Laboriloomade temperatuuri hoidmise tingimused. Laboriloomade söötmise reeglid. Vivariumi varustus ja loomade majutustingimused

Enamik laboriloomaliike on nii hästi kohanenud, et elavad ja sigivad kõige ebasoodsamates tingimustes. Näiteks hiired taluvad kõike alates troopilistest tingimustest kuni miinustemperatuurini. Nad sigivad isegi külmikutes, kus hoitakse külmutatud liha varusid. Kuid mõnel temperatuuril selles vahemikus tunnevad hiired end kõige paremini, just sellel temperatuuril, mis on mõlemas suunas kerge kõikumisega, tuleks neid hoida.

Loomade liikumisvabadus siseruumides on piiratud. Nad veedavad oma elu rakkudes, st. mikrokliima tingimustes raku sees. Seetõttu tuleks loomade ruumi kujundamisel lähtuda põhimõttest luua sellised keskkonnatingimused, mis tagaksid loomadele vajaliku mikrokliima ning sellise suuruse ja kujuga ruumid, mis oleksid talitajatele mugavad.

IN vivaariumid ja puukoolid Samuti peaks olema loomade hooldamise tööks vajalikke kontoriruume. Praktika näitab, et umbes poole ruumide üldpinnast saab eraldada loomade majutamiseks ja teist poolt saab kasutada ruumina igasuguste arvestuste jms pidamiseks.

Väikestes vivaariumides või puukoolides nihkuvad need suhted majapidamisruumide ülekaalu suunas. Vajadus luua neis maksimaalsed hügieenilised tingimused, mis on seotud loomade isoleerimise, väljast tulevate materjalide steriliseerimise ja muu sellisega, toob kaasa ka kasutatava pinna vähenemise.

Vivarium(lat. Vivarium - ulukite kaitseala, loomaaed) - ruum laboriloomade pidamiseks ja aretamiseks, mida kasutatakse teaduslikel eesmärkidel ning veterinaar- ja tervishoiuasutuste praktikas. Vivaariumid on väga erinevad nii välimuselt kui ka neis olevate loomade arvu poolest, mille määravad ära teadusliku uurimistöö omadused. Vivaariume saab kasutada mitte ainult laboriloomade pidamiseks, vaid ka arvukuse suurendamiseks.

Loomakasvatust vivaariumides harrastatakse tavaliselt neil juhtudel, kui katses on vaja teatud tüüpi, suuruse, kaalu, soo ja vanusega loomi või neid kasvatatakse spetsiaalsetes söötmis-, valgustus- jne tingimustes. Lisaks hõlbustab nende oma lasteaia vivaariumides esinemine oluliselt labori katkematu varustamise probleemi vajaliku arvu väikeloomadega. Neis saab läbi viia mõningaid teadusuuringuid, näiteks erinevate dieetide pikaajalise mõju tulemuste väljaselgitamiseks jne.

Laboratoorses praktikas on kaks mõistet: vivaarium - rajatis loomade katseolekus pidamiseks sobivates tingimustes ja lasteaed - ruum loomade aretamiseks ja pidamiseks kuni nende kasutamiseni. Loomade katkematu tarnimine laborisse on võimalik ainult suurte lasteaedade korraldamisel, mida juhivad kvalifitseeritud spetsialistid ning range veterinaar- ja sanitaarkontrolli all.

Vivaariumide seadme määrab eelkõige loomade liigiline koosseis, millega seoses on olemas spetsiaalsed vivaariumid (kennelid, ahvimajad jne) ja üld- või komplekstüübid, mis pakuvad erinevate loomade - koerte, kasside, küülikute - ülalpidamist. , merisead, valged rotid, hiired. Vivarium

võib hõlmata ka magevee- ja mereloomade akvaariume, kahepaiksete ja roomajate terraariume, linnumajasid ja puure lindudele ning muid eri tüüpi imetajate jaoks kohandatud rajatisi.

Eristada ruume talvel Ja suvine, püsiv Ja ajutine(nn jalutuskäigud). Igas vivaariumis peab olema karantiiniruum äsja saabunud loomadele ja isolatsiooniruum haigetele loomadele (kunstlikult nakatunud loomadega töötamisel on alati ette nähtud spetsiaalselt projekteeritud isolatsiooniruumide ehitamine). Loomade hooldamiseks peale keerulisi operatsioone kaasaegsetes vivaariumides nn kliinikud, kus loomadele on loodud eriti soodsad tingimused ja kus nad on pideva järelevalve all.

Kliinilised ruumid saab kasutada ka erilist hoolt vajavate loomade pikaajaliseks pidamiseks. Vajadusel on kliinikute sisseseadmisel ette nähtud nii üld- kui ka üksikpalatid. Peavad olema spetsiaalselt varustatud ruumid, mis võimaldavad sanitaartehniliselt nii äsja saabunud loomi kui ka operatsioonile määratud või pikaajalistes katsetes kasutatavaid loomi, mis nõuavad teatud sanitaar- ja hügieenitingimuste täitmist (konditsioneeritud reflekskatsed jne).

Mõnel juhul on tingimata vajalik spetsiaalse varustuse olemasolu desinfitseerimiskamber, võimaldab kiiresti töödelda nakatunud puure, töötajate kombinesooni ja abivarustust. Tuleks pakkuda ruumi surnud loomade lahkamiseks Ja surnukehade ladustamine. Vivaariumid on varustatud köögi ja jaotusruumiga, kraanikausiga ning panipaikadega toiduainete ja varuseadmete hoidmiseks (joonis 87).

Vivaariumide ventilatsioonile tuleb pöörata suurt tähelepanu. Tavapärastest ventilatsioonimeetoditest, mille käigus imetakse lihtsalt õhk loomaruumist välja, üldjuhul ei piisa. Loomade sekretsioonide gaasiliste lagunemissaaduste eemaldamiseks korraldatakse sissepuhke- ja väljatõmbeventilatsioon. Vivariumi ruumides peaks olema veekindel, näiteks kivi- või tsementpõrand koos vihmaveerennide ja töökindlate redelidega, mis

(see võimaldab kiirelt puhastada veejoaga veevärgiga ühendatud painduvast voolikust. Seinte pesemiseks ja desinfitseerimiseks on need plaaditud.

Loomade jaoks tuleks eelistada suhteliselt väikeseid ruume. Neil on vähem loomi häirivat müra, neid on kergem ventileerida ja puhtana hoida ning lõpuks on nad vähem nakkusohtlikud. Kuju poolest peaksid loomaruumid olema pigem piklikud kui kandilised, et saavutada säästlikum ruumikasutus (joon. 87).

Kuid mõnel juhul on ruudukujulised ruumid mugavamad, samas kui ruumi keskel on piisavalt ruumi töötamiseks. Nii on näiteks ühe või kahe uksega ruumis mõõtmetega 2,5x5,0 m mugav paigutada pikkade seinte äärde puuriga nagid. Riiuleid on võimalik paigutada ka kahelt poolt ligipääsuga ruumi keskele, kuid selline riiulite paigutus on vähem ökonoomne.

^ 0

Riis. 87. Vivaariumi plaan laboriloomadele. Puhas kontoriruum: I- esik, wc, dušid; 2 - kontor; 3- söödaköök alates nädala söödavaru; 4 - steriliseerimine; viis - ladu voodipesu materjalid; 6 - rakkude ladu; 7- puhas koridor. Majutuskohad loomadele: 8 - katseloomad; 9 - loomakasvatus: a - nagid. Määrdunud kontoriruumid: 10 - määrdunud koridor; 11 pesemine; 12 - surnukehade ja jäätmepõletusahi.

Praktika näitab, et vivaariumil peaks olema neli eraldatud sektsiooni. Esimene osa ette nähtud loomadele, keda pole veel katseteks võetud. See jaotis on mõeldud aretusloomadele, võib-olla väljastpoolt tulijatele (karantiin), seda nimetatakse mugavalt osa tervislikust loomad. Teine - mõeldud katseloomadel. Esimese osa loomad saabuvad siia ja jäävad siia kogu katse ajaks. Neid ei tohiks tervete loomade sektsiooni tagasi viia. Seda jaotist võib nimetada test osa loomad. IN kolmandaks lõigud ladustatud sööt, puhas allapanu, puhtad ja varupuurid ning muu varustus. Neljas - määratud puhastamiseks puurid, määrdunud voodipesu, surnud loomade surnukehad jne. Puhtad puurid ja muud seadmed tagastatakse lattu, kust need toimetatakse kasutamiseks ühes või teises loomade sektsioonis.

Nimetatud jaotiste vahel olevate sõnumilinkide eemaldamiseks tuleks olla väga ettevaatlik. Ideaalis ei tohiks loomade, sööda ja tööriistade puhtad ja määrdunud ringlusteed kuskil ristuda. Loomaruumis on soovitav korraldada kaks ust, millest üks on puhaste puuride, sööda jms kohaletoimetamiseks, teine ​​määrdunud puuride eemaldamiseks. Seega läheb sööda ja laovarude vool kogu aeg ühes suunas puhtast määrdunud. Puurid ja muud seadmed pärast kasutamist ja puhastamist tagastatakse puhastesse sektsioonidesse alles pärast steriliseerimist. Kui eraldi puhaste ja määrdunud ülekäiguradade korraldamine pole võimalik, siis saab sama ülekäigurada kasutada erinevatel kellaaegadel erinevatel eesmärkidel. Näiteks määrdunud materjalide teisaldamiseks - hommikul ja puhaste materjalide jaoks - pärastlõunal pärast põhjalikku pesemist ja desinfitseerimist.

Kõige mugavam tööks loomade piklik vorm, kus on seina lähedal (a) ja keskel (b) puuririiulid (C) ja kraanikauss (D). Riiulite seinapaigutamine on lisaks töömugavusele säästlikum kui keskne (joon. 88).

Riis. 88. Ruumide riiulite paigutuse skeem: a-sein; b-keskne; B-rakud; G-torustiku kraanikauss.

Seni on arutelus käsitletud loomatubasid kõige üldisemal kujul, arvestamata, kas need on mõeldud hiirtele, merisigadele, rottidele või teistele loomadele. Kõik sellised rajatised, välja arvatud üksikud erandid, peaksid sobima igat tüüpi laboriloomadele. Kallist ja hästi hoitud lasteaeda või vivaariumi ei ehitata 1-2 aastat ning seal olevad loomatüübid võivad erinevatel aastatel olla erinevad. Sel aastal hiirte jaoks kasutatav ruum võib järgmisel aastal sisaldada küülikuid ja selline muudatus peaks toimuma ilma suuremate ümberehitusteta.

RD-APK 3.10.07.02-09

PÕLLUMAJANDUSMINISTEERIUM
VENEMAA FÖDERATSIOON

Moskva 2009

Arendanud: Ph.D. s.-x. Teadused, Art. teaduslik koostööpartner P.N. Vinogradov, Ph.D. tehnika. Teadused S.S. Ševtšenko, O.L. Sedov, E.S. Garafutdinova, M.F. Malygin (SPC "Giproniselhoz"); dr vet. teadused, prof. V.G. Tyurin (GNU VNIIVSGE)

TUTVUSTATUD: SPC "Giproniselhoz".

HEAKSKIIDETUD JA JÕUSTUNUD: Vene Föderatsiooni põllumajandusministri asetäitja A.I. Beljajev 1. detsember 2009

ESIMEST KORDA LOODUD.

Tutvustuse kuupäev 15.12.2009

1. Üldsätted

1.1. Need juhised kehtivad kõikidele Venemaa agrotööstusliku kompleksi teadusasutustele ja õppeasutustele, olenemata nende organisatsioonilisest ja õiguslikust vormist, kes kasutavad oma töös laboratoorseid (katse-, katse-) loomi.

Vastavalt föderaalseadusele "Tehniliste eeskirjade kohta" (vastu võetud Riigiduuma poolt 15. detsembril 2002 ja kinnitatud Föderatsiooninõukogu poolt 18. detsembril 2002) kuni asjakohaste eeskirjade vastuvõtmiseni tehniline eeskiri võtmise valdkonnas. veterinaar- ja sanitaarmeetmed viiakse läbi vastavalt Vene Föderatsiooni seadusele " Veterinaarmeditsiini kohta (kinnitatud 14. mail 1993, nr 4979-1).

1.2. Juhised kehtivad nii äsja projekteeritud laboriloomade pidamiseks ja nendega töötamiseks mõeldud rajatistele - katsebioloogiakliinikutele, vivaariumidele jne kui ka olemasolevatele ja rekonstrueeritavatele.

1.3. Laboratoorsete loomade pidamise ja nendega töötamise objektid on teadusasutuste, õppeasutuste teaduslikud tugiüksused ning on loodud katse- ja uurimistöös kasutatavate laboriloomade pidamiseks ja vajadusel aretamiseks. Nendes rajatistes saab läbi viia ka üksikute teadusküsimuste iseseisvat arendamist.

1.4. Käesolevas juhendis sätestatud laboriloomade pidamise rajatiste projekteerimise, ehitamise ja käitamise standardid ja nõuded on suunatud loomadega töötavate töötajate ja kogu elanikkonna ohutuse tagamisele antroposanooside ja muude haiguste esinemise eest.

1.5. Laboratoorsete loomade pidamise rajatiste ehitamise projektdokumentatsiooni väljatöötamine, kooskõlastamine, kinnitamine ja koostamine toimub vastavalt SNiP 11.01-2003 nõuetele.

1.6. Laboratoorsete loomade pidamise objekt (edaspidi vivaarium) asub eraldi hoones (hoonetekompleksis) või riigi veterinaarteaduslike asutuste laborihoonete ülemistel korrustel, samuti õppeasutuste territooriumil.

1.7. Vivaariumid peaksid olema varustatud kvaliteetse joogiveega, sh soe vesi, elekter, varustatud kanalisatsiooniga (torud läbimõõduga vähemalt 100 mm), sissepuhke- ja väljatõmbeventilatsiooni, kütte-, valve- ja tulekahjusignalisatsiooniga ning mugavate juurdepääsuteedega.

1.8. Vivaariumi eraldi hoone ja seda vivaariumi sisaldavate uurimisasutuste rajatiste vaheline kaugus peab olema vähemalt Vene Föderatsioonis kehtivate tuleohutuseeskirjadega kehtestatud tulepauside kaugus.

1.9. Vivaariumide eraldiseisvad hooned tuleks piirata tühja aiaga ja eraldada elamurajoonist sanitaarkaitsevööndiga. Territoorium peaks olema haljastatud.

Sanitaarkaitsevööndi mõõtmed on määratud SaNPiN 2.2.1 / 2.1.1.1200-03 nõuetega.

