поражения нервной системы (нейросифилис).

Также, обязательному обследованию подлежат дети, рожденные от инфицированных матерей.

Анализ при беременности

Ложноположительная реакция Вассермана. Причины

Важно. При проведении первичного обследования следует учитывать, что нетрепонемные тесты не обладают специфичностью. Это связано с тем, что антитела к кардиолипину могут появляться не только при инфицировании сифилисом.

Чаще всего ложноположительная реакция Вассермана выявляется у пациентов с:

• СД (сахарный диабет);
• туберкулезом;
• злокачественными новообразованиями;
• аутоиммунными патологиями (системное поражение соединительной ткани);
• вирусными гепатитами;
• энтеровирусной инфекцией;
• тяжелой пневмонией;
• инфекционным мононуклеозом;
• скарлатиной;
• малярией;
• подагрой;
• алкоголизмом;
• (при исключенном до этого (при помощи трепонемного теста) сифилисе, RW может применяться с целью подтверждения этого синдрома);
• эозинофильным инфильтратом в легких.

Также, ложноположительные результаты возможны у детей на седьмой-десятый день жизни, беременных, пациентов после вакцинации и носителей несифилитических трепонем. У лиц, принимающих наркотические средства, реакция Вассермана также будет ложноположительной.

Еще следует учитывать, что при очень высоком титре сифилитических антител могут диагностироваться ложноотрицательные результаты.

В связи с этим, RW следует проводить в комплексе, с использованием специфических трепонемных тестов. Чаще всего применяют ИФА или РПГA к Trepоnemа pаllidum IgG/IgМ,

Положительная реакция Вассермана

Положительная RPR наблюдается при сифилисе:

• первичном (если заражение произошло от одного до трех месяцев назад);
• вторичном (заражение – более трех месяцев назад);
• третичном (заражение- более трех лет назад).

Также, положительный ответ может выявляться в течение года после проведенного лечения и при формировании серорезистентности (также после лечения).

При получении отрицательного ответа нельзя исключить раннее серонегативное первичное или позднее третичное заболевание.

Реакция Вассермана, успешно используемая для диагностики и контроля эффективности лечения сифилиса, широко применяется при массовых обследованиях доноров, беременных женщин, работников образовательных учреждений, торговли и общественного питания.

Реакция Вассермана - как сдавать анализ?

Данный анализ является одним из основных серологических исследований. Кровь для анализа рекомендуется сдавать натощак. Это связано с тем, что употребление алкогольных напитков и жирной пищи может отразиться на точности полученных результатов. Забор крови производится как из вены, так и из пальца.

Ложная реакция Вассермана

В основе реакции Вассермана лежит выработка иммунной системой антител в сыворотке крови заболевшего человека. Выявляются антитела в результате лабораторного исследования антигена – кардиолипина. Положительной реакция считается в случае обнаружения антител в исследуемом образце крови. Однако, нередки случаи так называемой ложноположительной реакции Вассермана. Это связано с парадоксальной реакцией иммунитета человека, когда иммунная система начинает бороться с клетками собственного организма. Именно при таком варианте развития событий в крови тестируются те же противолипидные антитела, что и при заболевании сифилисом.

Причины ложноположительная реакция Вассермана

По данным статистики подобные результаты встречаются в 0,1-2% случаев от общего числа исследований. Возможными причинами могут быть:

• вирусные инфекции (гепатит, кишечные инфекции, малярия, );
• системные заболевания (красная волчанка, дерматомиозит, склеродермия и прочие);
• сердечные воспалительные заболевания;
• беременность;
• заболевания крови;
• прием алкоголя и наркотиков.

Ложноположительная реакция Вассермана в некоторых из перечисленных случаев через определенный продолжительный период (год и более) может становиться отрицательной даже без всякого лечения.

Постановка диагноза ложноположительная реакция Вассермана при беременности является стрессовым фактором для женщины, готовящейся к материнству. Для исключения постановки ошибочного диагноза в таких случаях рекомендовано повторное серологическое исследование, которое проводится через 2 недели после первого. Лечение может быть назначено только после повторного установления резкоположительной реакции.

Как правило, неспецифическая серологическая реакция в большинстве случаев бывает слабоположительной. Следует также учитывать, что выявление слабоположительной реакции Вассермана может зависеть и от методической чистоты и техники постановки исследования.

Скрининг - комплексная диагностика состояния здоровья человека, используется для выявления различных заболеваний и патологических процессов в организме. По большей части скрининговый тест состоит из развернутого анализа крови. , или из вены. Это достаточно простой и недорогой метод диагностики. Одним из главных показателей скринингового теста является кровь на RW, так же вы узнаете срок выполнения анализа. Хотя, в последнее время все больше медицинских лабораторий сходятся во мнении, что данный показатель крови не дает столь подробной картины, как это было принято считать раньше.

Что это такое

RW - что это такое и в каких целях используется данный показатель? Анализ крови на реакцию Вассермана проводится для обнаружения маркера сифилиса,

Воспалительные процессы в мочеполовой системе, вызванные инфекционным возбудителем сифилиса провоцируют выработку , которые усиливают защитную реакцию иммунитета и подавляют рост болезнетворных организмов. Цель анализа крови на RW - выявить наличие данных антител.

Специфика проведения

Для определения реакции Вассермана в одинаковой мере будет пригодна кровь как с вены, так и с пальца. Но, учитывая ряд специфических особенностей данного анализа, результат которого зависит от множества факторов, как внешних, так и внутренних, полагаться на его стопроцентную достоверность нельзя. Сколько делается анализ на выявление в крови белка сифилиса, зависит от того, какая кровь использовалась. Если венозная - до суток, из пальца - несколько часов.

Показатель RW, в первую очередь, будет зависеть от того, откуда берут материал. Если используется кровь из пальца, анализ проводится на основе метода лабораторной диагностики - микроппреципитации. Данный лабораторный анализ на сифилис позволяет очень быстро выявить наличие в кровеносной системе человека антител. Но, их появление может быть вызвано не только развитием сифилиса, но и другими воспалительными процессами, характерными для ряда инфекционных заболеваний. В данном случае действительное заболевание может маскироваться под положительную реакцию Вассермана и выдаваться как сифилис, в то время как реальная причина наличия антител будет развиваться и дальше, усугубляясь неправильно подобранным лечением.

Дает более точный результат, и показывает наличие именно тех антител, которые вызваны развитием сифилиса. Минус данного теста заключается в том, что он дает достоверную информацию только тогда, когда в крови наличие антител превысило допустимый уровень. На начальных стадиях болезни (сифилиса) обнаружен не будет.

Немаловажную роль в результативности показателей играет и правильная сдача материала - или нет, был ли организм подвержен физическим или эмоциональным нагрузкам накануне проведения теста, принимает ли пациент специфические медицинские препараты, способные повлиять на выработку антител кровяными клетками.

Предпосылки к проведению

На реакцию Вассермана назначается при наличии определенных жалоб со стороны пациента и обязателен для сдачи тем лицам, которые находятся в группе риска:

• При симптоматической картине, являющейся характерной для ряда заболеваний, передающихся половым путем.
• При проявлениях сифилиса.
• Все пациенты, которые проходят лечение в условиях больничного стационара, и при необходимости провести хирургическую операции.
• Во время планового медицинского осмотра.
• Медицинские работники, имеющие постоянный контакт с выделениями человеческого организма (кровь, моча, сперма).
• Медицинский персонал, работающий с пациентами, зараженными сифилисом.
• Люди с наркотической зависимостью.
• пациенты.
• Люди, которые жалуются на ряд нетипичных симптомов и не проходящей длительное время лихорадкой.

Во время беременности всем женщинам в обязательном порядке необходимо на реакцию Вассермана. Вызвано это тем, что болезнь довольно продолжительное время может сидеть в организме человека и никак не проявлять себя. RW, что показывает наличие антител при заражении сифилисом, может указать и на бледную трепонему - главного возбудителя болезни.