1.10. Eraldi haldus-, tööstushoonetes asuvate ja isoleeritud väljapääsuga vivaariumide sanitaarkaitsevööndi mõõtmed lepitakse igal konkreetsel juhul kokku riikliku sanitaar- ja veterinaarjärelevalve asutustega.

2. Vivaariumi ruumide koosseis, omavaheline paigutus ja pindalanormid

2.1. Igas vivaariumis peaks olema ruumid, mis on projekteeritud vastavalt kehtivatele ehitusnormidele ja eeskirjadele kooskõlas kehtivate veterinaar- ja sanitaarnõuete ning zoohügieeniliste standarditega, sealhulgas:

personaliruum individuaalsete kappidega kombinesoonide jaoks;

ruumid äsja vivaariumisse sisenevate loomade vastuvõtuks ja karantiiniks;

isolaator;

ruumid katseloomade pidamiseks (liigiti eraldi) või (kokkuleppel riikliku veterinaar- ja sanitaarjärelevalve asutustega) jaotatud loomaliikide kaupa sektsioonideks;

steriliseerimisruum või kast teadlastele tööks nakatumata loomadega, kus on ruum loomade lahkamiseks ja külmkapp surnukehade ajutiseks ladustamiseks;

isoleeritud ruumid eriti ohtlike nakkuste patogeenide või radioaktiivsete ainete kultuuridega nakatunud katseloomade pidamiseks (eraldi) operatsioonitoast igas isoleeritud ruumis, kus on külmkapp ning vajalikud seadmed loomade nakatamiseks ja lahkamiseks;

söödaköök sööda valmistamiseks (peaks olema varustatud pliidi ja külmikuga);

desinfitseerimis- ja pesuosakond kuuma veega pesemiseks, puuride ja muude seadmete desinfitseerimiseks ja kuivatamiseks;

puhta (saastest puhastatud) varuinventari ladu: puurid, joodikud jne;

sanitaarplokk (dušš ja WC);

ruum, mis on varustatud ahjuga loomade surnukehade põletamiseks;

ühine külmhoone loomade surnukehade hoidmiseks;

söödaladu;

allapanu ladu;

eraldi ruumis või eraldi hoones - kliimaseadmete, ventilatsiooni, elektri- ja muude eripaigaldiste tehnoplokk.

2.2. Igas vivaariumis peaks olema ruum saabuvate loomade vastuvõtmiseks. Vivaariumides, kus peetakse väikenärilisi, paigaldatakse vastuvõtuosakonna ette soojustatud eeskoda, kuhu siseneb ja lossib auto saabunud loomadega.

Kui vivaarium asub laborihoonete ülemistel korrustel, siis vastuvõtuala ja soojustatud eesruum asuvad laborihoone esimesel korrusel ning on vivaariumiga ühendatud ainult laboriloomade tõstmiseks kasutatava liftiga.

2.3. Vastuvõturuum on 12,5 - 18 m 2 suurune ruum, kus on nõuetele vastav loomulik ja tehisvalgustus.

Vivaariumi kõigi ruumide kõrgus on 3 - 3,5 m.

2.4. Karantiiniruum koosneb mitmest isoleeritud ruumist pindalaga 12,5 - 18 m 2 ja on isoleeritud ruumidest, mis sisaldavad karantiini läbinud loomi ja tulevad katsetele.

2.5. Karantiiniruumidega külgneb isolatsiooniruum haigete ja haiguskahtlusega loomade jaoks. Eraldusruumide pinnad on sarnased karantiiniruumide omadega.

2.6. Katseloomade pidamiseks mõeldud ruumid võivad viia ühte ühiskoridori või asuda kahe koridori vahel ja omada väljapääsud mõlemasse. Ühe koridori paigutuse korral asuvad "määrdunud" ja "puhtad" teenused koridori erinevates otstes.

Kahe koridori süsteemiga sööt, karantiinis olevad loomad saabuvad mööda ühte koridori (“puhtad”), töötajad sisenevad enne loomadega tööle asumist puhastes kombinesoonides ja vahetatavates jalanõudes. Teises (“määrdunud”) koridoris viiakse ära söömata sööt ja sõnnik, viiakse välja loomade surnukehad, töötajad tulevad pärast loomadega töötamist välja.

Kui "määrdunud" ja "puhtaid" voogusid ei ole võimalik eraldada, on lubatud kasutada sama ruumi ühel või teisel eesmärgil, tingimusel et see desinfitseeritakse iga kord pärast "määrdunud" voolu läbimist.

2.7. Teatud tüüpi katseloomade pidamise ruumide pindala on 12,5-18 m 2 ; osadeks jagatud katseloomade pidamise ruumide pindala määratakse arvutusega.

2.8. Steriliseerimisruumi või -boksi pindala uurijate tööks nakatumata loomadega määratakse arvutuslikult, lähtudes kavandatava töö spetsiifikast.

2.9. Eriti ohtlike nakkuste patogeenidega nakatunud katseloomadega töötamiseks ja radioaktiivsete ainetega saastunud katseloomadega töötamiseks mõeldud isoleeritud ruumide pindalad, samuti operatsioonisaalide pindalad igas isoleeritud ruumis määratakse arvutuslikult, lähtudes vajalike manipulatsioonide läbiviimiseks kasutatava tehnoloogilise ja erivarustuse tingimused.

2.10. Söödaköögi, desinfitseerimis- ja pesemisosakonna ning puhaste varuseadmete ladustamise ruumide kogupindala peaks moodustama ligikaudu 50% loomadega hõivatud ruumide kogupindalast (suurtes vivaariumides võib see protsent olla veidi vähendada).

Söödaköök koosneb kahest kõrvuti asetsevast ruumist, mis on ette nähtud sööda töötlemiseks ja valmistamiseks. Igast ruumist peab olema juurdepääs koridori.

Desinfitseerimis-pesuosakond (üks või mitu) koosneb kahest ruumist, mis on omavahel ühendatud läbikäitava autoklaavi või läbikäidava kuivsoojuskambriga.

Desinfitseerimis-pesuosakonna seade peaks tagama oma töö erineva järjestuse:

nakatunud materjali juuresolekul - inventari ja voodipesu esialgne steriliseerimine koos viimase mehaanilise puhastamisega teises ruumis;

steriliseerimine pärast puuride ja inventari mehaanilist puhastamist, kui puudub saastunud materjali oht.

Olenemata vivaariumi asukohast (eraldi hoones või laborihoone viimasel korrusel) tuleks desinfitseerimis- ja pesuosakond varustada prügirenniga määrdunud allapanu eemaldamiseks ning materjalide ja seadmete mehhaniseeritud tõstmiseks.

Puhta inventari ja seadmete ladu asub desinfitseerimis- ja pesuosakonna kõrval.

2.11. Allapanu (laastud, saepuru, turvas jne) hoiustamiseks on eraldatud kaks ruumi: üks steriliseerimiseks ja selle vivaariumi poolt kasutatavatesse konteineritesse pakendamiseks, teine ​​äsja ostetud allapanu hoidmiseks.

2.12. Vivaariumi ruumide projekteerimisel on vaja tagada maksimaalne isolatsioon:

kõik oma ruumid teistest teadusasutuse koosseisu kuuluvatest allüksustest;

eralduspalati ruumid ja karantiini teistest vivaariumi ruumidest;

söödaköögi, loomaruumide ning desinfitseerimis- ja pesuosakonna vahel.

2.13. Igal juhul määratakse söödaköögi, desinfitseerimis- ja pesemisosakonna ning puhta varuvarude lao pind sõltuvalt kasutatavatest seadmetest, tootmisprotsesside mehhaniseerimise astmest ja katseloomade söödaliikidest.

Eelnimetatud ruumide pindalade mõõtmed on märgitud projekteerimisülesandes.

3. Vivaariumi ruumide ja inseneriseadmete ehituslahenduste veterinaar-sanitaar- ja tehnoloogilised nõuded

Suletud tüüpi valgustid ja valgustid peavad olema märgpuhastuseks ligipääsetavad.

3.5. Vivaariumi ruumid, kus peetakse laboriloomi, on varustatud sundvarustus- ja väljatõmbeventilatsioonisüsteemiga, mis tagab õhuvahetuse sageduse ning temperatuuri- ja niiskustingimused vastavalt tabelis toodud andmetele. .

Loomaliigid

Temperatuur, °C

Suhteline niiskus, %

Maksimaalne lubatud kontsentratsioon õhus

kõikumised

keskmine

kõikumised

keskmine

ammoniaak, mg/l

süsinikdioksiid mahuprotsentides

kapuuts

sissevool

Hiired

18 - 22

50 - 65

0,01

0,15

Rotid

18 - 22

50 - 65

0,01

0,15

Hamstrid

18 - 22

50 - 65

0,01

0,15

merisead

15 - 18

50 - 65

0,01

0,15

jänesed

15 - 18

50 - 65

0,01

0,15

Koerad

18 - 22

50 - 65

0,01

0,15

kassid

18 - 22

50 - 65

0,01

0,15

3.6. Temperatuuri- ja niiskusrežiim teistes vivaariumi ruumides tuleks esitada vastavalt tabelis toodud andmetele. .

tuba

Temperatuur külmal ja aasta üleminekuperioodil, ° С

Õhuvahetuskurss (mahud tunnis)

sissevool

kapuuts

1. Personalile

2. Loomade vastuvõtmiseks

3. Uurimiseks

4. Pesemine-steriliseerimine

1 - 2

2 - 3

5. Eutanaasia jaoks (eutanaasia)

6. Avamine

7. Taaskasutus

Arvutuse järgi

8. Katsepõllumajandusloomade pidamiseks

3.11. Reovee eemaldamiseks ja kogumiseks pärast protsessiseadmete ja põrandate pesemist ja desinfitseerimist on vaja ette näha eemaldatavate perforeeritud plaatide ja redelitega kaetud kandikute paigaldamine. Aluste kalle peab olema vähemalt 0,02.

3.12. Vivaariumide lokaalse kanalisatsiooni projekteerimisel tuleb järgida järgmisi nõudeid:

surnukehade põletamise ruumide reovesi steriliseeritakse manzhus elava auruga temperatuuril 120 ° C 30 minutit või aurujuga paigaldises temperatuuril 110 ° C 10 minutit; eriti ohtlike infektsioonide korral steriliseeritakse reovesi temperatuuril 140 ° C ja 130 ° C vastavalt 20 ja 60 minutit;

põrandapesu ja pesu- ja desinfitseerimisseadmete tööstus- ja olmereovesi tuleb koguda spetsiaalsesse vastuvõtjasse ja enne kanalisatsiooni juhtimist desinfitseerida kloori sisaldavate preparaatidega;

Veterinaar- ja sanitaartehniliselt ebasoodsad eraldiseisvate vivaariumide territooriumilt tulevad vihmaveetorud desinfitseeritakse kemikaalidega;

tekkiv mehaaniline ja bioloogiline reoveesete põletatakse.

3.13. Sissepuhke- ja väljatõmbeventilatsiooni peakanalid, toite-, veevarustus- ja kanalisatsioonitorud peaksid asuma koridorides spetsiaalsetes niššides ning neil peaks olema vaba juurdepääs kontrollimiseks ja parandamiseks.

3.14. Isoleeritud ruumid eriti ohtlike nakkuste või radioaktiivsete ainete patogeenide kultuuridega nakatunud katseloomade pidamiseks ja isolatsiooniruum on varustatud lokaalsete filtritega ventilatsioonisüsteemidega, mis tagavad eralduva õhu 100% puhastamise ja desinfitseerimise. Ventilatsioonisüsteem peaks nendes ruumides tagama madalama (3–5 mm Hg võrra) õhurõhu võrreldes teiste vivaariumi ruumidega. Nendes ruumides on ventilatsioon akende avamisega keelatud.

4. Vivaariumi varustus ja loomade pidamistingimused

4.1. Hiired, rotid, hamstrid, merisead ja küülikud hoitakse metallist riiulitele paigaldatud puurides.

4.2. Seina- või muu disainiga riiulid peaksid olema eemaldatavate kronsteinide ja teisaldatavate riiulitega, mis võimaldab neid muuta erinevat tüüpi laboriloomadega erineva mõõtmetega puurideks.

4.3. Tootmisala arvutamiseks on vaja lähtuda järgmistest loomade puuridesse paigutamise standarditest (tabel).

Loomaliigid

Minimaalne puuripõhja pindala looma kohta, cm2

Loomade arv

maksimaalne lubatud puuris

1 m 2 põrandapinna kohta

Hiired

65 täiskasvanut või 240 noorlooma

Rotid

20 täiskasvanut või 100 noorlooma

Hamstrid

30 - 40

merisead

15 - 18

jänesed

2000

3 - 4

Märkmed.

1. Tootmisala ligikaudseks määramiseks tuleks lähtuda arvutusest, et 1 cm 2 puuripõhja pindalast peaks moodustama 1 g looma massi.

2. Riiulid paiknevad peamiselt mööda seinu ja peaksid hõivama ligikaudu 40% tootmispinnast.

4.4. Koerad paigutatakse eraldi kajutitesse (kastidesse) rangelt individuaalselt. Kasti mõõtmed peavad vastama loomade pikkusele ja kõrgusele.

Boksi mõõtmed suurtele koertele kaaluga üle 22,5 kg - 1,2 × 1,8 m = 2,2 m 2, keskmise kaaluga 16 - 22,5 kg - 1,2 × 1,5 m = 1,8 m 2, väikese kaaluga 4,5 - 16 kg - 0,9 × 1,2 m = 2,1 m . Varraste vahe on 4,5 - 5,5 cm, metallvarraste läbimõõt on 0,5 - 0,6 cm.. Külgseinad on massiivsed. Alumise seina (põranda) külge on laotud puitkilbid.

Söötmine ja jootmine - poksis. Jalutusaedikud paigutatakse individuaalselt, kuni 2 m 2 looma kohta. Kõndimisaeg - vähemalt 2 korda päevas, kestus - vähemalt 20 minutit. Isaseid ja emaseid, kutsikaid ja agressiivseid loomi tuleks hoida eraldi.

4.5. Koerte vivaariumi territooriumile ehitatakse spetsiaalsed kajutitega varustatud ruumid. Kajutite külge on kinnitatud korpused (kõnnid). Igal koeral peaks olema oma aedik.

Kabiini mõõtmed, m: pikkus - 2; laius - 1,5; esiseina kõrgus - 2,5 ja tagaosa - 1,5 - 2; salongi ukse kõrgus - 1,7, laius - 0,7. Kabiini ukse kohale on paigaldatud klaasitud raam. Kabiini tagaseina, mis on korpuse esiseinaks paigaldatud ukse allosas on tehtud auk mõõtmetega 40 × 50 cm, mis riputatakse paksu lapiga talvekaitseks. külm.