Расшифровка

Срок исполнения анализа - одни сутки. Для пациентов, которые в больнице проходят лечение от сифилиса, анализ на RW сдается каждый день, для отслеживания динамики разрушения белка и определения эффективности назначенного лечения.

При на реакцию Вассермана, результат может быть положительной и отрицательной. Если в результатах анализа указано RW (-) это свидетельствует об отсутствии в организме человека белка сифилиса. Соответственно RW (+) - его возможное наличие. В данном случае необходимо провести еще один тест на подтверждение диагноза.

Положительный ответ на реакцию Вассермана может иметь четыре подвида, соответственно, в анализе ставится от одного до четырех плюсов. Чем больше плюсов, тем выше вероятность наличия сифилиса. У пациентов, которые перенесли данное заболевание и прошли курс лечения, до конца жизни при сдаче крови может присутствовать ответ с четырьмя плюсами.

Положительный результат при сифилисе с одним или двумя плюсами может также свидетельствовать о наличие других болезней, или патологических отклонений в организме:

• воспалительные процессы в легких, в том числе и при развитии туберкулеза,
• воспаление в соединительных тканях,
• наличие в организме или ВИЧ.
• артрит,
• как следствие перенесенной болезни инфекционного характера,
• как реакция организма на вакцинацию,
• при росте новообразований злокачественного порядка,
• развитие

При сдаче анализа крови беременной женщиной, может также быть положительный ответ на реакцию Вассермана с одним, или двумя плюсами. Для уточнения диагноза делается забор венозной крови для проведения лабораторных исследований - РИФ, ИФА. Даже если реакция была отрицательной, это не дает абсолютную гарантию на отсутствие болезни. При наличии ряда симптомов, необходимо повторить тест.

Анализ на определение сифилиса человеку приходится сдавать едва ли не чаще всех: приём на работу, медкомиссии, профилактические осмотры, беременность. Выполнение этих исследований необходимо – они позволяют выявить заболевание на ранних стадиях, когда лечение будет иметь наиболее высокую эффективность.

Полученный положительный результат нередко ставит в тупик человека, особенно при отсутствии каких-либо поводов. Выявление сифилиса ложноположительного – достаточно частое явление, а потому не стоит раньше времени поддаваться панике. Согласно информации из разных источников, до 30% первичных исследований могут давать неправильный результат. Причин такому явлению достаточно много: изменение состояния организма, соматические заболевания. Чтобы лучше понять, почему появляются ложные данные, стоит более тщательно разобраться в вопросе проведения исследования.

Типы анализов на сифилис

Методы клинических исследований стремительно совершенствуются с каждым годом. С разработкой новых способов диагностики, ложноположительная реакция на сифилис встречается всё реже. При необходимости диагностика может включать в себя несколько разных методик – это позволяет получить наиболее достоверный результат.

Нетрепонемные методы исследования

Эти методики направлены на выявление белков, которые образуются в результате активности бледной спирохеты. Они направлены на определение «следов» возбудителя. Такие методы имеют относительно высокий процент погрешности (до 10%). Подобные методики являются неспецифичными, но позволяют по титру антител определять степень заражения.

Реакция Вассермана RW

Наиболее распространённым анализом, который проводится для выявления бледной трепонемы, является серологическое исследование крови. Реакция Вассермана позволяет всего за несколько минут определить наличие болезни. Поэтому данная методика применяется в лабораториях чаще всего – она не требует много времени и имеет относительно низкую стоимость.

Для выполнения анализа используется спинномозговая жидкость или кровь. Забор исследуемого материала может осуществляться из пальца (если анализ всего один) или из вены (если требуется проведение нескольких исследований). При проведении анализа может быть не только ложноположительный, но и ложноотрицательный результат. Он возможен при следующих обстоятельствах:

• ранняя стадия заражения, когда количество трепонем в организме ещё низкое;
• хроническое заболевание в стадии затихания, когда число антител снижается.

Обратите внимание! Ложноотрицательный результат возникает крайне редко, а потому при наличии хотя бы одного плюса из четырёх, необходимо пройти дополнительное обследование.

Микрореакция реципитации (МР)

Данная методика исследования основана на реакции антиген-антитело. Она требует небольшого количества материала для выполнения. Направлена на выявление антилипидных антител, которые вырабатываются в процессе разрушения клеток трепонемой. Для исследования используется как кровь пациента, так и спинномозговая жидкость.

Поскольку разрушение клеток может происходить не только при сифилисе, анализ используется в качестве отборочного, а не подтверждающего. Существует два аналога этой методики:

• Микроскопический тест (VDRL). Для выполнения анализа применяется инактивированная сыворотка крови. При подозрении на поражение нервной системы сифилисом, в качестве исследуемого материала используется спинномозговая жидкость.
• Макроскопический тест (RPR). Считается методом экспресс-диагностики. Применяется визуальный подсчёт плазменных реагинов.

Данная реакция при несоблюдении необходимой стерильности может показывать ложноположительный результат. Появление такого анализа также возможно при неспецифическом повреждении тканей, что влечёт за собой разрушение липидов. При наличии положительного результата рекомендуется обязательное проведение трепонемного теста для подтверждения.

Трепонемные методы исследования

Эта категория анализов даёт наиболее точные данные, и тут редко бывают ложноположительные результаты. Исследования направлены на выявление специфичных белков, которые выделяются организмом в ответ на заражение. Данные методики имеют более высокую стоимость, а потому применяются в качестве подтверждающих, а не отборочных.

Специфические антитела начинают вырабатываться организмом только через несколько недель после заражения трепонемой. Они могут сохраняться в течение продолжительного периода после излечения болезни. Поэтому специфичные тесты могут показывать положительные результаты в течение продолжительного времени после ремиссии.

Обратите внимание! При положительном RW-анализе и отрицательном трепонемном тесте проводится повторное исследование через несколько недель.

Иммуноферментный анализ (ИФА, EIA)

Основывается на оценке уровня иммуноглобулинов класса IgA, IgB и IgM. Первые два типа белков вырабатываются в организме уже с 2 недели инфицирования, а IgM – через месяц после заражения.

Интерпретация анализа осуществляется на основании соотношения наличия иммуноглобулинов:

• обнаружены только IgA – с момента инфицирования прошло не более 14 дней;
• обнаружены IgA и IgB – заражение произошло от 14 до 28 дней назад;
• обнаружены все три типа – сифилис в организме более 28 дней;
• обнаружен только IgM – поздний сифилис.

Наличие IgM может быть признаком уже вылеченного сифилиса – синтез иммуноглобулинов IgM может продолжаться ещё несколько месяцев после ремиссии.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ, FTA)

Используется для подтверждения заражения на самых ранних этапах. Для исследования проводится забор крови из пальца или вены. Результат похож на анализ RW, где указан минус, или от 1 до 4 плюсов. При наличии хотя бы одного плюса может назначаться дополнительное исследование.

Крайне редко встречаются ложноположительные результаты при выполнении РИФ – они могут быть у беременных, а также у пациентов с заболеваниями соединительных тканей.

Реакция пассивной агглютинации (РПГА, TPHA)

Титр антител позволяет определить наличие . Достоверные данные эта методика даёт уже с 28 дня после заражения. Для оценки используется кровь из пальца или вены. Повышение количества антител означает более позднюю стадию болезни.

Наиболее точные методики исследования

Анализы этой группы отличаются высокой чувствительностью, а потому погрешность в их результатах крайне низка. Их отличает более высокая стоимость, в сравнении с другими методами, и более сложная техника выполнения.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Анализ ПЦР считается одним из самых высокоточных. Он направлен на определение участков патогенной ДНК в организме человека. Метод требует наличия специализированного оборудования и реактивов, а потому используется в редких случаях.