Korpuse mõõtmed, m: pikkus - 3, laius - 2, kõrgus - 2,2. Selle esiseina on tehtud uks mõõtmetega 1,8 × 0,7 m.

4.6. Kasse hoitakse viiepealistes aedikutes, kus on riiulid (voodid), mille pindala on piisav kõikide loomade jaoks. Ühe kassi vabaõhupuuri pindala on 0,5 m2. Linnumaja sissepääsu ette on varustatud võrgust vestibüül.

4.7. Kui põllumajandusloomad ja -linnud paigutatakse vivaariumidesse teaduslikul eesmärgil, rajatakse nende jaoks ruumid kehtivate tehnoloogiliste projekteerimisstandardite kohaselt, järgides nendes standardites sätestatud zoohügieenilisi norme.

5. Loomade lubamine vivaariumi

5.1. Vivaariumi täiendamine loomade ja lindudega valmistatakse spetsiaalsetes lasteaedades, mis on nakkushaigustest vabad.

Loomade ja lindude ostmine teistesse organisatsioonidesse ja eraisikutesse on lubatud juhul, kui neid ei ole võimalik soetada puukoolides ja kui igal ostul on organisatsiooni (talu, eraisik) veterinaartõend nakkushaiguste suhtes.

5.2. Vivaariumisse võetakse loomi veterinaartõendi või lasteaia saatedokumentidega.

5.3. Lasteaiast saadud loomad paigutatakse kolmeks päevaks isoleeritud sektsioonidesse, et kohaneda uute tingimustega. Nende loomade järgnevad isolatsiooni- või karantiiniperioodid määratakse sõltuvalt loomade pidamistingimustest, eelseisvate katsete iseloomust, kaugusest, transporditingimustest jne.

5.4. Loomadele, kes ei ole saadud lasteaedadest, kehtestatakse järgmised karantiinitingimused:

hiirtele ja rottidele - 14 päeva, merisigadele ja küülikutele - 21, koertele ja kassidele - 30, teistele loomadele ja lindudele - 21 päeva.

Mõnel juhul, kui katsetes kasutatakse tiineid emaseid, vastsündinuid ja noorloomi, samuti lühiajalistes katsetes, võib karantiini kestust lühendada, kui need loomad paigutatakse isoleeritud ruumidesse ja vastava järelevalve all.

5.5. Karantiiniperioodil on loomadel igapäevane kliiniline vaatlus: termomeetria ja loomade üldseisundi registreerimine spetsiaalses päevikus.

5.6. Karantiini- ja katseosades paigutatakse loomad puhastesse, eelnevalt desinfitseeritud (autoklaavitud) puuridesse.

5.7. Karantiinihoones viibivate loomade eest hoolitsevad nendesse ruumidesse määratud personal.

5.8. Karantiiniruumidest teistesse katseloomade ruumidesse ja sektsioonidesse on keelatud toidu, kombinesooni ja varustuse väljaviimine.

5.9. Karantiiniperioodil toimub perioodiline puuride vahetus. Karantiini lõppedes viiakse vabastatud puurid ja inventar üle desinfitseerimis- ja pesuosakonda.

Rakkude ja muu varustuse puhastamine ja pesemine karantiiniosakondadest võib vivaariumi ülddesinfitseerimis- ja pesuosakonnas läbi viia alles pärast eeldesinfitseerimist. Samuti tuleb jäätmed saastest puhastada või põletada. Desinfitseerimise, desinfitseerimise ja autoklaavimise meetodid kehtestatakse igal üksikjuhul sõltuvalt asutuse spetsiifikast.

5.10. Kohanemis- või karantiiniperioodil tehakse nakkushaiguste kahtlusega loomadele bakterioloogiline uuring. Nakkushaiguse kinnitamisel hävitatakse kogu saabuva partii hiired, rotid, hamstrid, merisead ja küülikud ning koerte, kasside ja teiste loomade puhul pikeneb karantiiniperiood sõltuvalt tuvastatud haigusest.

5.11. Karantiiniruumid desinfitseeritakse põhjalikult pärast iga katseks üleantud loomapartii ja pärast iga nakkushaiguste avastamist.

5.12. Karantiinis täheldatud loomade massiliste haigestumiste korral või kui katsete käigus avastatakse üksikuid laboriloomadele ja inimestele eriti ohtlikke nakkushaigusi, viiakse vivaariumis läbi vajalikud ennetusmeetmed. Sel juhul loomkatsed ajutiselt peatatakse.

5.13. Karantiiniperioodi lõpus viiakse loomad katseosadesse.

6. Töörežiim ja loomapidamise põhireeglid

6.1. Igas eraldi ruumis on soovitatav pidada ainult ühte liiki loomi. Kui vastavalt katsetingimustele on vaja ühes jaos hoida erinevatest liikidest laboriloomi, siis tuleks need paigutada erinevatele riiulitele.

6.2. Igal puuril (kastil, linnumajal jne) peab olema silt, millel on kirjas andmed looma kohta ja katse aeg.

6.3. Laboriloomi ja -linde peetakse pesakonnal tugeva põhjaga puurides või võrkpõhjaga – põrandaga puurides. Allapanuna kasutatakse haket, laastu või allapanuturvast. Allapanu autoklaavitakse eelnevalt või hoitakse kuivas kuumuses (150–180 °C juures 15–20 minutit). Allapanukihi paksus puuris on 5 - 10 mm. Kui loomi peetakse võrkpõhjaga puurides, valatakse allapanu võrkpõranda all asuvale alusele (alusele).

6.4. Kõik laboriloomade hooldamise ja hooldamisega seotud tööd on üles ehitatud vastavalt selle asutuse juhi poolt kinnitatud päevakavale ja töögraafikule. Igapäevane rutiin näeb ette aega ruumide ja seadmete desinfitseerimiseks, sööda jaotamiseks ning katsetööde ja manipulatsioonide läbiviimiseks.

6.5. Laboriloomade söötmine toimub vastavalt kehtivatele standarditele.

6.6. Sööta ja pooltooteid hoitakse spetsiaalselt selleks ettenähtud ruumis. Sööda jaotamine toimub ettenähtud viisil.

Vivaariumi söödaköögis on lubatud säilitada mitte rohkem kui kaks kuni kolm päeva toiduvarusid. Loomade söötmisel granuleeritud söödaga ja kui puurides on söödapunkrid, on lubatud seitsme kuni kümne päeva sööda eelnev laost kättesaamine.

6.7. Söödakööki ja vivaariumi sahvrisse on varustatud spetsiaalsed kastid (metallist või seest tinaga polsterdatud) söödavarude hoidmiseks. Kiiresti riknevaid toiduaineid hoitakse külmkapis. Sööda tarnimist laost teostavad spetsiaalselt selleks määratud töötajad (töötajad, kes ei ole otseselt seotud loomade hooldamisega).

6.8. Sööda jaotamine ruumides-sektsioonides toimub spetsiaalselt selleks eraldatud töötajate või köögipersonali poolt igale sektsioonile määratud desinfitseeritud nõudes (konteinerites). Sööda mahakandmine toimub ettenähtud viisil vastavalt loomade tegelikule saadavusele iga päeva kohta.

6.9. Laboratoorsete loomade eest hoolitseva personali ja kõrvaliste isikute sissepääs söödakööki on keelatud.

6.10. Laboriloomade varustamine joogiveega toimub veevärgist, vee kvaliteet peab vastama SanPiN 2.1.4.1074-01.

6.11. Teravilja idandamine haljasmassil laboriloomade söötmiseks toimub spetsiaalselt selleks ettenähtud ruumides. Loomi on lubatud toita taimede juuremassiga, kui selles pole hallitust.

6.12. Loomade sööda jaotamine ja jootmine peaks toimuma alles pärast ruumide puhastamist, puuride puhastamist või vahetamist ning määrdunud varustuse, allapanu sisaldavate kandikute ja muude desinfitseeritavate või kõrvaldatavate materjalide eemaldamist sektsioonidest.

6.13. Puuride puhastamine ja ruumide koristamine toimub igale ruumile rangelt määratud inventari abil.

6.14. Perioodilise puurivahetuse korral siirdatakse loomi 1-2 korda nädalas eelnevalt desinfitseeritud puuridesse, kus on ettevalmistatud allapanu, söötjad ja jootjad. Määrdunud puurid koos allapanu, söötjate ja jooturitega viiakse desinfitseerimis- ja pesuosakonda nende edasiseks töötlemiseks.

6.15. Rakke puhastatakse iga päev. Samal ajal kogutakse puuridest pärit saastunud allapanu ja muud jäätmed spetsiaalsetesse kaanega metallmahutitesse. Mahutid suletakse tihedalt ja viiakse desinfitseerimis- ja pesuosakonda.

6.16. Võrkpõhjaga puuride ja puuridest eraldatud aluste kasutamisel vahetatakse viimased perioodiliselt (vähemalt kord nädalas) uute vastu. Määrdunud alused koos allapanuga viiakse nende edasiseks töötlemiseks desinfitseerimis- ja pesuosakonda.

6.17. Kui üks töötaja teenindab mitut tüüpi laboriloomi, töödeldakse esmalt merisigade puurid, seejärel puurid hiirte, rottide ja küülikutega ning viimasena ruumid, kus peetakse koeri ja kasse.

6.18. Puuride, söötjate ja jootjate pesemine ja desinfitseerimine otse sektsioonides on keelatud.

6.19. Sektsioonides tehakse enne tööpäeva lõppu põrand märgpuhastus, kasutades 1% kloramiini lahust või mõnda muud desinfektsioonivahendit. Vähemalt kord kuus toimub sanitaarpäev, mille käigus koristatakse kõik ruumid. Sanitaarpäeva järjekorra määrab vivaariumi juhataja.

6.20. Puuride, söötjate, jootjate ja muude seadmete desinfitseerimist, puhastamist ja pesemist teostavad spetsiaalselt desinfitseerimis- ja pesuosakonda määratud töötajad. Seadmete puhastamise ja desinfitseerimise tõhususe kontroll on määratud vivaariumi veterinaararstile.

6.21. Jäätmete (allapanu, sõnnik, söödajäägid jne) kogumise, ladustamise, äraveo (või kõrvaldamise) tingimused tuleb igal konkreetsel juhul kindlaks määrata kokkuleppel Rospotrebnadzori kohalike omavalitsuste ja asutustega. Nakatunud materjaliga töötamisel on vaja jäätmed neutraliseerida autoklaavimise või desinfitseerimislahustega töötlemise teel.

6.22. Katseloomadega lõikudes tuleks pidevalt jälgida temperatuuri ja niiskuse režiimi. Loomade pidamise ruumide õhukeskkonna kvaliteedi kontrollimiseks on soovitatav perioodiliselt (2-3 korda kuus) määrata kahjulike gaaside (dioksiid ja ammoniaak) kontsentratsiooni.

6.23. Loomade katseteks üleandmine toimub ühekordsete nõuete järgi vastavalt laborite iga-aastasele taotlusele, mille kinnitab asutuse juht. Loomadega töötamine on lubatud ainult vivaariumi päevakavaga ettenähtud tundidel.

6.24. Kui sektsioonidest leitakse haigeid loomi, hävitatakse need katse läbiviija teadmisel või viiakse isolaatorisse. Haigestunud loomade edasise kasutamise küsimus lahendatakse hiljemalt kahe päeva jooksul.

6.25. Loomade surnukehi säilitatakse spetsiaalses külmikus mitte rohkem kui üks päev enne patoanatoomilist lahkamist, misjärel need utiliseeritakse. Loomade surnukehade hoidmine puurides ja põrandal katsesektsioonides on rangelt keelatud.

6.26. Loomade patoloogilise anatoomilise lahkamise viib läbi katse läbiviija. Looma surma korral, olenemata katsest, viibib lahangul vivaariumi loomaarst.

6.27. Iga loomade surma või sundtapmise juhtum tuleb registreerida spetsiaalses päevikus.

6.28. Vivaariumi külastamine kõrvalistel isikutel ilma eriloata on keelatud. Vivaariumis tööd tegevad asutuse töötajad peavad:

järgima kehtestatud igapäevase rutiini reegleid ja vivaariumi töögraafikut;

viia läbi oma katseloomade süstemaatilisi vaatlusi;

säilitada esmane dokumentatsioon, õigeaegne etikettide täitmine katseloomadega puuridel;

külastada ainult neid vivaariumi ruume, kus on sellele töötajale määratud loomi;

pärast katsete või muude katseloomadega käimasolevate tööde lõppemist lahkuma töökohalt nõuetekohases järjekorras;

jälgima katsest lahkunud, kukkunud või tapma sunnitud katseloomade õigeaegset mahakandmist;

teavitama vivaariumi spetsialiste kõigist täheldatud katseloomade haigusjuhtudest, samuti õigeaegselt teavitama vivaariumi spetsialiste loomade väidetavatest patoloogilistest seisunditest vastavalt katse tingimustele.

6.29. Katseloomadega vivaariumis töid tegeva asutuse töötajatel on keelatud ilma vivaariumi spetsialistide nõusolekuta anda töötajatele juhiseid loomade pidamis- ja söötmisviisi muutmiseks.

6.30. Kui selle asutuse töötajad teevad teistes asutustes ühisuuringuid loomade kohta, on neil töötajatel sel ajal keelatud töötada oma instituudi (asutuse) (kliiniku) vivaariumis.

6.31. Kõik toimingud, mis võivad laboriloomadele valu tekitada (operatsioonid, täielik verejooks, andurite implanteerimine jne, samuti loomade sundtapmine), tuleb läbi viia anesteetikumidega. Kui vastavalt katse tingimustele on anesteesia kasutamine vastunäidustatud, tuleb kõik ülaltoodud toimingud läbi viia niipea kui võimalik.

6.32. Katse ajal peab seda katset läbiviiv töötaja tingimata järgima järgmisi laboriloomade (katse)loomade humaanse kohtlemise reegleid.

Juhtudel, kui on oodata kirurgilist sekkumist või katset valu stimulatsiooniga, tuleb enne looma masina külge sidumist teha anesteesia.

Anesteetikumi kogus tuleks arvutada 1 kg või 1 g looma massi kohta. Aine nimetus ja selle kogus tuleb märkida mitte ainult katse protokolli, vaid ka spetsiaalsele kaardile.

Katse ajal, kui see osutub algselt arvutatust pikemaks, on anesteetikumide täiendav manustamine kohustuslik.

Kui akuutne katse peaks lõppema looma surmaga, peab katse läbiviija looma enne anesteetikumi toime lõppemist tapma.

Pärast kirurgilise sekkumise lõppu tuleb loom spetsiaalsel kanderaamil viia operatsioonijärgsesse ruumi, mis välistab kudede nihkumise, õmbluste lahknemise jms.

Katse läbiviija peab ette nägema valu ilmnemise võimaluse loomal operatsioonijärgsel perioodil ja määrama valuvaigistid.

7. Vivaariumi saatjate arv

7.1. Vivaariumi saatjate arv määratakse sõltuvalt katseuuringute mahust ja iseloomust, samuti laboriloomade arvust. Sel juhul tuleb lähtuda alljärgnevatest sama liigi loomade koormuse normidest hooldustöötaja kohta (arvestades loomade puuri paigutamise norme).

Loomaliigid

Number

loomad

rakud

Hiired

800 - 1000

80 - 100

Rotid

600 - 700

80 - 100

Hamstrid

60 - 70

merisead

50 - 70

jänesed

Koerad

18 - 20

18 - 20

kassid

35 - 40

Kui üks inimene teenindab mitut liiki loomi, tehakse arvutus ülaltoodud standardite alusel. Igal konkreetsel juhul tuleb loomahoolduskoormuse normide kehtestamisel töötaja kohta arvestada puuride tüüpi, tootmisprotsesside mehhaniseerituse astet, söötmise tüüpi (looduslik või granuleeritud sööt), uuringute sagedus, iseloom ja omadused jne.

7.2. Radioaktiivsete ainetega või eriti ohtlike infektsioonidega töötamisel, samuti tabelis nimetamata loomaliikide pidamisel. , teenusstandardid kehtestab teadusasutuse juht, lähtudes üksikute toimingute ajastust ja arvestades kehtivaid põllumajandusloomade teenindamise standardeid.

8. Vivaariumi töötajate isikliku hügieeni reeglid

8.1. Vivariumi töötajad peaksid olema varustatud tunkede, turvajalatsite, seebi ja käterätikutega vastavalt kehtivatele eeskirjadele.

8.2. Loomadega ruumides, söödaköögis, desinfitseerimis- ja pesuosakonnas on käte desinfitseerimiseks vajalikud desinfitseerimislahused.

8.3. Vivariumi töötajad peavad:

enne tööle asumist eemaldada üleriided, jalanõud, selga panna kombinesoon, turvajalatsid;

töö lõppedes (soovitavalt enne töö algust) läbima sanitaarblokis ravi (käima dušši või vanni);

riputage koduriided ja kombinesoonid ainult individuaalse kapi erinevatesse osadesse;

perioodiliselt (kuid vähemalt kord kuus) desinfitseerima oma individuaalseid kappe;

pesta ja desinfitseerida käed kindlasti iga üksiku tööetapi lõpus vastavalt päevakavale, samuti enne söömist.

8.4. Vivaariumi tootmisruumides on rangelt keelatud süüa ja suitsetada.

8.5. Värskelt laboriloomadega tööle võetud isikud peavad läbima arstliku läbivaatuse, mis hõlmab tuberkuloositekitajate ja kogu soolenakkuste rühma analüüse. Järeluuringud viiakse läbi vähemalt kord aastas. Tuberkuloosi-, sugu-, naha- ja muude nakkushaigustega patsiendid ei tohi vivaariumis töötada.

8.6. Inimestele ohtlike nakkuslike patogeenidega loomadega katsete tegemisel läbivad vivaariumi saatjad profülaktilise immuniseerimise.

Kinnitusmeetod

Veised

Looma taltsutatakse ninavaheseina pigistades sõrmedega, Garmsi, Nikolajevi tangidega, ninarõngastega või liikumist piirates hoides köiega sarvedest, kaelast, peast ja teise aasa ümber nina. Tagajäsemed kinnitatakse nööriaasaga, mis kantakse mõlemale jäsemele veidi üle kandade. Loomade vaagnajäsemetel kabja puhastamisel ja trimmimisel saab säärele keerata.

Pullid on fikseeritud ninarõngaste ja tugeva ketiga kaelarihmaga.

Tõupullid, olenemata nende paigutusest, tuuakse uuringule ainult päitsetes ja nad kasutavad alati umbes 2 m pikkust kandepulka (karabiin), mis on kinnitatud ninarõnga külge, mis takistab loomal ootamatult inimest rünnata.

Vasikaid hoitakse kätega kaelast, kõrvadest või spetsiaalse sõlmega pimeda aasa abil ja seotakse nööriga nagi külge.

Sead

Loomad fikseeritakse seisvas asendis, haarates kinni ülemisest lõualuust metallkaabli ja käepidemehoidjaga või lihtsa konstruktsiooniga masinas.

Nuumloomi ja nooremisi on mugav hoida K.P. pakutud tangidega. Solovjov. Kultide, vanade sigade ja lakteerivate emiste käsitsemisel, eriti aedikutes, tuleb olla ettevaatlik.

Kitsed ja lambad

Loomi hoitakse sarvedest või kaelast. Vajadusel fikseerige lauale lamavasse asendisse.

Hobused

Hobused on fikseeritud nii, et nad ei saaks lüüa esi- ja tagajäsemetega ega hammustada. Hobustele tuleks läheneda veidi küljelt, õla ja abaluu suunas, soovitavalt vasakult, kuna hobune harjub sellega töötamise käigus. Lähenevad pea peale, võtavad vasaku käega päitsed, valjad või lakid ning parema käega silitavad ja patsutavad kaelale, turjale, seejärel abaluule ja õlale. Kui looma hoitakse ilma jalutusrihmata boksis, tuleks ta endale tähelepanu tõmbamiseks välja kutsuda, helistada, lausudes hellitavaid sõnu. On vaja, et hobune seisaks peaga inimese poole.

Masinas või haakepostil asuvale loomale ei tohi läheneda tagant, vaid mõnevõrra küljelt sellelt küljelt, kuhu ta vaatab.

Termomeetria, rektaalse läbivaatuse, erinevate meditsiiniliste manipulatsioonide ajal on loomaarsti töö ohutuse tagamiseks vaja tõsta rindkere jäseme sellelt küljelt, kust spetsialist manipuleerib, või panna ühele või mõlemale tagajäsemele. .

Rindjäse fikseeritakse harja või oletatava osa abil tõstes ja randmeliigeses painutades. Samal ajal seisavad nad selg pea vastu looma küljel. Tõstetud jäset hoitakse kahe käega ja pikaajaliste manipulatsioonide ajal - seljale visatud pahtli või köie abil. Looma ülestõstetud jäset ei saa põlvele panna, kuna loomal on neljas toetuspunkt, mis pole inimesele ohutu. Trossi ei tohi siduda ühegi eseme külge ega mässida ümber looma keha, sest ootamatu kukkumise korral ei saa hobune jäset kiiresti vabastada. Keha tagumiste osade uurimisel on vaagnajäse fikseeritud. Hobuse laudja juures seistes näoga saba poole toetuvad nad ühe käega makloki sisse ja teise käega patsutavad kergelt jalga ülalt alla, tõstavad selle üles, kinnitavad pahtlivöö või panevad nööriaasa peale, mis on seejärel läbitakse esijäsemete vahelt, tehakse ring ümber kaela ja seotakse mitteveniva aasaga. Kangekaelsete ja rahutute hobuste taltsutamiseks kasutatakse vingerpussi ja huuletange. Keeramise rakendamiseks peate sisestama oma käe keerdsilmusesse. Haarake ülahuulest, tõmmake see ette, liigutage vasaku käega keeramisaas huulele ja keerake see tihedalt kinni. Loomi saab turvaliselt fikseerida spetsiaalsetes masinates. Masinas on soovitatav siduda hobune venituse külge ja kangekaelse looma külge, et see kokku ei vajuks, tuua rihmad kõhu alla.

kaamelid

Kaamelid tuuakse uuringutele päitsete otsas. Kaamelitele tuleb läheneda ettevaatlikult, eelistatavalt küljelt (rindkere jäsemete küljelt). Nende loomade taltsutamise meetodid on samad, mis veistel ja hobustel. Arvesse tuleks võtta nende loomade käitumise eripärasid. Soovitav on, et kaamelite kinnitamisse kaasataks töötajad, kes nende eest pidevalt hoolitsevad.

Lind

Lind on fikseeritud, hoides jäsemete ja tiibade abil loomulikus asendis, ilma rinda pigistamata, et vältida lämbumist. Veelindudega (haned, pardid) töötades peate hoidma pead, et vältida lööki silma, ja tegema manipuleerimisi käeulatuses.

karusloomad

Loomi hoitakse spetsiaalsete tangide või kätega lõuendis (puuvillavoodriga) labakindades. Nad panevad selle lauale ja hoiavad ühe käega kaelast, teisega torsost. Suuõõne saab avada V.L. disainitud haigutuste abil. Berestov, on soovitatav kasutada spetsiaalseid koonu. Saate loomi kinnitada võrgulõksudesse, kasutada valuvaigisteid või lokaalanesteetikumidega rahusteid, aga ka anesteetikumi.

Koerad

Peremehe abiga pannakse loomadele suukorv või seotakse suu kinni tugeva patsiga. Selleks kantakse lõugadele ülalt palmik, mis seotakse lihtsa sõlmega alalõua alla, seejärel kinnitatakse lõpuks merisõlmega kuklasse. Kui kahtlustatakse marutaudi, aga ka vihaseid ja rahutuid koeri, on parem paigutada nad spetsiaalsesse metallpuuri, mille üks külg liigub ja näpistab seda. Koerte lamavasse asendisse kinnitamiseks kasutatakse väikeloomadele mõeldud operatsioonilauda, ​​mis võimaldab neile anda mis tahes tööks mugava asendi.

kassid

Valulike manipulatsioonide ajal kinnitatakse loomad spetsiaalsesse riidest varrukasse või mähitakse rätikusse, jättes vaba kehaosa, mida uurida. Koon saab kinni siduda nagu koeral ja jalgu saab kinnitada kätega, nahk- või kummikindaid kandes.

SNiP 11.01-2003. Ettevõtete, hoonete ja rajatiste ehitamise projektdokumentatsiooni väljatöötamise, kooskõlastamise, kooskõlastamise ja koostamise korra juhend.

. SanPiN 2.2.1/2.1.1.1200-03. Ettevõtete, rajatiste ja muude objektide sanitaarkaitsetsoonid ja sanitaarklassifikatsioon (Uus väljaanne. Kinnitatud Vene Föderatsiooni peasanitaararsti määrusega nr 74, 25. september 2007, registreeritud Vene Föderatsiooni justiitsministeeriumis nr. 10995, 25. jaanuar 2008).

Joogivesi. Tsentraliseeritud joogiveevarustussüsteemide veekvaliteedi hügieeninõuded. Kvaliteedi kontroll.

praegune

MUK 4.2.2939-11

METOODILISED JUHISED

4.2. KONTROLLI MEETODID. BIOLOOGILISED JA MIKROBIOLOOGILISED TEGURID

Tulareemia laboratoorse diagnostika korraldamise ja läbiviimise kord territoriaalse, piirkondliku ja föderaalse tasandi laborites


Kasutuselevõtu kuupäev: alates kinnitamise hetkest

1. Välja töötatud föderaalse riikliku tervishoiuasutuse "Rospotrebnadzori Venemaa katkuvastase uurimistöö instituut "mikroob" (V.V. Kutyrev, I.N. Sharova, N.A. Osina, E.S. Kazakova, E.A. Plotnikova, S. A. Piontkovsky, T. D. V. Krassovskaja). Utkin, SA Štšerbakova); M.V. Chesnokova, A.V. Mazepa, S.A. Tatarnikov); Rospotrebnadzori föderaalne rahvatervise asutus "Stavropoli katkuvastase uurimistöö instituut" (A.N. Kulichenko, O.V. Maletskaja, T.V. Taran, AP Beyer, osariigi AV-Healthcaanre); Rospotrebnadzori Volgogradi katkuvastase uurimise instituut (V. V. Aleksejev, AV Lipnitski, VA Antonov, DV Viktorov); Rospotrebnadzori föderaalne tervishoiuasutus "Doni-äärne Rostov katkuvastane uurimisinstituut" (N.V. Pavlovitš, N.L. Pichurina, N.V. Aronova, N.N. Onoprieenko, M.V. Tsimbalistova, A.S. Vodopjanov); Rospotrebnadzori föderaalne tervishoiuasutus "katkuvastane keskus" (V.E. Bezsmertny, S.M. Ivanova); Rospotrebnadzori föderaalne eelarveline tervishoiuasutus "Föderaalne hügieeni- ja epidemioloogiakeskus" (V.G. Sennikova, M.V. Zarochentsev, V.V. Mordvinova); Rospotrebnadzori föderaalne teadusasutus "Riiklik rakendusmikrobioloogia ja biotehnoloogia teaduskeskus" (I.A. Djatlov, A.N. Mokrievitš, S.F. Biketov, M.V. Khramov, N.I. Luneva); Tervishoiu- ja sotsiaalarengu ministeeriumi föderaalne riigieelarveasutus "GISK L.A. Tarasevitši järgi" (I.V. Borisevitš, L.V. Sayapina).

3. Kinnitatud tarbijaõiguste kaitse ja inimhoolekande järelevalve föderaalse talituse juhi, Venemaa Föderatsiooni riikliku sanitaararsti G. G. Oništšenko poolt 14. juulil 2011

1 kasutusala

1 kasutusala

1.1. Need juhised määratlevad territoriaalse, piirkondliku ja föderaalse tasandi laborite tulareemia laboratoorse diagnostika korraldamise ja läbiviimise korra, nende koostoime vormid ja meetodid, uuringu nomenklatuuri ja ulatuse, nõuded laboritele, spetsialistidele ja uuringusse kaasatud personalile. uuringute läbiviimisest, uurimistöö logistikast, töö bioloogilisest ohutusest.

1.2. Need juhised on mõeldud Vene Föderatsioonis tulareemia riiklikku sanitaar- ja epidemioloogilist järelevalvet teostavate asutuste bakterioloogiliste laborite, ravi- ja profülaktiliste ning katkuvastaste asutuste spetsialistidele.

2. Regulatiivsed viited

2.1. Föderaalseadus 03.03.1999 N 52-FZ "Rahvastiku sanitaar- ja epidemioloogilise heaolu kohta" .
______________
30. märtsi 1999. aasta föderaalseadus N 52-FZ "Rahvastiku sanitaar- ja epidemioloogilise heaolu kohta" . - Andmebaasi tootja märkus.

2.2. Vene Föderatsiooni valitsuse 29. oktoobri 2007. aasta dekreet N 720 * "Nakkushaiguste tekitajate kasutamisega seotud tegevuste litsentsimise määruse punkti 5 muutmise kohta", kinnitatud Vene Föderatsiooni valitsuse jaanuarikuu määrusega 22, 2007 N 31 *.
________________
* Dokument muutus kehtetuks Vene Föderatsiooni valitsuse 16. aprilli 2012. a määruse N 317 alusel.