Имуноблоттинг

Комбинированный метод исследования. Направлен на определение иммуноглобулинов в сыворотке крови пациента. При анализе проверяется наличие комплекса антител, по которым и устанавливается диагноз. В данной методике применяется электрофорез, с помощью которого разделяют иммунодетерминанты, и реакция ИФА, которая проявляет разделённые точки.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)

Высокоспецифичный анализ, который определяет реакцию сыворотки крови на бледную трепонему. Он широко применяется во всём мире, поскольку имеет высокую вероятность точного результата. Специальные антитела (иммуномобилизины) у больного сифилисом способны обездвиживать трепонему. В крови здорового человека таких антител нет. Именно на наличии/отсутствии данной способности и основана методика исследования.

РИБТ используется для выявления тех разновидностей сифилиса, при которых реакция Вассермана даёт отрицательные результаты – поражение нервной системы, внутренних органов, скрытой формы болезни. Ложноположительный результат в странах СНГ встречается крайне редко. Причиной его появления может быть саркоидоз, лепра.

Причины ложноположительных результатов

Реакция Вассермана может определять «острый» и «хронический» ложноположительный результат. Его выраженность зависит от характера изменений состояния человека. Показывать стадию обострения RW может в таких случаях:

• инфекционные заболевания в стадии обострения;
• травматические повреждения;
• инфаркт миокарда;
• введение любой вакцины за несколько дней до пробы;
• пищевое отравление.

Эти состояния характеризуются усиленной работой иммунной системы, что приводит к повышенной выработке антител. Они ошибочно распознаются в реакции, как антитела к трепонеме, а потому возникает положительный результат.

При наличии патологий хронического характера иммунная система вырабатывает большое количество неспецифических антител, которые могут вызвать реакцию. В RW такое состояние может показывать ложноположительный результат. Поэтому стоит предупредить врача о следующих заболеваниях:

• хронические патологии соединительных тканей;
• туберкулёз;
• хронические заболевания вирусной этиологии: ВИЧ, гепатиты В, С, D;
• хронические заболевания печени;
• аутоиммунные патологии.

С возрастом в организме пациента окислительно-восстановительные реакции замедляются. Старение тканей также может показывать ложноположительный результат, а потому для пациентов преклонного возраста назначаются более точные методики исследования.

Обратите внимание! При положительной реакции Вассермана проводится дополнительное исследование, которое позволяет получить более точную картину, например иммунноферментный анализ.

Повторная проверка

Повторный проводится при сомнительных результатах скринингового исследования. Он назначается при наличии одного или двух крестов – такой анализ требует дополнительной проверки. Исследование может давать ложноположительные результаты в нескольких случаях:

• Ранняя стадия болезни. До появления твёрдого шанкра количество иммуноглобулинов в организме достаточно низкое.
• Поздняя стадия болезни. С момента заражения прошло более 2 лет, и титр антител постепенно начал снижаться.

Повторный анализ, который проводится через 2-3 недели, показывает точно, есть ли заболевание. При наличии положительного результата второй раз, используются дополнительные уточняющие методики.

Анализы при беременности

Одним из самых неожиданных может стать положительный результат теста на сифилис у беременных, особенно если женщина не меняла партнёра. Такая ситуация нередко приводит в ужас будущих мам, поскольку трепонема может негативно влиять на внутриутробное развитие малыша.

Скрининговое исследование при беременности проводится несколько раз:

• при становлении на учёт, в 12 недель;
• начало 3 триместра, в 30 недель;
• перед родами.

Это то количество исследований, которое считается минимальным. Ложноположительный может проявляться из-за перестройки организма, происходящей во время беременности. Когда женщина вынашивает ребёнка, её иммунная система вырабатывает большое количество антител – это эволюционное приспособление для защиты малыша в первый год жизни.

Во время беременности назначают дополнительный уточняющий анализ, который характеризуется большей точностью. Если контрольное исследование показывает наличие возбудителя в организме, обязательно проводится лечение. Влияние терапии на растущий организм существенно меньше возможного вреда от трепонемы.

Как подготовиться к анализам?

Одним из способов предупреждения неправильного результата является подготовка к сдаче анализов. Из-за неправильной подготовки возможно появление реакций, которые сопровождаются выработкой неспецифических антител, что и приводит к появлению неправильного результата.

• Анализ обязательно нужно сдавать натощак. Можно употреблять только чистую воду.
• За сутки до забора крови стоит полностью исключить алкоголь – он создаёт дополнительную нагрузку на печень, что может привести к появлению положительного результата.
• Рекомендуется накануне отказаться от употребления жирной и жареной пищи, острых блюд и большого количества специй.
• Минимум за 60 минут до анализа рекомендуется воздержаться от курения.
• Перед забором крови из вены нужно отдохнуть минут 10-15 в приёмном покое.
• Женщинам не рекомендуется сдавать кровь во время менструаций.
• Нельзя проводить анализ после рентгенологического исследования, физиотерапевтических процедур.
• Запрещено сдавать кровь на сифилис в период обострения инфекционных заболеваний.

Обратите внимание! Если пациент принимает какие-либо лекарства, он должен проконсультироваться с врачом перед проведением исследования, может потребоваться перерыв в несколько дней между приёмом препаратов и анализом.

Что делать при подтверждении сифилиса?

Не стоит беспокоиться при получении первичного скрининга с положительными результатами. Ложный сифилис легко определяется повторным исследованием. Если всё же диагноз был подтверждён, нужно принять меры:

• обследование полового партнёра у дерматовенеролога;
• обследование близких родственников;
• выполнение превентивного лечения для предупреждения заражения у близких;
• оформление больничного листа на период лечения – больничный лист не содержит информацию о диагнозе, гарантируя конфиденциальность;
• по окончании курса лечения выдаётся специальная справка – её нужно иметь при себе, чтобы избежать в дальнейшие несколько месяцев вопросов о ложноположительных результатах.

Положительный результат на сифилис не всегда бывает достоверным. Поэтому не стоит беспокоиться и рекомендуется подождать дополнительного исследования. Правильное лечение, которое было начато вовремя, гарантирует быстрое выздоровление с минимумом остаточных явлений.

Реакция Вассермана (RW) используется уже более 100 лет и доказала свою эффективность в ранней диагностике сифилиса. Эта методика исследования крови достаточно проста, но в то же время очень надежна, что позволяет широко применять ее по всему миру в усовершенствованном виде. Современные активно используемые экспресс-тесты существенно отличаются от классической реакции Вассермана, но в них закладывается основной принцип этой методики, что позволяет часто давать им прежнее название.

Принципиальный подход

По своей сути, реакция Вассермана - это лабораторный анализ кровяной сыворотки, направленный на определение иммунологической реакции организма на проникновение в него возбудителя сифилиса. При заражении сифилисом происходит характерный процесс. Бледная трепонема (Treponema pallidum), содержит антиген кардиолипин. Кровяная сыворотка за счет наличия реагинов вступает в, так называемую, реакцию связывания комплемента (РСК) с образованием специфического комплекса с этим антигеном, т.е. антитела к трепонеме вступают в соединение с трепонемным антигеном.

Принцип реакции Вассермана основан на выявлении указанной реакции. Если человек заражен сифилисом, то в его крови обязательно появляются антитела к бледной трепонеме, что является физиологическим ответом иммунной системы. Для искусственного провоцирования специфической реакции в кровь вводится препарат, содержащий трепонемный антиген (кардиолипин). Одновременно вводится гемолитическая система для проведения реакции гемолиза, а для сорбции комплексов используется комплемент.

В случае когда возбудитель сифилиса уже проник в человеческий организм, начинается РСК, связывающая антитела в крови с введенным антигеном с образованием специфического комплекса. На эту реакцию расходуется весь вводимый антиген и комплемент. Если антител нет в крови пациента, то кардиолипин вступает в реакцию гемолиза с гемолитической системой, которая полностью его нейтрализует. Проводимый лабораторный анализ выявляет комплексы антитело-антиген, которые обнаруживаются визуально. Концентрация комплексов показывает интенсивность их образования и условно оценивается по количеству знаков (плюс): от (+) до (++++). Исследования на RW можно проводить на кровяной сыворотке или спинномозговой жидкости.