2.3. Vene Föderatsiooni riikliku peasanitaararsti dekreet 24. veebruarist 2009 N 11 "Erakorraliste aruannete esitamise kohta sanitaar- ja epidemioloogilise iseloomuga rahvatervise valdkonna eriolukordadest" (registreeritud justiitsministeeriumis Venemaa Föderatsiooni 10. aprillil 2009 N 13745).

2.4. Vene Föderatsiooni tervishoiu- ja sotsiaalarengu ministeeriumi 7. juuli 2009. aasta korraldus N 415n "Tervishoiualase kõrg- ja kraadiõppe meditsiinilise ja farmaatsiaharidusega spetsialistide kvalifikatsiooninõuete kinnitamise kohta" (registreeritud justiitsministeeriumis Vene Föderatsiooni 9. juulil 2009 N 14292).

2.6. SP 1.2.036-95 "I-IV patogeensusrühma kuuluvate mikroorganismide arvestuse, ladustamise, ülekandmise ja transportimise kord" (kinnitatud Vene Föderatsiooni riikliku sanitaar- ja epidemioloogilise järelevalve komitee 28. augusti 1995. aasta määrusega N 14 ).

2.7. SP 3.1.7.2642-10 "Tulareemia ennetamine" (kinnitatud Vene Föderatsiooni riikliku peasanitaararsti määrusega 31. mai 2010 N 61 "SP 3.1.7.2642-10 kinnitamise kohta". Registreeritud ministeeriumis Vene Föderatsiooni kohtunik 7. juulil 2010 N 7745).

2.8. SP 1.3.1285-03 "I-II patogeensuse (oht) rühma kuuluvate mikroorganismidega töötamise ohutus" (kinnitatud Vene Föderatsiooni riikliku peasanitaararsti määrusega 15. aprillist 2003 N 42 Sanitaar- ja epidemioloogilised eeskirjad SP 1.3.1285-03" . Registreeritud Vene Föderatsiooni Justiitsministeeriumis 10. mail 2003 N 4545).

2.9. SP 1.3.1318-03* "Sanitaarse ja epidemioloogilise järelduse väljastamise kord I-IV patogeensuse (ohtlikkuse) rühma inimeste nakkushaiguste patogeenide, geneetiliselt muundatud mikroorganismide, bioloogilise päritoluga mürkide ja helmintidega töötamise võimaluse kohta" ( heaks kiidetud Vene Föderatsiooni riikliku peasanitaararsti otsusega 30. aprillist 2003 N 85 "Sanitaar- ja epidemioloogiliste eeskirjade SP 1.2.1318-03 kehtestamise kohta". Registreeritud Vene Föderatsiooni justiitsministeeriumis mail 19, 2003, N 4558).
______________
*Arvatavasti algne viga. Tuleks lugeda: SP 1.2.1318-03. - Andmebaasi tootja märkus.

2.12. SP 3.4.2318-08 "Vene Föderatsiooni territooriumi sanitaarkaitse" (kinnitatud Vene Föderatsiooni riikliku peasanitaararsti määrusega 22. jaanuarist 2008 N 3 "Sanitaar- ja epidemioloogiliste eeskirjade SP 3.4 kinnitamise kohta" .2318-08" . Registreeritud Vene Föderatsiooni Justiitsministeeriumis 3.04 .2008 N 11459).

2.13. SanPiN 2.1.7.2790-10 "Meditsiinijäätmete käitlemise sanitaar- ja epidemioloogilised nõuded" (kinnitatud Vene Föderatsiooni riikliku peasanitaararsti 9. detsembri 2010. aasta määrusega N 163. Registreeritud Venemaa justiitsministeeriumis Föderatsiooni 17. veebruaril 2011 N 19871).

2.14. SanPiN 2.1.3.2630-10 "Meditsiinitegevusega tegelevate organisatsioonide sanitaar- ja epidemioloogilised nõuded" (kinnitatud Vene Föderatsiooni riikliku peasanitaararsti dekreediga 18. mai 2010 N 58. Registreeritud Venemaa justiitsministeeriumis Föderatsiooni 9. augustil 2010 N 18094).

2.15. Eksperimentaalsete bioloogiliste kliinikute (vivaariumide) korraldamise, varustuse ja hooldamise sanitaarreeglid (kinnitatud NSVL riikliku peasanitaararsti poolt 06.04.1973 N 1045-73).

2.16. MU 3.1.2007-05 "Tulareemia epidemioloogiline seire".

2.17. MU 3.3.2.2124-06 "Katku, koolera, siberi katku, tulareemia patogeenide bioloogiliste näitajate diagnostiliste toitekeskkondade kontroll".

2.18. MUK 4.2.2316-08 "Bakterioloogilise toitekeskkonna monitooringu meetodid".

2.19. MU 1.3.2569-09 "Nukleiinhapete amplifikatsioonimeetodeid kasutavate laborite töö korraldamine töötamisel I-IV patogeensusrühma mikroorganisme sisaldava materjaliga".

2.20. MU 4.2.2495-09 "Ohtlike bakteriaalsete infektsioonide (katk, siberi katk, koolera, tulareemia, brutselloos, malleus ja melioidoos) patogeenide tundlikkuse määramine antibakteriaalsete ravimite suhtes."

3. Lühendite loetelu

LPS - lipopolüsahhariid

MPU - meditsiini- ja ennetusasutus

OOI – eriti ohtlikud infektsioonid

SP - sanitaar- ja epidemioloogilised eeskirjad

SanPiN - sanitaar- ja epidemioloogilised eeskirjad ja eeskirjad

MU – juhised

PBA – patogeenne bioloogiline aine

MFA - fluorestseeruvate antikehade meetod

ELISA - ensüümi immuunanalüüs

PCR - polümeraasi ahelreaktsioon

RA - aglutinatsioonireaktsioon

RNGA - kaudse hemaglutinatsiooni reaktsioon

RTNHA - kaudse hemaglutinatsiooni pärssimise reaktsioonid

RNAt – antikehade neutraliseerimise reaktsioon

MIS - magnoimmunosorbendid

RLA - lateksi aglutinatsiooni reaktsioon

IC - immunokromatograafia

IC test - immunokromatograafiline test

4. Üldsätted

Haiguse tunnused ja tulareemia põhjustaja

Tulareemia on zoonoosne süsteemne looduslik fokaalne bakteriaalne nakkushaigus, mida iseloomustavad üldise joobeseisundi sümptomid, palavik, põletikulised muutused nakkusvärava piirkonnas, piirkondlik lümfadeniit ja kalduvus pikale kulgemisele.

Looduslikes tingimustes on tulareemia tekitaja peamised reservuaarid ja allikad metsloomad (umbes 50 liiki), peamiselt erinevat tüüpi närilised ja jänesed. Looduslike tulareemiakollete territooriumil võivad nakatuda lambad, sead ja veised. Patogeeni reservuaariks ja kandjateks on ka verdimevad lülijalgsed: iksodiidi- ja gamasiidilestad, sääsed, hobukärbsed, kirbud. Haige inimene ei kujuta endast epidemioloogilist ohtu.

Nagu kõiki zoonoose, iseloomustab tulareemiat palju mehhanisme (aspiratsioon, kontakt, fekaal-oraalne, edasikanduv), samuti levikuteed ja -tegurid. Vastavalt haiguste ja nendega seotud terviseprobleemide rahvusvahelisele statistilisele klassifikatsioonile (10. redaktsioon. Geneva, 2003, (ICD-10)) ja vastavalt peamise patoloogilise protsessi lokaliseerimisele eristatakse järgmisi tulareemia vorme:

A21.0 - haavandiline (haavand-bubooniline);

A21.1 - okulo-nääre (okulo-bubooniline);

A21.2 - kopsu;

A21.3 - seedetrakti (kõhuõõne);

A21.7 - üldistatud;

A21.8 - muud tulareemia vormid (anginoos-bubooniline);

5.1.1. Nõuded tulareemia uuringuid teostavate meditsiiniasutuste laboritele



Meditsiiniasutustel, mille laborites tehakse tulareemia diagnostilisi analüüse, peab olema tegevusluba III-IV patogeensus(ohtlikkuse) rühma patogeenide kasutamisega seotud tegevuste läbiviimiseks.

Tervishoiuasutuste laboritel peab olema sanitaar-epidemioloogiline järeldus III-IV patogeensus (ohu) rühma kuuluvate mikroorganismidega töötamise võimaluse kohta vastavalt kehtivale SP sanitaar- ja epidemioloogilise järelduse väljastamise korra kohta patogeenidega töötamise võimaluse kohta. inimeste nakkushaigustest I-IV patogeensus(ohu)rühma ), geneetiliselt muundatud mikroorganismid, bioloogilist päritolu mürgid ja helmintid.

Koolera vibriose (kahtlase) isoleeritud kultuuride arvestus, ladustamine, ülekandmine ja transportimine tuleks läbi viia vastavalt kehtivatele regulatiivdokumentidele, mis käsitlevad I–IV patogeensusrühmade mikroorganismide arvestuse, ladustamise, ülekandmise ja transportimise korda.



Uuringute läbiviimine kõigil etappidel - proovide võtmine, ladustamine, laborisse tarnimine, registreerimine, uurimisprotseduur, tulemuste väljastamine, suhtlemine Rospotrebnadzori institutsioonidega - peab vastama kehtivate regulatiivsete ja haldusdokumentide nõuetele.



Tulareemia analüüse võivad teha mitte nooremad kui 18-aastased spetsialistid, kellel on meditsiiniline ja bioloogiline kõrgharidus ja keskharidus, kes on läbinud koolituse erialal "Bakterioloogia" III astme nakkushaiguste patogeenidega ohutu töötamise meetodite väljatöötamiseks. -IV patogeensus(ohu)rühmad, kellel on asutuse juhi korralduse alusel luba töötamiseks PBA III-IV patogeensusrühmadega. Tulareemia diagnostilisi analüüse tegevatel spetsialistidel peavad olema vajalikud kutseoskused vastavalt tehtud uuringute nomenklatuurile (lisa 8).

Nakkushaiguste patogeenide kasutamisega seotud tegevustega tegelevad spetsialistid peavad vähemalt kord viie aasta jooksul oma kvalifikatsiooni tõstma ja omama eriarstitunnistust.









Tulareemia diagnostiliste uuringute kvaliteedikontroll tervishoiuasutuste laborites hõlmab:












Dokumenteerimise reeglid





Materjali võtmiseks ja tulareemia diagnostiliste testide tegemiseks bakterioloogilistes laborites peavad tervishoiuasutustel olema:





Töötajad peavad olema varustatud kombinesooni ja isikukaitsevahenditega (kliinilise materjali proovide võtmiseks ja immunoseroloogiliste reaktsioonide läbiviimiseks).

5.1.2. Uurimistöö nomenklatuur ja ulatus

Kliinilised asutused valivad kliinilise materjali tulareemia kahtlusega isikute, tulareemia eri vormidega ja vaktsineeritud patsientide hulgast, samuti surnud isikute lõikematerjali.

Tervishoiuasutuste bakterioloogilistes laborites uuritakse tulareemiaga ja tulareemia vastu vaktsineeritud patsientide vereseerumeid immunoseroloogiliste ja allergoloogiliste meetoditega:

1) antikehade tuvastamine paarisseerumites;

2) leukotsüütide lüüsi reaktsiooni läbiviimine.

Tervishoiuasutuse nakkusarst hindab haigete allergoloogilist seisundit, tehes tulariiniga allergiatesti.

5.1.3. Tulareemia laboratoorse diagnoosimise järjekord meditsiiniasutuste laborites

Kliinilise materjali proovide võtmine ja proovide transport

Patsientidelt võtavad materjalid tervishoiuasutuse meditsiinitöötajad patsiendi vastuvõtmisel, enne antibakteriaalsete ravimitega ravi alustamist. Proove võtavad kaks meditsiinitöötajat, kellest üks on nakkushaiguste spetsialist või üldarst (kirurg), kes on koolitatud eriti ohtlike infektsioonide diagnoosimiseks ja bioloogilise ohutusnõuete järgimiseks töötamisel nakkushaiguste patogeene sisaldava kliinilise materjaliga. I-II patogeensusrühmadest. Vaktsineeritud inimestelt võtavad materjalid tervishoiuasutuste meditsiinitöötajad

Lõikmaterjali võtavad patoloogiliste ja anatoomiliste osakondade (või BSME) meditsiinitöötajad eriti ohtlike infektsioonide spetsialisti juuresolekul, juhindudes kehtivatest metoodilistest juhistest esmaste epideemiavastaste meetmete korraldamiseks ja rakendamiseks nakkuse avastamise korral. haige (surnukeha) nakkushaiguste kahtlusega, mis põhjustavad hädaolukordi elanikkonna sanitaar- ja epidemioloogilise heaolu piirkondades, järgides I-II rühma patogeensete bioloogiliste mõjuritega töötamisel bioloogilise ohutuse reguleeritud nõudeid.

Rospotrebnadzori asutuste bakterioloogilistesse laboritesse saatmiseks võtavad nad:

haigetelt inimestelt, olenevalt haiguse kliinilisest vormist: bubo sisu, materjal kurgust, silma sidekestast, haavandieritus, röga, veri;

surnud inimestelt: suurenenud lümfisõlmed, kopsude ja põrna muutunud piirkonnad, hingetoru;

vaktsineeritud inimestelt: veri.

Igat tüüpi materjalidest proovid võetakse steriilsetes klaas- või plastnõudes, mis vastavad proovide mahule.

Täpitäpp sõnast bubo võtta kuni 14-20 päeva haigust süstlaga mahuga vähemalt 5 ml. Torkamiskoha nahka töödeldakse 70% alkoholiga, seejärel määritakse 5% joodilahusega ja pühitakse uuesti 70% alkoholiga. Nõel sisestatakse nii, et selle ots ulatub bubo keskosani, pärast mida, tõmmates kolvi rikkeni, eemaldatakse nõel aeglaselt. Sisu kantakse keeratava korgiga steriilsesse tuubi. Enne materjali võtmist on võimalik sisestada bubosse 0,3-0,5 ml steriilset 0,9% naatriumkloriidi lahust ja seejärel valida sisu. Bubo avamisel võetakse materjal perifeersest tihedast osast ja eemaldatavast fistulist eraldi.