Реакционный состав

Для обеспечения RW в кровь исследуемого человека вводится специальная смесь, которая содержит 3 основных ингредиента: антиген, комплемент и гемолитическую систему. Главную реакцию Вассермана обеспечивает антиген, представляющий собой искусственно приготовленный антиген возбудителя. Он может готовиться в 2 вариантах: обработанная ультразвуком культура бледной трепонемы или кардиолипин, получаемый из бычьего сердца. Чаще всего используется второй вариант, когда препарат приготавливается путем тщательной очистки спиртового липидного экстракта, получаемого из мышечных тканей бычьего сердца. Для повышения активности антигена добавляют фосфолипид, лецитин и холестерин. Необходимая доза антигена обеспечивается разведением его в растворе хлорида натрия.

Гемолитическая система соединяет в себе гемолитическую сыворотку (гемолизин) и эритроциты из крови барана. Сыворотку получают из крови кроликов и ослов, а затем ее иммунизируют эритроцитами барана. Эритроциты выделяются из крови барана в возрасте 1-4 года, а забирается она из яремной вены. Комплемент приготавливается из кровяной сыворотки, получаемой из сердца морских свинок. Для проведения RW указанные ингредиенты берутся в равном количестве - по 0,25 или 0,5 мл.

Как проводится анализ крови

Кровь у пациента на анализ берется натощак или через 7-8 часов после приема пищи. Нельзя брать пробы в следующих обстоятельствах: повышенная температура тела, после недавно перенесенной болезни инфекционного характера, во время месячных у женщин, за 12-15 дней до родов у беременных женщин, сразу после родов, в течение суток после приема алкоголя. Не следует брать анализ у новорожденных детей в первые 2 недели жизни.

Кровь для проведения исследований отбирается из локтевой вены в объеме порядка 9-10 мл с соблюдением всех антисептических правил. У младенцев кровь берется путем надреза пятки специальным скальпелем. На проведение реакции проба должна поступить в течение 2 суток после отбора крови и при условии хранения при температуре не выше 3-4ºС.

Из крови пациента приготавливается сыворотка в следующем порядке. Кровь выдерживается при температуре 37ºС в термостате в течение 18-28 минут, а образовавшийся кровяной сгусток отделяется и поступает на центрифугу, где обрабатывается на скорости порядка 1000 об/мин в течение 14-16 минут. После такой процедуры над сгустком появляется прозрачная кровяная сыворотка, которая и забирается для дальнейших исследований. Если в сыворотке обнаруживаются эритроциты, то проводится повторное центрифугирование для их отделения. Окончательно выделенная сыворотка проходит инактивацию при 55-57ºС в течение 28-35 минут. Таким образом удаляется натуральный комплемент и нормализуется состояние глобулинов. Полностью подготовленная кровь хранится в холодильнике не более 7 дней.

Определение реакции Вассермана кровяной сыворотки осуществляется в 3 пробирках: во все пробирки наливается сыворотка, разведенная раствором хлорида натрия в пропорции 1:5, а затем в первую пробирку вводится 0,25 мл трепонемного антигена, во вторую - 0,25 мл кардиолипина, а в третью (контрольную) - 0,25 мл раствора хлорида натрия. Затем во все пробы вводится такое же количество комплемента. Необходимо отметить, что смешивание компонентов заранее не производится.

Следующий этап - первичная инкубация в термостате при температуре 36-38ºС в течение 46-55 минут. После тепловой обработки вводится гемолитический состав (по 0,5 мл в каждую пробирку) с перемешиванием путем встряхивания. Далее осуществляется окончательная инкубация в аналогичных условиях до полного завершения операции гемолиза. Внимательно оценивается наличие или отсутствие гемолиза. Оценку результатов реакции проводят путем сравнения с контрольными образцами. Для этой цели используется 2 дополнительные пробирки: в одну помещается кровь, в которой достоверно установлен возбудитель сифилиса, а в другую - кровь абсолютно здорового человека.