Enne võtmist eemaldatav haavand, paapulid, vesiikulid või lõhenenud haavand süstimiseelse desinfitseeriva lapiga puhastage nahk kahjustatud piirkonna ümbert hoolikalt, vajadusel eemaldage nekrootilised massid ja mäda steriilse marlilapiga. Rullides tampooni üle haavapinna keskelt perifeeriasse, imendub materjal tampoonile 5-10 s. Tampoon koos materjaliga asetatakse katseklaasi või transpordisöötmesse. Süstla kasutamisel sisestatakse nõel vesiikuli (pustuli) serva ja liigutatakse seejärel keskkoha suunas. Haavandite korral torgatakse tihe serv.

Flegm kogutakse spetsiaalsetesse keeratava kaanega laia suuga konteineritesse.

Eemaldatav neelu limaskest võtta tühja kõhuga või 3-4 tundi pärast söömist. Spaatliga õrnalt keelt vajutades asetage tampoon mandlivõlvide ja keele vahele (ärge puudutage tampooniga huuli, põski, keelt) ja koguge materjal neelu tagumiselt pinnalt, mandlitelt ja põletiku- või haavandite piirkondadest. limaskestast. Tampoon koos materjaliga asetatakse steriilsesse katseklaasi või katseklaasi koos transpordi- või toitainekeskkonnaga.

Veri uuringute jaoks võetakse neid järgides aseptika reegleid ja isikukaitsemeetmeid. Kubitaalveenist võetakse ühekordse süstlaga 10-20 ml verd ja kantakse katseklaasi toitesöötmesse nakatamiseks ja biotesti loomade nakatamiseks, antikoagulandiga katseklaasi (4% naatriumtsitraadi lahus suhe 1:10 veremahu või EDTA 6% lahuse suhtega 1:20 veremahu suhtes) PCR analüüsiks katseklaasis, et saada seerumit immunoseroloogiliste reaktsioonide jaoks.

Veretilga aglutinatsioonireaktsiooni ja leukotsütolüüsi reaktsiooni seadistamiseks võetakse verd sõrmest.

Silma sidekesta väljaheide tuleb võtta kuni 17. haiguspäevani, kasutades steriilset tampooni, mis on eelnevalt niisutatud 0,9% naatriumkloriidi lahusega. Proove igast silmast kogutakse eraldi tampooniga kahe või kolme ringikujulise liigutusega mööda silma limaskesta. Tampoon koos materjaliga asetatakse steriilsesse katseklaasi või transpordisöötmesse. Rohke mädaerituse korral steriilse kuiva vatitikuga võetakse mäda alumise silmalau sisepinnalt, liikudes käelaba lõhe sisenurga suunas. Tuleb jälgida, et ripsmed ei puudutaks tampooni (hoia käega silmalaugust). Materjali tarnimine laborisse 1 tunni jooksul, kui kasutatakse spetsiaalseid transpordivahendeid - ööpäeva jooksul.

Proovidega konteinerid märgistatakse, töödeldakse väljast desinfitseeriva lahusega, pakitakse tõmblukuga kilekotti ja asetatakse bioloogilise materjali transportimiseks teadustööks mõeldud konteinerisse. Pakitud materjaliga konteiner suletakse ja saadetakse kulleriga spetsiaalselt selleks ettenähtud transpordil laborisse. Pärast proovide pakkimist töödeldakse laua pinda desinfitseeriva lahusega.

Laborisse toimetatud proovide puhul täita juhend (Lisa 1), kus on märgitud: asutuse aadress, kuhu proov (proovid) saadetakse; patsiendi (surnu) perekonnanimi, nimi, isanimi; sugu, vanus, elukoht, haigestumise kuupäev, arstiabi otsimise kuupäev, haiglaravi kuupäev, esialgne diagnoos; epidemioloogilise ajaloo tunnused; kas patsiendile anti antibakteriaalne ravi enne materjali võtmist (millal, milliseid ravimeid kasutati, millises annuses); bakterioloogiliseks uuringuks võetud materjali tüüp; uuringu eesmärk; materjali kogumise kuupäev ja kellaaeg; aadress, kuhu bakterioloogilise uuringu tulemused teatada; asutuse nimi, ametikoht, proovi (näidised) saatja perekonnanimi ja initsiaalid, allkiri; näidise tarneaeg; proovide võtnud isiku ametikoht, perekonnanimi ja initsiaalid.

Materjal transporditakse laborisse külmakotis. Materjali külmas säilitamise tingimuste puudumisel ei tohiks aeg materjali võtmise hetkest uuringu alguseni ületada 5-6 tundi.



Immunoseroloogiliste reaktsioonide määramine ja registreerimine toimub meditsiiniasutuse bakterioloogilises laboris vastavalt diagnostiliste preparaatide kasutamise juhistele. Haiguse dünaamikas uuritakse paarisseerumeid 7-10-päevase intervalliga. Antikehade tiitri 4-kordne või enam tõus on diagnostiliselt usaldusväärne.

Haigete ja vaktsineeritud isikute ülitundlikkuse määravad in vitro

Tulareemiaga nakatunud või nakatumiskahtlusega isikutel tulariiniga (tulareemia vedel allergeen, suspensioon naha skarifikatsiooniks) tehtud allergiatesti vormistamise ja tulemuste registreerimise teostab tervishoiuasutuse infektsionist vastavalt käesolevale määrusele. juhised ravimi kasutamiseks.

Tuleb meeles pidada, et allergiline test jääb positiivseks inimestel, kellel on olnud tulareemia.

5.1.4. Uurimistulemuste registreerimine

Seerumite seroloogilise ja allergilise tulareemia testimise tulemuste registreerimine tervishoiuasutuste bakterioloogilistes laborites toimub vastavalt asutuses kehtestatud arvestusvormidele. Juhtumilugude vastuste väljastamine – ühtsete vormide järgi.

5.1.5. Meditsiiniasutuste ja Rospotrebnadzori organisatsioonidega suhtlemise kord

5.2. Vene Föderatsiooni subjekti FBUZ "Hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" filiaalide tulareemia laboratoorse diagnostika korraldamise ja läbiviimise kord omavalitsuses (teema linn ja halduspiirkonnad, mis on territoriaalselt ühendatud)

5.2.1. Nõuded FBUZ "hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" filiaalide laboritele Vene Föderatsiooni moodustava üksuse omavalitsuses, mis tegelevad tulareemia uurimisega

Lubade ja regulatiivsete dokumentide olemasolu

FBUZ "Hügieeni- ja epidemioloogiakeskus" Vene Föderatsiooni moodustavas üksuses, mille filiaalide alusel tegutsevad bakterioloogilised laborid, peab omama litsentsi II-IV (või III-IV) patogeenide kasutamisega seotud tegevuste läbiviimiseks. ) patogeensuse (ohu) rühmad.

Vene Föderatsiooni moodustava üksuse omavalitsuse FBUZ "hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" filiaalide laboritel, mis tegelevad tulareemia uuringutega, peab olema sanitaar- ja epidemioloogiline järeldus III-IV rühma mikroorganismidega töötamise võimaluse kohta. patogeensus (oht) vastavalt kehtivale SP sanitaar- ja epidemioloogilise järelduse väljastamise korra kohta I-IV patogeensuse (ohu) rühma inimeste nakkushaiguste patogeenide, geneetiliselt muundatud mikroorganismide, bioloogilise päritoluga mürkide ja helmintidega töötamise võimaluse kohta .

FBUZ "Hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" filiaalide laborid Venemaa Föderatsiooni moodustava üksuse omavalitsuses peavad olema vastavalt Vene Föderatsiooni kehtivale seadusandlikule raamistikule ettenähtud viisil tehnilise pädevuse jaoks akrediteeritud.

Kliinilise materjali proovide arvestus, säilitamine, üleandmine ja transport tuleks läbi viia vastavalt kehtivale SP-le, mis käsitleb I-IV patogeensusrühmade mikroorganismide registreerimise, säilitamise, ülekandmise ja transportimise korda.

Jäätmete kõrvaldamine peab toimuma vastavalt kehtivatele sanitaar- ja epidemioloogilistele nõuetele meditsiinijäätmete käitlemisel.



Nõuded tulareemia uuringute läbiviimisega seotud spetsialistidele ja personalile

Tulareemia analüüse võivad teha mitte nooremad kui 18-aastased spetsialistid, kellel on meditsiiniline ja bioloogiline kõrgharidus ja keskharidus, kes on läbinud koolituse erialal "Bakterioloogia" III astme nakkushaiguste patogeenidega ohutu töötamise meetodite väljatöötamiseks. -IV patogeensuse (ohtlikkuse) rühmad, kellel on asutuse juhi korralduse alusel luba töötamiseks PPA III-IV rühmadega. Tulareemia diagnostilisi analüüse tegevatel spetsialistidel peavad olema vajalikud kutseoskused vastavalt tehtud uuringute nomenklatuurile (lisa 8).

Nakkushaiguste patogeenide kasutamisega seotud tegevusi teostavad spetsialistid peavad omama eriarstitunnistust ja end täiendama vähemalt kord viie aasta jooksul.

Nõuded personali ohutuse tagamiseks

Igas tulareemiauuringuid tegevas laboris peab olema dokumentide pakett, mis määrab töötajate ohutu töörežiimi, võttes arvesse töö iseloomu, tehnoloogia iseärasusi ja mikroorganismide omadusi. Dokumendid peavad olema kooskõlastatud bioloogilise ohutusnõuete täitmise järelevalve komisjoniga, töökaitsespetsialistidega, tuletõkkemeetmetega ja kooskõlastatud asutuse juhiga. Töö ajal personaliohutuse eeskirjade tundmise kontrollimise tulemused registreeritakse spetsiaalses päevikus.

Kõik töötajad peavad järgima III-IV patogeensus(ohu)rühma nakkushaiguste patogeenidega kahtlaste või nakatunud materjalidega töötamise ohutuse tagamise nõudeid vastavalt kehtivatele normatiivdokumentidele.

Enzootilise territooriumi epizootoloogilise uuringuga seotud asutuse töötajad tuleks vaktsineerida tulareemia vastu, seejärel jälgida immuunsuse taset ja registreerida tulemused spetsiaalses ajakirjas.

Laboratoorsete uuringute sisemise kvaliteedikontrolli korraldamise kord

Tulareemia diagnostiliste testide kvaliteedikontroll laborites hõlmab:

diagnostiliste preparaatide ja katsesüsteemide, destilleeritud vee, kemikaalide ja desinfektsioonivahendite kvaliteedikontroll;

mõõtevahendite õigeaegne taatlemine, katseseadmete sertifitseerimine;

laboratoorsete klaasnõude steriliseerimise kvaliteedikontroll;

auru- ja kuivõhusterilisaatorite töö juhtimine;

bakteritsiidlampide töö juhtimine;

külmikute temperatuuri reguleerimine;

termostaatide temperatuuri reguleerimine;

tööstusruumide ja bokside õhuseisundi, temperatuuri, niiskuse kontrollimine;

ruumide sanitaarseisundi, sh puhastamise, desinfitseerimise, pindadelt ja seadmetelt mahapesemise kontrollimise tingimused.

Kontrolli tulemused registreeritakse spetsiaalsetes ajakirjades.

Dokumenteerimise reeglid

Laboratoorse dokumentatsiooni, sealhulgas registreerimis- ja tööpäevikute pidamine toimub vastavalt kehtivate normatiiv- ja metoodiliste dokumentide nõuetele.

Nõuded materiaalsetele ressurssidele, mis on vajalikud tulareemia diagnostiliste testide tegemiseks

Hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse filiaalide bakterioloogilistes laborites tulareemia diagnostiliste testide tegemiseks peab olema kättesaadav:

kehtestatud korras registreeritud diagnostilised preparaadid, katsesüsteemid (lisa 3);

keemilised reaktiivid (4. lisa);

seadmed, seadmed, kulumaterjalid (lisa 5, 6).

Materjali võtmiseks on soovitatav omada meditsiinilist komplekti (universaalne pakend materjali võtmiseks inimestelt ja keskkonnaobjektidelt eriti ohtlike nakkushaiguste testimiseks).

Personal peab olema varustatud kombinesooni ja isikukaitsevahenditega.

5.2.2. Uurimistöö nomenklatuur ja ulatus

FBUZ "Hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" filiaalide laborid Venemaa Föderatsiooni moodustava üksuse omavalitsusüksustes jälgivad epidemioloogilise järelevalve teostamisel vaktsineeritud inimeste tulareemiavastase immuunsuse seisundit.

Uuringud viiakse läbi järgmises ulatuses:

1) antikehade tuvastamine;

2) leukotsüütide lüüsi reaktsiooni lavastamine.

Kui tervishoiuasutuse laboris ei tehta tulareemia seroloogilisi analüüse, uuritakse patsientide või selle haiguse kahtlusega patsientide seerumit FBUZ-i "Hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" Venemaa Föderatsiooni subjekti filiaalis. kokkulepe).

5.2.3. Tulareemia laboratoorse diagnoosimise protseduur FBUZ "hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" filiaalide laborites Vene Föderatsiooni moodustava üksuse omavalitsuses

Vaktsineeritud inimeste immuunsust kontrollitakse 5 aastat pärast vaktsineerimist ja seejärel - 1 kord 2 aasta jooksul.

Tulareemiavastase immuunsuse seisundi kontrollimiseks kasutatakse allergilist (leukotsütolüüsi reaktsioon) või ühte seroloogilist uurimismeetodit (RA, volumetriline aglomeratsioonireaktsioon, RNHA, ELISA). Sel juhul on parem kasutada seroloogilisi uurimismeetodeid. Uuringu materjaliks on vaktsineeritu veri ja vereseerum. Vajadusel saab kasutada veretilga reaktsiooni, mis võimaldab anda vastuse 5 minuti jooksul ja saab toimetada kuiva veretilgaga.

Patsientidelt või isikutelt, kellel kahtlustatakse haiguse dünaamikas tulareemiat, uuritakse paarisseerumit 7-10-päevase intervalliga. Antikehade tiitri 4-kordne või enam tõus on diagnostiliselt usaldusväärne.

Vaktsineeritud ja haigete isikute ülitundlikkus määratakse in vitro leukotsütolüüsi reaktsioonis vastavalt kehtivatele tulareemia epidemioloogilise seire juhistele.

5.2.4. Uurimistulemuste registreerimine

Uurimistulemuste registreerimine Venemaa Föderatsiooni moodustava üksuse FBUZ "Hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" filiaalide laborites toimub vastavalt asutuses kehtestatud raamatupidamisvormidele. Vastuste väljastamine – ühtsete vormide järgi.

5.2.5. FBUZ "hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" filiaalide suhtlemise kord Vene Föderatsiooni moodustava üksuse omavalitsuses teiste Rospotrebnadzori organisatsioonidega

Teave tulareemia laboratoorse diagnoosimise tulemuste kohta Vene Föderatsiooni subjekti FBUZ hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse filiaali laboris edastatakse vastavalt kehtivatele regulatiivsetele dokumentidele.

5.3. Vene Föderatsiooni moodustava üksuse FBUZ "hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" tulareemia laboratoorse diagnostika korraldamise ja läbiviimise kord

5.3.1. Vene Föderatsiooni subjekti FBUZ "hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" tulareemia laboratoorse diagnostika korraldamise ja läbiviimise kord, mille struktuuris puuduvad eriti ohtlike infektsioonide osakonnad ja laborid

Tulareemia laboratoorse diagnostika korraldamise ja läbiviimise kord FBUZ "Hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" laborites Vene Föderatsiooni moodustavates üksustes, mille struktuuris ei ole eriti ohtlike infektsioonide osakondi ega laboreid, vastab Venemaa Föderatsiooni moodustava üksuse FBUZ "hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" filiaalide laborite tulareemia laboratoorse diagnostika korraldamise ja läbiviimise kord (jaotis 5.2).

5.3.2. Vene Föderatsiooni teemal FBUZ "Hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" eriti ohtlike infektsioonide laborite tulareemia laboratoorse diagnostika korraldamise ja läbiviimise kord

5.3.2.1. Nõuded eriti ohtlike infektsioonide laboritele FBUZ "Hügieeni- ja epidemioloogiakeskus" Vene Föderatsiooni aines, mis viib läbi tulareemia uuringuid.

Lubade ja regulatiivsete dokumentide olemasolu

FBUZ "Hügieeni- ja epidemioloogiakeskus" Vene Föderatsiooni subjektis, mille alusel tegutsevad eriti ohtlike infektsioonide laborid, mis teostavad tulareemia uuringuid, peab omama litsentsi II-patogeenide kasutamisega seotud tegevuste läbiviimiseks. IV patogeensuse (ohu) rühmad.

Vene Föderatsiooni moodustava üksuse OOI FBUZ "hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" laboritel, mis tegelevad tulareemia uurimisega, peavad olema sanitaar- ja epidemioloogiline järeldus II-IV patogeensuse (ohu) rühma mikroorganismidega töötamise võimaluse kohta. vastavalt kehtivale SP-le sanitaar- ja epidemioloogiliste järelduste väljaandmise korra kohta I-IV patogeensuse (ohu) rühma inimeste nakkushaiguste patogeenide, geneetiliselt muundatud mikroorganismide, bioloogilise päritoluga mürkide ja helmintidega töötamise võimaluse kohta.

Vene Föderatsiooni moodustava üksuse FBUZ "hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" laborid peavad olema akrediteeritud tehnilise pädevuse jaoks ettenähtud viisil vastavalt Vene Föderatsiooni kehtivale õigusraamistikule.

Tulareemia põhjustaja isoleeritud kahtlaste kultuuride ja/või kliinilise materjali proovide arvestus, ladustamine, ülekandmine ja transportimine tuleks läbi viia vastavalt kehtivale SP-le, mis käsitleb patogeensusrühmade mikroorganismide registreerimise, säilitamise, ülekandmise ja transportimise korda. I-IV.

Jäätmete kõrvaldamine peab toimuma vastavalt meditsiinijäätmete käitlemisel kehtestatud sanitaar- ja epidemioloogilistele nõuetele.

Uuringute läbiviimine kõigil etappidel: proovide võtmine, ladustamine, laborisse tarnimine, registreerimine, uurimisprotseduur, tulemuste väljastamine, suhtlemine Rospotrebnadzori organisatsioonidega peab vastama kehtivate regulatiivsete dokumentide nõuetele.

Nõuded tulareemia uuringute läbiviimisega seotud spetsialistidele ja personalile

Tulareemia uuringuid võivad läbi viia mitte nooremad kui 18-aastased meditsiinilise, bioloogilise kõrghariduse ja keskharidusega spetsialistid, kes on läbinud koolituse erialal "Bakterioloogia" ohutu töö algtõdedega I rühma patogeensete bioloogiliste mõjuritega (PBA). -II, kellel on asutuse juhi korralduse alusel luba töötada PPA II - IV rühmadega. Tulareemia uuringuid tegevatel spetsialistidel peavad olema vajalikud erialased oskused (lisa 8).

Nakkushaiguste patogeenide kasutamisega seotud tegevusi teostavatel spetsialistidel peavad olema tunnistused ja nad peavad end täiendama vähemalt kord viie aasta jooksul.

Nõuded personali ohutuse tagamiseks

Igas tulareemia uuringuid teostavas laboris peab olema dokumentide pakett, mis määrab töötajate ohutu töörežiimi, võttes arvesse töö iseloomu, tehnoloogia iseärasusi ja mikroorganismide omadusi. Dokumendid peavad olema kooskõlastatud bioloogilise ohutusnõuete täitmise järelevalve komisjoniga, töökaitsespetsialistidega, tuletõkkemeetmetega ja kooskõlastatud asutuse juhiga. Töö ajal personaliohutuse eeskirjade tundmise kontrollimise tulemused registreeritakse spetsiaalses päevikus.

Spetsialistid, kes viivad läbi tulareemia ensootilise territooriumi episootoloogilist uurimist ja selle laboratoorset abi, peaksid olema tulareemia vastu vaktsineeritud, millele järgneb immuunsuse taseme jälgimine ja tulemuste registreerimine spetsiaalses ajakirjas.

Kõik töötajad peavad järgima kahtlase või I-II patogeensus(ohu)rühma nakkushaiguste patogeenidega nakatunud materjalidega töötamise ohutuse tagamise nõudeid vastavalt kehtivatele normatiivdokumentidele.

Laboratoorsete uuringute sisemise kvaliteedikontrolli korraldamise kord

Tulareemia diagnostiliste uuringute kvaliteedikontroll OOI FBUZ "Hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" laborites hõlmab:

toitekeskkonna, diagnostiliste preparaatide ja katsesüsteemide, antibakteriaalsete preparaatidega ketaste, destilleeritud vee, keemiliste reaktiivide ja desinfektsioonivahendite kvaliteedikontroll;

mõõtevahendite õigeaegne taatlemine, katseseadmete sertifitseerimine;

laboratoorsete klaasnõude steriliseerimise kvaliteedikontroll;

auru- ja kuivõhusterilisaatorite töö juhtimine;

bakteritsiidlampide töö juhtimine;

külmikute temperatuuri reguleerimine;

termostaatide temperatuuri reguleerimine;

tööstusruumide ja bokside õhuseisundi, temperatuuri, niiskuse kontrollimine;

ruumide sanitaarseisundi, sh puhastamise, desinfitseerimise, pindadelt ja seadmetelt mahapesemise kontrollimise tingimused.

Kontrolli tulemused registreeritakse spetsiaalsetes ajakirjades.

Dokumenteerimise reeglid

Laboratoorse dokumentatsiooni, sh registreerimis- ja tööpäeviku pidamine toimub igapäevaselt vastavalt kehtivate metoodiliste dokumentide nõuetele.

Nõuded materiaalsetele ressurssidele, mis on vajalikud tulareemia diagnostiliste testide tegemiseks

Tulareemia diagnostiliste testide läbiviimiseks peavad laborid olema:

ettenähtud korras registreeritud toitekeskkond (lisa 2);

kehtestatud korras registreeritud diagnostilised preparaadid, katsesüsteemid, antibakteriaalsed preparaadid (lisa 3, 7);

keemilised reaktiivid (4. lisa);

instrumendid, seadmed, kulumaterjalid (lisa 5, 6);

meditsiinikomplekt (universaalne pakend inimestelt ja keskkonnaobjektidelt materjali võtmiseks eriti ohtlike nakkushaiguste uurimiseks).

Toitekeskkonnad kuuluvad kohustusliku kontrolli alla vastavalt kehtivatele bioloogiliste näitajate (tulareemia tekitaja) diagnostiliste toitekeskkondade kontrollimise juhistele.

5.3.2.2. Uurimistöö nomenklatuur ja ulatus.

Venemaa Föderatsiooni moodustavate üksuste OOI FBUZ "hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" laborid teostavad:

tulareemia kahtlusega patsientide ja surnute materjalide uurimine;

tulareemiauuringule kuuluvate isikute materjali uurimine vastavalt epidemioloogilise seire nõuetele (kokkuleppel);

territooriumi epizootoloogilise uuringu käigus kogutud proovide uurimine;

keskkonnaobjektidelt võetud proovide uurimine;

tulareemia tekitaja isoleeritud kultuuride tuvastamine vastavalt lühendatud skeemile;

toitekeskkonna kvaliteedikontroll ja inhibeerivad omadused.

Materjali diagnostilised uuringud viiakse läbi järgmises mahus:

a) patogeeni määramine natiivses materjalis ekspress- ja kiirendatud diagnostika meetoditega (MFA, PCR, ELISA, RA, RNHA, RNAb, selektiivne kontsentratsioon MIS-il, millele järgneb ELISA);

b) bioloogilise proovi moodustamine;

c) külvamine toitekeskkonnale, et isoleerida patogeeni puhaskultuur;

d) tulareemia tekitaja vastaste antikehade tuvastamine;

e) valitud kultuuri identifitseerimine vastavalt vähendatud skeemile.

5.3.2.3. Tulareemia diagnostiliste uuringute järjekord FBUZ "hügieeni- ja epidemioloogiakeskuse" eriti ohtlike infektsioonide laborites Vene Föderatsiooni teemal.

Kliinilise materjali uurimise kord

Materjali valimine toimub vastavalt punktile 5.1.

Tulareemia põhjustaja tuvastamiseks kasutatakse diagnostilisi preparaate ja kompleksset agarit või munakollast söödet, millele on lisatud tsüsteiini, koeekstrakte, defibrineeritud verd, ettenähtud viisil registreeritud glükoosi. Vastavalt kehtivatele regulatiivsetele ja metoodilistele dokumentidele tuleks testida iga agari partii tundlikkust tulareemia mikroobi kasvu suhtes. Võõra mikrofloora kasvu pärssimiseks penitsilliin (100 ühikut/ml), ampitsilliin (100 ühikut/ml), polümüksiin B (50-100 µg/ml), kefsool (või tsefaleksiin), amfoteritsiin B (või amfoglükamiin), ristomütsiinsulfaat kasutatakse ja mõned teised antibakteriaalsed ravimid.

Põllukultuuridega objekte inkubeeritakse temperatuuril 37 °C. Põllukultuure vaadatakse 24-48 tunni pärast (edaspidi - iga päev 10 päeva jooksul alates külvamise hetkest).

Proovide ettevalmistamine PCR-i jaoks toimub vastavalt I-IV patogeensusrühmade mikroorganisme sisaldava materjaliga töötamisel nukleiinhapete amplifikatsioonimeetodeid kasutavate laborite töö korraldamise juhendi nõuetele.

Haige inimese materjali uurimine (laip)

I etapp:

määrde valmistamine, fikseeritud määrde värvimine Grami, Romanovsky-Giemsa, fluorestseeruvate tulareemia immunoglobuliinide järgi;

PCR seadistus;

immunoseroloogiliste reaktsioonide määramine tulareemia tekitaja antigeenide ja antikehade tuvastamiseks (RA, MFA, RNGA, RNAt, ELISA jne);

leukotsütolüüsi (patsiendi veri) reaktsiooni määramine;

biotesti loomade nakatumine (merisead intraperitoneaalselt; valged hiired intraperitoneaalselt või subkutaanselt (veri, bubo punctate), subkutaanselt (röga, kõri tampooniga, avatud bubo, haavandi eraldumine, sidekesta);

külv tihedale toitekeskkonnale (veri, bubo punctate);

külv tahkele toitekeskkonnale koos võõrfloora inhibiitoritega (röga, kurgu tampoon, substraat avatud bubost, eritis haavandist, sidekesta).

II etapp(2-6 tundi alates õppetöö algusest):

MFA, ELISA, PCR tulemuste arvestus;

RA, RPGA ja RNAt tulemuste arvestamine 18-24 tunni pärast;

väljaandmine esialgne positiivne vastus põhineb väikeste gramnegatiivsete või lillavärviliste kookoidvarraste olemasolul määrdudes, kui need on värvitud Romanovsky-Giemsa järgi, nende spetsiifiline luminestsents fluorestseeruvate tulareemia immunoglobuliinidega värvimisel, positiivne PCR tulemus, positiivsed immunoseroloogilised reaktsioonid negatiivsete kontrollidega.

III etapp(48-72 tundi uuringu algusest):

loodusliku materjali saagi vaatamine agarplaatidel;

kahtlaste kolooniate määrde bakterioskoopia (Grami plekk);

IC-testi seadistamine tulareemiamikroobi ekspressidentifitseerimiseks kahtlastest kolooniatest pärit materjaliga;

tulareemia mikroobi kahtlaste kolooniate sõelumine toitaineagaril, et isoleerida puhas kultuur;

väljaandmine esialgse positiivse vastuse kinnitus põhineb iseloomuliku kasvu olemasolul tihedal toitainekeskkonnal, väikeste gramnegatiivsete kookipulkade olemasolul kolooniate määrdudes, positiivne IC-test tulareemia mikroobi kiireks tuvastamiseks.

IV etapp(3-5 päeva alates uuringu algusest):

pärast puhaskultuuri kogumist selle tuvastamiseks katsete seadmine. Eraldatud kultuuri identifitseerimine toimub järgmiste testide abil:

raku morfoloogia, Grami pleki ja fluorestseeruvate tulareemia immunoglobuliinide olemus;

kasvu iseloom FT-arape toitesöötmel või McCoy volditud munakollase söötmel;

kasvu puudumine lihtsal toitainekeskkonnal (lihapeptoonagar ja/või puljong);

kultuuride aglutineerimine spetsiifilise tulareemiaseerumiga või RLA isoleeritud kultuuriga;

tulareemia mikroobi ekspressidentifitseerimine IC-testi abil;

liigispetsiifiliste DNA sihtmärkide tuvastamine PCR abil;

surnud biotesti loomade lahkamine, elundite ja vere inokuleerimine tahkele toitekeskkonnale, elundite määrdude-jälgede valmistamine ja uurimine, PCR elundisuspensioonidega.

V etapp(5-15 päeva alates uuringu algusest):

põllukultuuride identifitseerimise tulemuste arvestamine;

surnud biotesti loomadelt saadud materjali saagi vaatamine;

tapetud biotesti loomade lahkamine ja ekspertiis;

väljaandmine lõplik positiivne vastus viiakse läbi tulareemia mikroobi puhaskultuuri eraldamise natiivse materjali põllukultuuridest, selle identifitseerimise morfoloogiliste, kultuuriliste omaduste, immunoseroloogiliste reaktsioonide positiivsete tulemuste, patogeeni DNA olemasolu, samuti isoleerimise põhjal. surnud või tapetud laboriloomade identsed kultuurid.