Исследование спинномозговой жидкости

Антитела к бледной трепонемы могут располагаться в спинномозговой жидкости, поэтому иногда исследования на реакцию Вассермана проводятся на пробах этой жидкости. Пробы исследуются одновременно в 3 вариантах: неразведенная спинномозговая жидкость, разведенная в соотношении 1:2 с раствором хлорида натрия и разведенная с тем же раствором в пропорции 1:5. Реакцию проводят аналогично с исследованием кровяных проб, т.е. с трепонемным антигеном и кардиолипином. Комплемент вводится по специальным титрам. Сама методика проведения реакции и оценка исследования спинномозговой жидкости не отличается от исследования на кровяной сыворотке.

Как оцениваются результаты

Нормой или отрицательным результатом реакции Вассермана (отсутствие заражения сифилисом) считается протекание реакции гемолиза. В этом случае в крови отсутствуют антитела к сифилитическому возбудителю, а все введенные антигены нейтрализуются гемолитической системой.

Положительный результат, т.е. наличие заражения, оценивается путем сравнительного анализа с контрольными образцами. Степень тяжести болезни или ее стадия обозначается количеством знаков "плюс":

• (+) или (1+): небольшая задержка гемолиза;
• (++) или (2+): слабо положительная реакция или частичная задержка гемолиза;
• (+++) или (3+): положительная реакция или значительная задержка гемолиза;
• (++++) или (4+): резко положительная реакция или полное отсутствие гемолиза.

Кроме того, существует такое понятие, как сомнительная реакция, обозначающаяся в виде (+/-). Такая реакция требует перепроверки и уточнения. При проведении оценки реакции Вассермана следует учитывать такой факт: у 4-6% здоровых людей наблюдается ложноположительный результат, а у зараженных людей (до 25%) может наблюдаться ложноотрицательный результат в течение 14-18 суток после инфицирования бледной трепонемой. Ложноотрицательные результаты меняются по мере развития болезни: после 4-6 недель болезни до 26% результатов становятся положительными, а к 8-9 неделе почти все они дают положительную реакцию.

Отрицательный результат в скрытом периоде второй фазы сифилиса не всегда свидетельствует об отсутствии болезни. При рецидиве сифилиса реакция становится положительной. После проведения лечебного курса отрицательный результат указывает только на благоприятную тенденцию, но требует перепроверки. Другая проблема оценки эффективности лечения - появление синдрома, так называемого серорезистентного сифилиса, когда после излечения реакция Вассермана все равно дает отрицательный результат.

Реакция Вассермана в большинстве случаев достаточно четко выявляет заражение сифилисом, однако в ряде случаев отрицательная реакция не дает гарантии отсутствия инфекции, также как и положительный результат может появиться и при отсутствии сифилиса.

В частности, ложноположительная реакция может возникнуть в следующих случаях:

Ложный результат может проявиться даже при употреблении жирной пищи непосредственно перед исследованиями.

Результаты реакции Вассермана нельзя расценивать как истину в последней инстанции. Они, скорее, дают импульс для проведения дополнительных обследований. Для этих целей в настоящее время применяются различные трепонемные тесты. К современным методикам экспресс-диагностики сифилиса относятся усовершенствованные аналоги реакции Вассермана: тест RPR, который дополняется трепонемными тестами РПГА.

Реакция Вассермана сыграла огромную роль в развитии диагностирования сифилиса на ранних стадиях. Однако ее результаты не всегда однозначно оценивают наличие болезни, в связи с чем в настоящее время применяются более совершенные способы, принцип функционирования которых взят из классической реакции Вассермана. Исследования данного типа, в основном, продолжают использоваться при контроле лечебного процесса, но могут применяться и для выявления сифилиса.