Teine rühm. Väga vastuvõtlikud, kuid mittetundlikud imetajad (nakatuvad, kui tulareemia tekitaja üksikud mikroobsed rakud satuvad kehasse, haigestuvad tõsiselt, kuid vabanevad kiiresti mikroobist, omandades stabiilse immuunsuse). Sellesse rühma kuuluvad põldhiired, kõikvõimalikud rotid ja maa-oravad, oravad, vöötohatised, koprad, siilid, desman, vesirästas, rästas ja mõned teised imetajate liigid.

Kolmas rühm. Pahale vastuvõtlikud ja praktiliselt mittetundlikud imetajad. Nende hulka kuuluvad enamik röövloomadest ja põllumajandusloomadest.

Välimaterjali uurimise skeem

Välimaterjali laboratoorsed uuringud algavad kohe pärast selle saamist. Selle lühiajaline säilitamine (mitte üle 20 tunni) on lubatud temperatuuril 4–6 °C. Kui loomadele tehakse kogumiskohas lahkamine, saab elundeid säilitada ja laborisse toimetada säilitusaines. Säilitusainetena võib kasutada vaseliini-parafiini segu (1 osa parafiini ja 10 osa vaseliiniõli segatakse ja steriliseeritakse 45 minutit keevas veevannis kuumutades), 5% naatriumkloriidi lahust, lisaks sügavkülmutamine vedelas lämmastikus, kasutatakse jne Säilitusainetes ja madalal temperatuuril säilivad loomaorganid ühe kuu.

Uuring viiakse läbi bioloogilise, bakterioskoopilise (valgus- ja luminestsentsmikroskoopia), bakterioloogilise (inokuleerimine toitekeskkonnale, puhaskultuuride eraldamine ja nende identifitseerimine), molekulaargeneetilise (PCR analüüs) ja immunoseroloogilise (RA, RLA, RNHA, RNAt, RNAg) meetodil. , ELISA) meetodid. Materjali uurimise skeem sõltub loomade tundlikkuse rühmast ja materjali tarnimise vormist.

väikesed imetajad, püütud looduses püügivahenditega või elusalt, uuritakse grupimeetodil, kombineerides ühte proovi mitme sama liigi looma (5-10) elundid, mis on püütud ühest kohast.

Uurimiseks võetakse tükid põrnast, maksast, lümfisõlmedest, verd või rinnaõõnest "väljauhtumised". Materjali uuritakse bioloogiliste, molekulaargeneetiliste ja immunoseroloogiliste meetoditega.

Elundi suspensiooni kasutatakse biotesti loomade nakatamiseks ning tulareemia tekitaja antigeenide ja DNA tuvastamiseks. Vereseerumit või rinnaõõnde "pesemist" uuritakse tulareemia tekitaja vastaste antikehade olemasolu suhtes.

Loomade surnukehad kes surid looduses, surid laboris või loomad, kelle lahkamisel leiti tulareemiale iseloomulikke patoloogilisi ja anatoomilisi muutusi, tehakse individuaalsed uuringud. Põrna, maksa, neerude, lümfisõlmede, luuüdi tükke uuritakse bioloogiliste, bakterioloogiliste, molekulaargeneetiliste ja immunoseroloogiliste meetoditega.

Väljakujunenud episootia tingimustes võib esimese rühma loomi uurides piirduda elundite külvamisega toitekeskkonnale ja elundite määrde bakterioskoopiaga, hoides osa neist kuni uuringute tulemuste saamiseni külmas. Kahtlastel juhtudel kasutage bioloogilist meetodit. Teise ja kolmanda rühma loomi uuritakse tõrgeteta bioloogilise meetodiga.

Tõenäosus tuvastada tulareemia põhjustaja esimese rühma loomade elundites mikroskoopilise uurimise käigus (parem on kasutada fluorestsentsmikroskoopiat) on palju suurem kui teise rühma loomade surnukehade organite määrde bakterioskoopia ajal. .

Lemmikloomad(veised, sead, lambad, põhjapõdrad) on liigid, mis ei ole tulareemia suhtes tundlikud (kolmas rühm). Nende uuringus kasutatakse peamiselt immunoseroloogilisi meetodeid (RA, RNGA, ELISA), harvemini - intradermaalset testi tulariiniga. Bakterioloogilisi ja bioloogilisi meetodeid kasutatakse ainult surnud, tapetud või haigete loomade uurimisel. Uurige peamiselt lümfisõlmi ja põrna. Seroloogilises uuringus tuleks arvesse võtta võimalust avastada ristreaktsioone Brucellaga ja loomade soolte mikroobse flooraga. Koduloomade seerumeid on soovitatav testida vähemalt kahe seroloogilise testiga. RNGA positiivseid reaktsioone tuleks jälgida RTGA-s.

Röövlindude pelletid ja röövloomade sõnnik on soovitatav õppida individuaalselt. Pelletites ja väljaheidetes oleva tulareemiamikroobi surm toimub kiiresti (esimesel päeval; negatiivsetel temperatuuridel võib-olla aeglasemalt) ja seetõttu ei ole selle materjali bioloogilised ja bakterioloogilised uuringud asjakohased. Pelletite ja allapanu proove kasutatakse tulareemia tekitaja antigeeni otsimiseks immunoseroloogiliste meetoditega ja DNA otsimiseks PCR abil.

Verdimevad putukad ja muud selgrootud uuritakse rühmameetodil, samast kohast võetud sama liigi (perekonna) putukad või selgrootud liidetakse üheks prooviks.

Täiskasvanud ixodid-puugid ühendavad kuni 50 isendit.

Vastsed on ühendatud 100-200 isendisse, nümfid - 50-100 isendisse, sõltuvalt nende rasvumise astmest. Iksodiidipuukide vastsete ja nümfide pesemist alkoholis ei teostata, sest. see võib analüüsi kahjustada.

Kirbud, gamasiidilestad, täid sorteeritakse liikide (perekondade) ja loomaliikide järgi, kellelt need koguti, asetatakse steriilsetesse katseklaasidesse ja seejärel töödeldakse samal viisil nagu iksodiidipuukide vastseid ja nümfe. .

Verdimevad kakskõlalised putukad eutaniseeritakse eetri aurudega, et piirata nende liikuvust. Kärbestel lõigatakse jäsemed ja tiivad eelnevalt ära, sääski ja kääbusid uuritakse tervikuna. Ühte analüüsi kaasatakse kuni 25-50 kärbest või kuni 100 sääske või kuni 250 kääbust.

Hüdrobiontid - tiiblased, amfijalgsed, dafniad, kükloobid ja teised enne uuringut pestakse neid mitmes osas vees ja 1-2 portsjonis steriilses destilleeritud vees. Katte või kestaga loomadel eemaldatakse viimased võimalusel. Loomad ühendatakse 5-10-50 isendiga rühmadesse, olenevalt üksikute liikide suurusest.

Tulareemia mikroobi või selle DNA tuvastamine selgrootutel on kõige tõhusam bioloogilise meetodi ja PCR kasutamisel. Samuti on IC-testi abil võimalik tuvastada tulareemia spetsiifilist antigeeni LPS.

Veeproovid(100-200 ml) võetakse erinevatest veehoidlatest: jõgedest, ojadest, tiikidest, järvedest, soodest, kaevudest jne. Kõige tõhusam vee-uuring tulareemia sookollete nimedes talvel. Proove võetakse varjulises kohas, 10-20 cm sügavuselt seisva või vähese vooluga vee pinnast. Igast punktist tuleks võtta 2 proovi. Proove võetakse loomade elupaikadest (söötmislaudade, urgude, kobraste või ondatrate onnide läheduses). Patogeeni kontsentreerimiseks kasutatakse filtreerimist, tsentrifuugimist, magnetsorbente ja muid meetodeid. Uuringus kasutatakse bioloogilist meetodit (valgele hiirele süstitakse subkutaanselt kuni 1 ml ja meriseale kuni 5 ml vett), molekulaargeneetilisi ja immunoseroloogilisi meetodeid, mille eesmärk on tuvastada haiguse põhjustaja DNA ja antigeenid. tulareemia.

Tekkis viga

Makse ei sooritatud tehnilise vea tõttu, raha teie kontolt
maha ei kantud. Proovige mõni minut oodata ja korrake makset uuesti.

Riis. 1. Korduvate närvide okste eraldamise ja lõikamise operatsioon, et tekitada koertel vaikne haukumine.
1-kilpnäärme vasakpoolne sagar; 2 - vaguse närvi vanus haru; 3 - vasakpoolne sternohyoid lihas (tõmmatud konksuga); 4 - söögitoru; 5-hingetoru.

Ruum, kus asuvad loomadega puurid, peaks olema hästi ventileeritud, õhu suhteline niiskus peaks olema vahemikus 40-45%. Ka sissepuhke- ja väljatõmbeventilatsiooni olemasolul on ammoniaagi ja loomsete jäätmete sisalduse vähendamiseks õhus soovitatav kasutada turba allapanu või superfosfaadi lisandiga saepuru. Rakkude kogumise protsessi saab automatiseerida; puhastamine toimub 1-2 korda päevas.
Puuri esiseinale on paigaldatud söötja, autodrinker ning riputatud silt, kuhu kantakse põhiandmed looma kohta, kirurgilise sekkumise liik jms.
Küülikuid ja merisigu peetakse sageli väljaspool vivaariumi. Selleks kasutatakse rakke, paigutades need mitmele astmele ühise katuse alla. Õues pidamine aitab kaasa tervete, erinevatele haigustele vastupidavamate küülikute kasvatamisele ning on enamasti levinud puukoolides.

Katseuuringutes on suur tähtsus laboriloomade õigel hooldamisel ja söötmisel nii enne katset kui ka katse ajal.

Režiimi ja dieedi rikkumine, hügieenimeetmete mittejärgimine söötmise ajal soodustab loomade keha nõrgenemist ja suurendab nende vastuvõtlikkust erinevatele nakkus- ja somaatilistele haigustele. Nende esinemine katse ajal võib viia uuringu tulemuste moonutamiseni ja sellest tulenevalt valede järeldusteni. Söödaratsiooni tuleb lisada kõik loomaorganismile vajalikud ained (valgud, süsivesikud, rasvad, mineraalained, vitamiinid ja vesi). Jõusöödatest saavad küülikud ja merisead hirssi, kaera, nisu, otra, herneid, läätsi, vikimaisi. Kontsentraatide päevane norm: täiskasvanud küülikutele - 80 g, noorloomadele - 60 g, merisigadele - 20-25 g Loomadele on soovitatav anda päevas mitme (2-3) kultuuri seemnete segu määra. Küülikuid ja sigu võib toita toiduainetööstuse jäätmetega (linaseemned, päevalille- ja kanepikook, nisukliid). Kooki söödetakse aurutatud ja purustatud kujul ning kliid juurviljade või koogiga. Jäätmete ja kliide päevanormid on küülikutel 15-20 g ja merisigadel 5-10 g.

Mahlakast söödast antakse küülikutele ja sigadele hästi pestud ja viilutatud punast porgandit (A-vitamiin), kaalikat, peeti, kaalikat ja rutabaga. Sügis-talvisel perioodil on mahlaku sööda lisamine dieeti kohustuslik. Juurviljade päevanorm küülikutel on 100-120 g, merisigadel - 80-100 g Värske rohi ja juurviljad on suvel asendamatuks toiduks küülikutele ja sigadele, talvel idandatud vili. Koresöödast annavad kvaliteetset heina, küülikutele ka puutoitu (pärna, kase, haava, vahtra, papli oksad). Loomi toidetakse loodusliku (pastöriseeritud või keedetud või atsidofiilse) piima ja puhta mittekülma veega. Küülikud vajavad piima mitte ainult noortele loomadele, vaid ka tiinetele ja imetavatele emasloomadele.

Valgetele hiirtele ja rottidele antakse kaera, nisu, hirsi, otra, linaseemneid, kanepi, päevalilleseemneid. Loomade rasvumise vältimiseks lisatakse õliseemneid toidule väikestes kogustes. Jõusööda päevanorm: hiirtel 3-5 g ja rottidel 12-15 g. Toiduks kasutatakse ka nisuleiba (hapu rukkileib võib põhjustada kõhulahtisust), kreekereid, teravilju (kaerahelbed, pärl oder, hirss), noort mannaputru piimas. Lisaks on dieedis porgand, Antonovka õunad (viimased on eriti vajalikud seedetrakti haiguste puhul) ja rohelised toidud (salat, spinat, porgandipealsed).

Kovalevski soovitab lisada rottide toidulauale keedetud peet ja kartulipüree. Leiva ja teravilja päevane norm hiirtele on 3-3,5 g, rottidele - 15-20 g, mahlakas sööt - vastavalt 0,5-1 ja 2-3 g, roheline sööt, pestud keedetud veega ja tükeldatud, -2- 3 ja 4-6 g, naturaalne piim (pastöriseeritud või keedetud 4-5 minutit) või atsidofiilne - koguses 4-5 g hiirtele ja 6-8 g rottidele (osa piimast kasutatakse teravilja valmistamiseks) .

Lisaks peaksid kõik loomad iga päev saama lauasoola: hiired - igaüks 0,01 g, rotid - igaüks 0,07 g (pudruna), sead - 0,1 g, küülikud - igaüks 0,5 g (kontsentraadiga lahuse kujul) ja luud sööki, ligikaudu samades kogustes. Igasse hiirte ja rottide puuri pange 3-4 päevaks tükk 1–5 g kriiti. Sügis-talvisel perioodil sööda vitamiinidega rikastamiseks antakse kalaõli, kuivkiiritatud pärmi, tomatimahla ja sigu, lisaks mustsõstramahla, kibuvitsamarja tinktuuri (C-vitamiin) jne.

Kalaõli päevanorm: küülikutele 0,5 g, sigadele 0,3 g, rottidele 0,2 g ja hiirtele (kontsentraadiga või leival) 0,1 g. Küülikute allapanuks kasutatakse põhku, turvast; hiirtele ja rottidele - peen hein.

Loomi toidetakse ja joodetakse kaks korda ning imetavaid emaseid kolm korda päevas, täpselt õigel ajal. Söödakünad on kõige parem savist (küpsetatud savist), piisava raskusega, et vältida loomade poolt ümberminekut ja neid on lihtne puhastada (pesta). Söötjaid puhastatakse iga päev ja pestakse kuuma veega. Igas puuris peaks olema kaks sööturit: jõusööda ja prügi jaoks. Sööta antakse ainult värskelt.